Способ определения течения травматического шока

О 1 СЗ СООЕТСНИХ ОЦИАЛИСТИЧЕСЮ РЕСПУБЛИН 3)5 Гт 0133768н ИЗО ПЬСТВУ РСКСМ енныи 1 К гия 1980,Е 11 ИЯ медицинезиологииля лрогнотранмат ения яв ледую,1 м обГОСУДАРСТВЕННЫЙ НОМИТЕТПО ИЗОБРЕТЕНИЯМ И ОТНРЫТИЯПРИ ГКНТ СССР(71) Кишиневский государствмедицинский институт.(56) Патологическая фиэиолои экспериментальная терапияр 5, с. 20-2 с.(57) Изобретение относитсяа именно к паталогической фи может быть использовано д; зирования течения и исходаческого шока. Целью изобрет Изобретение относится к медицине, а именно к патологической физиологии, и может быть использовано для прогнозирования течения и исхода травматического шока.Целью изобретения является упрощение способа при сохранении точности и ускорении его.Способ осуществляют сразом.У животных проводят н условиях .наркоза подготовку к опыту и после выхола их из наркотического состояел ния вызывают шок кп нето у Кеннона (нанесение кажем:ююотт.ому с динаковой травмы, приводящей к размножению мягких тканей бедра беэ разрыва кожных покронон и перелома кости). До и сразу после травмы забирают по ется упрощение при сохранении точности и ускорении способа. Постанленьаяцель достигается тем, что в плазмекрови определяют активность аденилатдеэаминазы (Аь 1 Ф-аминогидролаэы,КФ 3.5.4.6) и при увеличении этогопоказателя до 400% по сравнению с исходным уровнем прогнозируют менее тяжелые течения травматического шока .(без летального исхода), а при увеличении от 400% и вьые - тяжелое необратимое течение шока с развитием леттального исхода. Использование данного способа позволит повысить точностьпрогнозирования течения шока до 100%и значительно сократить длительностьосуществления способа по сравнениюс известным. 3 табл. 0,1 мл периферической крови и отделяют плазму центрифугиронанием. Затем : из каждой пробы дважды переносят нф отдельные микропробирки по 0,02 мл плазмы (е 1 - опыт, Р 2 - контроль), в которых олределнют активность алолил 1 ны атдезаминазы. Для этого опытные пробы + инкубируют ЗО мин прч 37 С с субстрат- но-буферным раствором, содержащим субстрат (аденозинмонойосфат), активато" ры аденилатдезаминаэы (аденозинтри. фосфат, ионы магния и калия) и фосфатный буфер (рН 7,4). Количество аммиака, образовавшегося под нл. яп .эде 1 нилатдезаминазы из,део;:;:.;:.л.е",ь.- -. - та, выявляют с помощью цнетнон Ленолнитропруссид-гипохлоритной реакции Бертло, для чего н каждую пробу последовательно добавляют реактив нр 1 (вод 1707543летального исхода. 50 ный раствор нитропруссида натрия и фенола) и реактив Р 2 (водный раствор гипохлорита натрия и БаРО 4 1 Ж 20) и инкубируют 30 мин при 37 С. Опытную пробу колориметрируют против контрольной на спектрофотометре при длине волны 600 нм. Количество аммиака определяют по калибровочному графику, Активность аденилатдезаминазы выража ют в мкмоль образовавшегося аммиака на 1 л плазмы крови за 1 с (мкмодьл 1 с), сИсследование было проведено на 20 самцах белых крыс. Результаты определения активности аденилатдезаминазы 15 прецставлены в табл. 1, а данные ранжировки животных в зависимости от степени увеличения активности аденилатдезаминазы - в табл. " и 3Как видно из табл. 1 - З,.активность аденилатдезаминазы у 6 животных (У 2, 4, 9, 12, 17 и 18) составляет сразу после травмы 283 - 395% по сравнению с исходным уровнем до травмы и . в дальнейшем животные выживают (груп" 25 па 1). Таким образом, увеличение активности аденилатдезаминаэы сразу после травмы в пределах 283 - 395% по сравнению с исходньгл уровнем позволяет прогнозировать у 6 ж.вотных разви тие менее тяжелого течения травматического шока без летального исхода. Действительно, у животных этой группы артериальное давление (АД) во время травмы и сразу после нее.