Способ количественного определения фурагина

(21) 487580 (22) 22.10.9 (46) 07.01.9 (71) Курски институт (72) А,С. Кв (56) Курин определен основе пр мацевтичеАвторс кл, С 01 К алитической химии кокинетических, хии судебно-химиченость изобретения: агин, обрабатывают ым раствором флоим фотометрироваашенного раствора . 6 табл,цинский 4 0 Ь с ГОСУДАРСТВЕННОЕ ПАТЕНТНВЕДОМСТВО СССР(ГОСПАТЕНТ СССР) ач, О,О, Новиков и И.П. Павлик а Н,В. Спектрофотометрическое ие лекарственных препаратов на изводных 5-нитрофурана, Фаркий журнал, 1973, М 6, с,15 - 18, ое свидетельство СССР К. 1695192, 21/78. 1989. Изобретение относится к аналитической химии и может быть использовано для количественного определения фурагина как в чистом виде, так и в лекарственных формах,Известен способ количественного определения лекарственных препаратов, В нем цель достигается обработкой анализируемой пробы 5070-ным раствором серной кислоты, Оптическую плотность окрашенного продукта измеряют при длине волныА=227 нм, Однако при анализе фурагина этим методом в чистом виде и в лекарственных формах выявлены следующие недостатки: большой расход реактива, невысокая точность и чувствительность определения.Наиболее близким техническим решением к изобретению является способ количественного определения гидантоина и его производных, где к раствору фурагина, приготовленного на концентрированной серной кислоте, прибавляют цветореагент, в качестве которого используют 0,20)ь-ный ра твор хромотроповой кислоты, также при 4) СПОСОБ КОЛИЧЕСТВЕННОГО ОПРЕЛЕНИЯ ФУРАГИНА(57) Использование: в а при проведении фарма мико-токсикологических ских исследований, Сущ пробу, содержащую фур серной кислотой и водн роглюцина с последующ нием полученного окр при длине волны 481 нм готовленный на концентрированной серной кислоте. Полученную смесь нагревают на масляной бане при температуре 170 С в течение 4 мин, Оптическую плотность полученного раствора измеряют при длине волныА=540 нм, Однако при анализе фурагина этим методам в чистом виде и в лекарственных формах выявлены следующие недостатки: трудоемкость процесса, необходимость нагревания до температуры 170 С и низкая чувствительность (см. таблицу сравнительных характеристик методом М.1). Целью изобретения является повышеие чувствительности определения фурагиа в чистом виде, в лекарственных формах, Цель достигается тем, что проба, содержащая фурагин, обрабатывается химическим еагентом с последующим фотометрироваием полученного окрашенного раствора, В ачестве химического реагента используют одный раствор флороглюцина с обработай пробы, содержащей фурагин, концент1786405 рированной серной кислотой, В качестве раствора сравнения используют раствор "холостого опыта",Сопоставительный анализ заявленного решения с прототипом показывает, что заявляемый способ отличается от известного тем, что с целью повышения чувствительности определения обработку продукта, содержащего фурагин, ведут вначале концентрированной серной кислотой, а затем водным раствором флороглюцина в следующем соотношении анализируемой пробы, кислоты, цветореагента 1,0;3,9;0,1 соответс 1 венно, Оптическую плотность окрашенного раствора измеряют в диапазоне длин волн А = 470 в 4 нм, Таким образом, заявленный способ соответствует критерию "новизнаСравнение заявляемого решения с прототипом и с другими техническими решениями в данной области химии позволило выявить в них признаки, отличающие данное решение от прототипа (см, табл, %1), что О = Кх + Ь,30 35 40 О = 0,02 х + 0,01,45 50 55 2. Фотоколориметрическое определение фурагина в порошке,Точную навеску анализируемого порошка фурагина (около 0,01 г) количественно переносят в мерную колбу на 250 мл, растворяют при нагревании в дистиллированной воде, охлаждают и общий объем раствора в мерной колбе доводят до метки дистиллированной водой, После тщательного перемешивания определенный объем полученного раствора вносят в мерную колбу на 25 мл, доводят его до 0,5 мл дисприменение которых обеспечивает перевод фурагина в окрашенные растворы, соответствующие значения молярного и удельного коэффициентов светопоглощения приведены в табл, Мт б,Для фурагина оптимальным фенолом является флороглюцин.