Способ определения скрытой крови в биологическом материале

,рфрьСООЗ СОНЕТСНИХ1: - " .СОЦИАЛИСТИЧЕСНРЕСПУБЛИК 3/72 ОПИСАНИЕ ИЗОБРЕТЕНИ ФН АВТОРСКОМУ С ТЕЛЬСТВ бре цие относится к медицине, клиническим диагностичеса именно им исследыстрого и крови в эк крытых кипе может бьении скрытиологическ го лица пр 1кровотечекч ГОСУДАРСТ 8 ЕННЬЙ НОМИТЕТПО ИЗОБРЕТЕНИЯМ И ОТНРЫТИЯМПРИ ГКНТ СССР(56) Лвторское свидетельство СССРР 885881, кл. С О 1 11 33(48, 1981.(54) СПОСОБ ОБНЛРУ 1 КЕНГ СКРЪТО 11 КРОВИВ БИОЛОГИЧЕСКОМ МЛТЕРИАПЕ(57) Изобретение относится к медицине,а именно к клиническ 11 м диагностичес-,ким исследованиям, и предназначенодля быстрого и безопасного определениякрови в экскрементах и другом биологическом материале при диагностике внутренних кровотечени 1". Цель изобретения - повышение точности способа определения, упрощение, изоляция инфицированного материала от окружающейсреды. Цель достигается путем помещения пробы в лунки, образованные пластиной с толщиной 1,5-2 мм, содержащей ваниям, и предназначено длбезопасного определениятрементах при диагностикеечнь 1 х кровт". 1 еций, а такть использовано цри выявой крови в моче и другомом материале у обследуемоподозрении на внутреннее 2 отверстия диаметром 10-15 мм, и приклеенкой к пластине индикаторной бумагой, которая пропитана реактивом, содержащим раствор амидопирина 15-20 , раствор анилица гидрохлорида 0,5-2% и этанол 95 , с последующим закрыванием лунок другой пластиной; Полученный комплект помещают в пакет из прозрачного полимерного материала и герметизируют. Проявление реактива осуществляют раствором перекиси водорода, вводимогопутемпрокола пакета. Реак" тив стабилизируют путем добавления к нему предварительно раствора гидроксиламина 0,1-0,2 . При наличии в про - бе. 0,1-0,2 и более крови появляется д яркое фиолетово-сиреневое окрашивацие, Способ обеспечивает высокую точность определения, надежную изоляцию инфицированного материала от окружающей С среды и медицинского персонала, использование безопасных в работе легкодоступных и недорогих реактивов, простоту применения, 1 з.п. Ь-лы. Определение скрытой крови производится с помощью химической реакции на пероксидазу, поскольку гемоглобин обладает высокой пероксидазной активностью. В реакции участвует хромогец неокрашенное вещество, которое и лп цессе окисления образует краситель являющийся индикатором реакции.,ругой обязательный компонент - окислитель. Катализатором является гомоглобин крови.цель изобретения - повышение точности (правильности результатов), упрощение способа.На основе высокоэффективного беэо 5 пасного и рекомендованного к использованию Минздравом СССР реактива азопиром создается индикаторная бумага, Для изготовления индикаторной бумаги реактив азопирам следует модифицировать по сравнению с его наиболее распространенным вариантом для обеспечения максимальной сохранности бумаги при ее высокой чувствительности.Состан азопирама для индикаторной бумаги (мас.Ж):Лмидотерин 15-20,Анилин гидрохлорид 0,5-2,0Этанол 95 ОстальноеВ этот реактив дополнительно вводится стабилизатор следующего состава, мас.Х: уидроксиламин гидрохлорид 1,0- 2,0; дистиллированная вода остальное.Стабилизатор вводится в предварительно приготовленный азопирам в коли-г 5 честве О, 1 от объема азопирама. Стабилизированным азопирамом пропитывается бумага. Срок использования индикаторной бумаги с азопирамом 12 мес, если в реактив введен стабилизатор, а без него - 1 - 2 мес.