поднималось до 140 мм рт,ст., затем упало до 70 мм рт.ст , незначительно колебалось на этом уровне, затем имело тенденцию к росту и по истечении 1 - 2,5 ч АД стабилизировалось на субнормальном 40 уровне - 100 мм рт.ст. В дальнейшем у животных нормализовались внешние рефлексы и Щ. Все животные через 2 4 ч вышли из шока и при наблюдении до 48 ч продолжали жить, что свидетель ствует о развитии у всех животных этой группы менее тяжелого и обратимого течения травматического шока без Как видно иэ табл. 1 - 3 активность аденилатдеэаминаэы у 14 ю 1- вотных (9 1, 3, 5-8, 1 О, 11, 13-16, 19 и 2 М составляет сразу после травмы 45-аОд по сра 11 н 11 нв с нсходньм уровнем до травмы и в Дальнейшем животные погибают (группа 2). Таким образом, увеличение активности аденилатде 1 аминазы сразу после травмы в пределах 415-61 ч% по сравнению с исходным уровнем позволяет прогнозировать у 14 подопытных животных развитие тяжелого необратимого течения травматического шока (с летальньм исходом).Действительно, у животных этой группы артериальное давление во время травмы и сразу после нее поднималось до 145 мм рт.ст затем упало до 60 мм рт,ст., на этом уровне наблюдались в течении 12-20 мин неустойчивые колебания АД в пределах +15 мм рт.ст затем АД имело тенденцию к увеличению и стабилизировалось на уровне 85-9 Я мм рт.ст., но уже через 1-3 ч снова стало прогрессивно падать и через 0,5-2 ч развилось терминальное состояние. Через 3-5 ч от начала травмы у 11 животных наступил летальный исход, а остальные 4 крысы погибли позже в течение одних суток после травмы, что свидетельствует о развитии у всех животных этой группы более тяжелого и необратимого течения травматического шока с летальным исходом.Таким обра"=.1 л, увеличение сразу после травмы активности аденилатдеэаминазы до 400% по сравнению с исходным уровнем указывает на компенсируемую гипотонию, которая купируется и шок характеризуется менее тяжельпл течением (без летального исхода), а при увеличении от 400% и выше - указывает на некомпенсируемые нарушения гемодинамики, что свидетельствует о развитии тяжелого необратимого течения травматического шока с развитием летального исхода.1 П р и м е р 1. У самца белой крысы массой 2 15 г (опыт В 17) осуществляют подготовку к опыту, моделирование шока и определение в плазме крови активности аденилатдеэаминазы по описанной методике. Как видно из табл.1 и 2, активност. аденилатдеэаминаэы в плазме крови животного до травмы определена в 0,349 мкмоль/л с, а сразу после травмы - 1,377 мкмольл с, т.е. составила 395% по сравнению с исхот,ньс 1 у опием, Такое увеличение активпост 11 аде.ш 1.".ат,",сэ;1.1111,ао,1 во 11 о 111 ло прогнозировать у животного раэвитименее тяжелого и обратимого течениятравматического шока без летальногоисхода.1707543 Действительно, у этого животногоартериальное давление во время травмыи сразу после нее поднималось до140 мм рт.ст затем упало до 70 ммрт.ст., незначительно (ф 5 мм рт,ст.)колебалось на этом уровне, затем имело тенденцию к росту и по истечении3 ч АД стабилизировалось на субнор-,мальном уровне - 100 мм рт.ст. В дальнейшем у животного нормализовались .внешние рефлексы и артериальное дав,ление. гпвотное через 5 ч вышло иэшока и при наблюдении до 48 ч продолжало жить, 15П р и м е р 2. У самца белых крысмассой 180 г (опыт Р 3) осуществляютподготовку к опыту, моделирование шока и определение в плазме крови активности аденилатдеэаминазы так, как ука зано в примере 1. Как видно иэ табл. 1и 2, активностьадецилатдезамнназыв плазме крови животного до травмыопределена в 0,423 мкмоль/л с, а сразу после травмы - 1,756 мкмоль/лс, 25т.е. составила 4152 исходного уровня.