П р и м е р 1. Фотоэлектроколориметрическое определение фурагина на основе его реакции с флороглюцином, 1. Построение калибровочного графика. В мерные колбы на 25,0 мл вносят 1; 2;2,5; 4; 5 мл стандартного раствора фурагина,тиллированной водой, прибавляют 19,5 мл содержащего 8,0 мкг фурагина в 1 мл, дово- концентрированной серной кислоты и дят объемы до 5 мл дистиллированной во,5 мл 10-ного водного раствора флорогпозволяет сделать вывод о его соответствии критерию "существенное отличие".Данное техническое решение предлагает использование нового реагента водного раствора флороглюцина. Оптимальные условия количественного определения описаны ниже, соответствующие удельные и молярные коэффициенты светопоглощения приведены в табл, М.1.Химизм реакции количественного определения фурагина предположительно основан на образовании красителей Стенгауза, Целый ряд работ указывают, что в среде 300-ной серной кислоты при нагревании происходит раскрытие фуранового кольца, которое входит в состав фурагина, с образованием продуктов распада, содержащих альдегидные группы, которые определяются после добавления фенолов с образованием окрашенных растворов,Условия количественного определения фурагина с рядом производных фенола,5 10 15 20 25 дой, прибавляют по 19,5 мл концентрированной серной кислоты, по 0,5 мл 1;4-ного водного раствора флороглюцина, тщательно перемешивают, охлаждают и через 20 мин измеряют оптическую плотность полученного окрашенного раствора с помощью фотоэлектроколориметра КФК - 2 при кафф. = 490 + 10 нм в кювете с толщиной рабочего слоя 50 мм. В качестве раствора сравнения используют раствор "холостого" опыта.Зависимость светопоглощения полученных растворов, окрашенных от количества фурагина, взятого на выполнение реакции, представлена в табл.2, Свето- поглощение окрашенных растворов подчиняется закону Бугерэ-Ламберта-Бера в пределах концентраций от 8 до 40 мкг фурагина в 25 мл фотометрируемого раствора,Данные зависимости светопоглощения окрашенных растворов от количества фурагина, взятого на выполнение реакции, использованы для расчета уравнения прямой, соответствующей прямолинейному участку калибровочного графика, имеющего общий где О - оптическая плотность;1 - коэффициент пропорциональности, который равен тангенсу угла наклона калибровочного графика к оси абсцисс;х - содержание препарата в анализируемой пробе (мкг);Ь - константа, указывающая, в каком месте прямая пересекает ось ординат.С учетом рассчитанных параметров 1 и Ь уравнение прямой, соответствующей прямолинейному участку калибровочного графика для фотоэлектроколориметрического определения фурагина, имеет вид10 15 20 О = 0,0048 х - 0,0056,люцина, перемешивают, охлаждают и через 20 мин измеряют оптическую плотность полученного окрашенного раствора с помощью фотоэлектроколориметра КФК - 2 при светофильтре кафф. = 490 +. 10 нм в кювете с толщиной рабочего слоя 50 мм, В качестве раствора сравнения используют раствор "холостого" опыта.Расчет содержания фурагина в пробах производят по предварительно построенному калибровочному графику или уравнению прямой, соответствующей прямолинейному участку калибровочного графика.Результаты количественного фотоэлектроколориметрического определения порошка фурагина, рассчитанные по уравнению калибровочного графика, представлены в табл.4. Из данных табл,4 следует, что с помощью данного способа можно определить содержание фурагина в порошке с относительной ошибкой А =- + 2,09 ф,3. Фотоэлектроколориметрическое определение фурагина в таблетках по 0,05 г,Точную навеску порошка 10-ти тщательно растертых таблеток фурагина (около 0,01 г) растворяют при нагревании в дистиллированной воде в мерной колбе на 250 мл, охлаждают и доводят до метки дистиллированной водой, тщательно перемешивают. Полученный раствор фильтруют через фильтр "синяя полоса", отбрасывая первый 20 мл фильтрата, Определенный объем фильтрата вносят в мерную колбу на 25 мл, доводят его до 5 мл дистиллированной водой, прибавляют 19,5 мл концентриро в а н ной серной кислоты, 0,5 мл 1-ного раствора водного флороглюцина, тщательно перемешивают, охлаждают и через 20 мин измеряют оптическую плотность полученного окрашенного раствора с помощью фотоэлектроколориметра КФКпри светофильтре Лэф. = 490 + 10 нм в кювете с толщиной рабочего слоя 50 мм, В качестве раствора сравнения используют раствор "холостого" опыта.