Штамм pseudomonas acruginosa серотип 5 n 77, используемый для изготовления псевдомонозного антигена

Штамм Pseudomonas acruginosa серотип 5 N 77 (коллекция Всесоюзного государственного научно-исследовательского института ветеринарных препаратов), используемый для изготовления псевдомонозного антигена.

Изобретение относится к области ветеринарной микробиологии, в частности к получению штаммов, используемых при изготовлении препаратов для профилактики и лечения псевдомоноза животных.
Псевдомоноз пушных зверей, в том числе норок, острое инфекционное заболевание проявляется энзоотически, сопровождается геморрагическим воспалением, отеком легких, что часто ведет к гибели животных В настоящее время это заболевание зарегистрировано в странах, занимающихся клеточным разведением пушных зверей.
Возбудитель псевдомоноза обладает серотиповой вариабельностью. Данные эпизоотологических наблюдений и результаты типирования культур возбудителя псевдомоноза, выделенных от норок в разных регионах страны, показывают, что зарегистрированы преимущественно четыре серотипа возбудителя псевдомоноза, а именно 5, 6, 8 и 11 (по схеме Habs]
В настоящее время известны штаммы Pseudomonas aeruginosa, используемые для изготовления иммунных препаратов для профилактики и лечения псевдомоноза человека.
Известен также штамм Pseudomonas aeruginosa cеротипа 6 N 202, используемый для изготовления моновалентной вакцины против псевдомоноза норок.
Производственный штамм N 202 возбудителя псевдомоноза Ps. aeruginosa серотип 6 имеет нестабильные вирулентные свойства. Моновалентная вакцина, изготовленная из данного штамма, обеспечивает развитие у привитых норок устойчивость к возбудителю псевдомоноза серотипа 6, против других серотипов этого вида возбудителя вакцина не создает иммунитета.
Целью изобретения является получение штамма Ps. aeruginosa серотипа 5 N 77, обладающего стабильными свойствами вида, используемого для изготовления псевдомонозного антигена при получении гипериммунных сывороток и вакцин.
Штамм Ps. aeruginosa N 77 серотип 5 выделен из патологического материала павшей норки в 1980 г. Штамм хранится в коллекции микроорганизмов лаборатории контроля и стандартизации препаратов, применяемых в аэрозольном состоянии. Всесоюзного государственного научно-контрольного института ветеринарных препаратов.
Штамм Ps. aeruginosa серотип 5 N 77 (лабораторный N ДН) характеризуется следующими свойствами.
Морфологические свойства. Грамотрицательные палочки со слегка закругленными концами 0,6-0,9 ммк длины и 0,4-0,6 ммк ширины, расположены в хранившихся культурах поодиночке, в свежепассированных встречаются в виде коротких цепочек, подвижные, спор и капсул не образуют.
Культурально-биохимические свойства. Хорошо растет на обычных (МПБ и МПА) и специальных (бульон и агар Хоттингера и Мартена) питательных средах. Культура штамма растет при 4-41^оС. Температура 37-38^оС является оптимальной.
На плотных питательных средах растет в виде круглых с сероватым оттенком слизистых колоний, вокруг которых образуется яркая сине-зеленая зона за счет выхода в питательную среду пигмента пиоцианина.
При культивировании на жидких питательных средах культура вызывает образование поверхностной пленки серо-белого цвета, продуцирует пигмент пиоцианин сине-зеленого цвета, за счет которого среда через 18-24 ч культивирования приобретает сине-зеленую окраску. Культура штамма обладает гемолитической желатиназной, лицетиназной, каталазной активностью, Ферментирует без образования газа глюкозу, пептонизирует молоко.
Потребность в кислороде. Строгий аэроб.
Антигенные и серологические свойства. Культура штамма имеет жгутиковые Н и соматические О антигены. При идентификации с сыворотками по классификации Хабс. относится к серотипу 5. Иммунологическим фактором, определяющим серотип, является термостабильный антиген микробной клетки.
Вирулентные свойства. Культура штамма Рs aeruginosa пятого серотипа N 77 обладает стабильными вирулентными свойствами. 50% летальная доза суточной суспензии агаровой культуры составляет: для нелинейных белых мышей массой 14-16 г 60-80 млн. микробных клеток; для морских свинок массой 220-250 г 125-250 млн. микробных клеток; для тхорзофреток и норок 3-9 месячного возраста 125-500 млн. микробных клеток.
Иммуногенные свойства. При внутримышечном способе введения инактивированная 0,3%-ным р-ром формалина суточная суспензия агаровой культуры предохраняет от контрольного заражения 50% подопытных животных: морских свинок массой 350-400 г 0,063 млрд. микробных клеток; для норок и тхорзофреток 3-9 месячного возраcта 0,125-0,250 млрд. микробных клеток.
Превентивные свойства гипериммунных сывороток, полученных к штамму Ps. aeruginosa серотип 5 N 77. Гипериммунные сыворотки крови волов-продуцентов, полученные как к моновалентному антигену штамма Ps. aeruginusa N 77, так и при использовании его в ассоциации с другими серотипами штаммов возбудителя псевдомоноза достигают титра 1:3200-1:6400. Защитный титр при контрольном заражении составляет для подопытных животных 1:200.
Штамм Pseudomonas aeruginosa серотип 5 N 77 может быть использован в ветеринарной практике для изготовления моновалентной и поливалентной сыворотки против псевдомоноза сельскохозяйственных животных и пушных зверей, в том числе и норок, а также моновалентной и поливалентной вакцины для профилактики псевдомоноза норок и других сельскохозяйственных животных.
Штамм апробирован в лаборатории контроля и стандартизации препаратов, применяемых в аэрозольном состоянии, Всесоюзного государственного научно-контрольного института ветпрепаратов при получении моновалентной и поливалентной гипериммунной сыворотки, моновалентной и поливалентной вакцины.