Такое увеличение активности аденилатдезаминаэы по сравнению с исходнымуровнем позволило прогнозировать уживотного развитие тяжелого необратимого течени травматического шока слетальным исходом.Действительно, у этого животногоартериальное давление во время травмыи сразу после травмы поднималось до140 мм рт.ст., затем снижалось до60 мм рт.ст., на этом уровне наблюдались в течение 15 мцц неустойчивыеколебания АД в пределах -11 мм рт.ст.,затем Л 1 имело тенденцию к увеличению и стабилизировалось на уровне80 мм рт.ст. в течение 7 ч, после чего Т а б л и ц а 1 Опыт аденилатдезаминазы в плазДо травмы Сразу после травмы 443 307 415 386 610 574 435 442 2,633 1,491 1,756 1,278 1,756 2,633 2,369 2,633 0,595 0,485 0,423 0,331 0,238 0,459 0,544 0,595 1 2 3 4 5 6 7 3 Показатели активностиме крови, мкмоль/л с стало прогрессивно снижаться до 35 мм рт.ст. и развилось терминальное состояние. Через 9 ч от начала травмы наступил летальный исход.Таким образом, предлагаемый способ позволяет уже в раннем посттравмати ческом периоде определять течение травматического шока и его исход, Целесообразность.применения предлагаемогр способа в сравнении с известным обусловлена упрощением способа (так как для его выполнения требуется определение лишь одного показателя - аденилатдезаминаэы в объеме 20 мкл плазмы крови в течение 60 мин), возможностью раннего прогнозирования тяжести течения и обратимости травматического шока, поиска и проверки средств адекватной патогенетической терапии, что значительно может помочь в лечешщ травматического шока, особенно его тяжелых формИспользование данного способа позволит повысить точность прогнозирования течения кока до 1003 и значительно сократить длительность осуществления способа по сравнению с иэ-, вестнь формула иэо бретения Способ определения течения травматического шока путем биохимического исследования крови, о т л и ч а ющ и й с я тем, чоо, с целью упроцения при сохранении точности и ускорении способа, определяют активность аденилатдезаминазы .и при увеличении ее на, 4002 и выше определяют угрожающее жизни течение шока.1707543 Продолжение табл. Показатели активности аденилатдезаминазы в плазме крови, мкмоль/л с До травмы Сразу по- К, 3сле травмы ИсхОд зизни К - степень повышения активности аденилатдезаминазы сразу после травмы по отношению к исходному до травмы. Т а. б лиц.а 2 Опыт Повышевг. активности аденилатдезаминазы,мкмоль/л с о травмы Сразу после К, 7 травмыРезультаты приво;,ятся в порядке увеличения процента активности аденилатдезаминазы по сравнению с исходным уровнем до травмы (К). 9 10 11 12, 13 14 15 16 17 18 19 20 0,472 0,447 0,389 0,423 0,513 0,389 0,400 0,389 0,349 0,331 0,4590,447,0,472 0,423 0,485 0,331 0,331 0,349 0,423 0,513 0,544 0,447 0,595 0,595 0,459 0,389 0,447 0,389 0 400 0,389 0,459 О288 1,337 2,215 1,950 1,278 2,215 1,892 2, 105 2,105 1,377 1,227 2,215 1,950 1,3371,278 1,491 1,227 1,278 1,377 1,756 2,215 2,369 1,950 2,633 2,633 2,215 1,892 2,215 1,950 2,105 2,105 2,633 1,756 1 283 496 501 302 432 486 526 541 395 371 483 436 283 . + 302 + 307 + 371 + 386 + 395 + 415 432 435 436 442 443 483 486 496 501 526 541 574 6101 О 1707543 Та блица 3 К, 7 Группа Количествоживотных Сразу после травмы До травмы Достоверные различия между группами Р 1 и Р 2 по критерию Стьюдента С.Достоверные различия с контролем (до травмы) по критерию Стьюдента Составитель А.Лдчкова Техоеп 11,Иоргентал Корректор Л ОбРУчар Редактор П Ча.".лренко Заказ 26 Тираж Подписное ВНИИПИ Государственного комитета по изобретениям и открытиям при ГКНТ СССР 113035, Москва, Ж, Раушская наб., д. 4/5 Произволственно-издательский комбинат "Патент", г.ужгород, ул. Гагарина, 101 1 2 6 14