Расчет содержания фурагина в пробах производят по предварительно построенному калибровочному графику или по уравнению прямой, соответствующей прямолинейному участку калибровочного графика.Результаты количественного фотоэлектроколориметрического определения фурагина в таблетках по 0,05 г, рассчитанные по уравнению калибровочного графика, представлены в табл.5, Из данных табл.5 следует, что с помощью данного способа можно определить содержание фурагина в таблет 25 30 35 40 45 50 55 ках по 0,05 г с относительной ошибкой А = = +2,51 ,П р и м е р 2, Спектрофотометрическое определение фурагина на основе его реакции с флороглюцином.1, Построение калибровочного графика.В мерные колбы на 25 мл вносят 1; 2;2,5; 4; 5 мл стандартчого раствора фурагина, содержащего 40 мкг фурагина в 1 мл, доводят объемы до 5 мл дистиллированной водой, добавляют по 19,5 мл концентрированной серной кислоты, по 5 мл 1;4-ного водного раствора флороглюцина, тщательно перемешивают, охлаждают и через 20 мин измеряют оптическую плотность полученного окрашенного раствора с помощью спектрофотометра СФпри А = 481 нм в кювете с толщиной рабочего слоя 10 мм, В качестве раствора сравнения используют раствор "холостого" опыта.Зависимость светопоглощения полученных окрашенных растворов от количества фурагина, взятого на выполнение реакции, представлена в табл. 3, Светопоглощение окрашенных растворов подчиняется закону Бугера-Ламберта-Бера в пределах концентраций от 40 до 200 мкг фурагина в 25 мл конечноо фотометрического раствора,Данные зависимости светопоглощения окрашенных растворов от количества взятого на выполнение реакции фурагина использованы для расчета параметров уравнения прямой, соответствующей прямолинейному участку калибровочного графика, Оно имеет вид Данные, полученные при построении калибровочного графика для спектрофотометрического определения фуоагина, использованы для расчета удельного Е 1 Д., и молярного Бас, коэффициентов светопоглощения определяемого раствора, образующегося при взаимодействии фурагина с флороглюцином (см, табл,1),2. Спектрофотометрическое определение фурагина в порошке,Точную навеску анализируемого порошка фурагина (около 0,01 г) количественно переносят в мерную колбу на 25 мл, растворяют при нагревании в дистиллированной воде, охлаждают и общий обьем раствора в мерной колбе доводят до метки водой. После тщательного перемешивания определенный объем полученного раствора вносят в мерную колбу на 25 мл, доводят его до 5 мл дистиллированной водой, прибавля1786405 Таблица 1 Сравнительная характеристика методов количественного определения фурагинают 19,5 мл концентрированной серной кислоты и 0,5 мл 1 -ного раствора флороглюцина, тщательно перемешивают, охлаждают и через 20 мин измеряют оптическую плотность полученного окрашенного рас твора с помощью спектрофотометра Сфпри А= 481 нм в кювете с толщиной рабочего слоя 10 мм, 8 качестве раствора сравнения используют раствор "холостого" опыта,Расчет содержит фурагина в пробах про изводят по предварительно построенному калибровочному графику или по уравнению прямой, соответствующей прямолинейному участку калибровочного графика,Результаты количественного спектро фотометрического определения порошка фурагина, рассчитанные по уравнению калибровочного графика, представлены в табл,4, Из данных табл,4 следует, что с помощью данного способа можно определять 20 содержание фурагина в порошке с относительной ошибкой А = + 1,56 .3, Спектрофотометрическое определение фурагина в таблетках по 0,05 г. 25Точную навеску порошка 10-ти тщательно растертых таблеток фурагина (около 0,01 г) растворяют при нагревании в воде в мерной колбе на 250 мл, охлаждают и доводят До метки дистиллированной водОЙ, тща тельно перемешивают, Полученный раствор фильтруют через фильтр "синяя полоса", отбрасывая первые 20 мл фильтрата, Определенный объем фильтрата вносят в мерную колбу на 25 мл, доводят его до 5 мл дистил лированной водой, прибавляют 19,5 мл концентрированной серной кислоты, 0,5 мл 1-ного водного раствора флороглюцина, перемешивают, охлаждают и через 20 мин измеряют оптическую плотность получен ного окрашенного раствора с помощью спектрофотометра СОпри 1. = 481 нм в кювете с толщиной рабочего слоя 10 мм. В качестве раствора сравнения используют раствор "холостого" опыта.Расчетсодержания фурагин;, з пробах производят по предварительно построенному калибровочному графику или по уравнению прямой, соответствующей прямолинейному участку калибровочного графика.Результаты количественного спектрофотометрического определения фурагина в таблетках по 0,05 г, рассчитанные по уравнению калибровочного графика, представлены в табл.5, Их данных табл,5 следует, что с помощью данного способа можно определять содержание фурагина в таблетках по 0,05 г с относительной ошибкой А = +1,86,Результаты количественного определения фурагина представлены в табл,1 - 6. Данные табл,1 - 6 позволяют сделать вывод о том, что представленный способ целесообразно использовать для количественного определения фурагина в чистом виде в лекарственных формах,Предлагаемый способ по сравнению с прототипом повышает чувствительность и точность определения. Сравнительные характеристики предлагаемого и известного способов приведены в табл.1,Формула изобретения Способ количественного определения фурагина, включающий обработку анализируемой пробы концентрированной серной кислотой, добавление цветореагента и измерение оптической плотности окрашенного раствора, о т л и ч а ю щ и й с я тем, что, с целью повышения чувствительности определения, в качестве цветореагента добавляют 1 -ный водный раствор флороглюцина при следующем соотношении анализируемой пробы, кислоты, цветореагента 1,0: 3,9: ; 0,1 соответственно, а оптическую плотность окрашенного раствора измеряют в диапазоне длин волн А=- 490 + 10 нм,10 1786405 п=5 Х= 116 5 68,04 - 116 2,37 5 344 - (116 ) Х=2 37 Х= 68,04 Х= 3344 3344 2,37 - 116 68,04 53344 - ( 116 ) Таблица 3 Зависимость оптической плотности окрашенного раствора от количества фурагина, взятого на реакцию, и расчет уравнения калибровочного графика для спектрофотометрического определения фурагина.0048 83600 - ( 5 83600 2,752 - 580- 0,0056 0)2 5 83600 абли зультаты определения фурагина в порошке Таблица 2 Зависимость оптической плотности окрашенного раствора от количества фурагина, взятого на выполнение реакции, и расчет параметрови Ь уравнения калибровочного графика для фотоэлектроколориметрического определения фурагина.Продолжение табл, 4 агина в таблетках по 0,0 риб Результаты определен 1786405 родолжение табл, 4 аблица 513 1786405 Продолжение табл, 5 М пlп Прибор 46 250 2,5 250 2,0 250 3,0 250 2,0 250 2,0 Продолжение табл, 5 Навеска порошка истертых таблеток фурагина, взятого наанализ г 0,019165 0,029050 0,016040 0,026685 0,025550 Теоретическое содержание фурагина в ней (мкг) 10126,3 15349,2 8475,0 14100.0 13500,0 Объем раствора, полученного из навески порошка истертых таблеток фурагина, взятого на анализ мл Объем раствора, взятого на выполнение реакции мл Теоретическое содержание фурагина в пробе, взятой на анализ мкг 101,500 123,200 101,700 112,800 108,00016 1786405 15 Таблица 6 Сравнительная характеристика способов количественного анализа фурагина на основе его взаимодействия с производными фенолаЛВ и/и Применяемый фе- нол Длина волны на Сф - 46Условия проведения анализа резорцин 506 1018,01 26896,91 пирогаллол "А" 1128,14 29806,59 430 пирокатехин14507,80 549,10 459 К 5 мл пробы прибавляют 19,5 мл концентрированной серной кислоты и 0,5 мл 1%-ного водного флороглюцинК 4,5 мл пробы прибавляют 0,5 мл 10 о -н ого водно го раствора резорцина и 20 мл концентрированной серной кислоты, охлаждают и измеряют оптическую плотность против контроля,К 5 мл пробы прибавляют 4 мл 0,2-ного водного раствора пирогаллола "А" и 11 мл концентрированной серной кислоты, охлаждают и доводят общий обьем до 25 мл водой, измеряют оптическую плотность против контроля К 5 мл пробы прибавляют 2 мл 5 оь-ного водного раствора пирокатехина и 18 мл концентрированной серной кислоты, охлаждают, фотометрируют по контролю,Удельный коэффициент свето- поглоще- ния Молярный коэффициент светопог- лощения