Основу устройства для выявления скрытой крови составляют перфориронанные пластинки белого или кремового цвета. Для их изготовления можно ис 35 пользовать плотный картон, пластмассу, дерево (медицинские шпателн) и т.п, материалы. Оптимальные размеры пластинки: длина 75-140 мм, ширина 18- 23 мм, толщина ,5-2,0 мм. Каждая пластинка имеет 1 - 4 отверстия диа. метром 1 О - 15 мм. Отверстия смещены к одному концу пластинки, а другой, неперфорированный ее конец удобно брать рукой при использовании.Эти отверстия заклеены индикаторной бумагой с одной стороны пластинки. Таким образом, на каждой пластинке образуются лунки (углубления), края которых образованы краями отверстий в пластинках, а дно - индикаторной бумагой.Две такие пластинки склеиваются с помощью бумаги попарно длг 1 ннымгг сторонам и обраэуыт индг 1 ка горное уст -55 ройство, складывающееся, как обложка книги. На одной стороне (поверхности) этого устройства находятся лунки. На другой поверхности - индикато,.ная бумага, закрывающая отверстия в пластинках.К этому складнону устройству придается третья пластинка из того же материала, но беэ отверстий и без бумаги. Эта неперфорированная пластинка служит шпателем для нанесения исследуемого материала.Комплект, состоящий иэ сложенного индикаторного устройства и шпателя укладывают в отделение (карман) пакета из тонкого прозрачного и бесцветного полиэтилена.При взятии пробы на анализ отворачивают край липкой ленты, герметиэирующей один карман, и извлекают индикаторное устройство; вносят исследуемый материал в. углубления устройства (лунки) так, чтобы он касался индикаторной бумаги, образующей дно лунок. После нанесения материала во все лунки устройство складывают лункамгг внутрь, помещают в тот же карман пакета, из которого устройство было извлечено,и вновь заклеивают карман (экскременты) оказываются между пластинками, а снаружи - чистая поверхность пласти гок и индикаторной буггаги. Такигг образом, при закладьгнании устройства обратно в карман пакет не пачкается.Пакет используют, в эанисггмости от количества карманов в нем, 1 - 4 дня. Каждый день вводят материал в лукки одного индикаторного устройства.Для постановки реакции на скрытую кровь достаточно, не вскрывая пакет, проколоть полиэтиленовую пленку и ввести в карман несколько капель ЗЕ-ной перекиси водорода, которая и является проявляющим раствором, Если н материале, находящемся в лунках, была примесь крови, индикаторная бума га окрашивается в фиолетово-сирененый цвет. Если крови не было, цветной реакции не будет.П р и м е р 1. Обследуемьпг на кишечное кровотечение получает конверт с пакетом. В пакете 3 отделения (кармана) с индикаторными устройствами. В каждом индикаторном устройстве 4 лунки.Перед эаборггм пробы экскрементов обследуемьггг открывает одно ггэ отделений полиэтиленового пакета (гсарман), снимая липкую ленту. Достает комплект индикаторного устройства, непеоборнрованкой пластин17075 Составитель Н.ТереминаТехрсд м георгета Корректор Л.Пбручдр Редактор Н,Лазаренкоф Заказ Тира -" ПодвисноеВНИИПИ Государственного комитета по изобретениям и открьггиям при ГКНТ СССР113035, Москва, Ж, Раушская наб., д. ч/5 Производственно-издательский комбинат "Патент"г,ужгород, ул. Гагарина, 101 кой (шпателем) :дцосит А порции экскрементов (из разных мест об 1 е массы кала) в лунки на поверхность индикаторной бумаги. Затем обследуемый скла дьвает пластинки устройства так, что экскременты в луцках оказываются внутри сложных и прижатых друг к другу пластинок. Ипатель, которым был взят материал, выбрасывают, а сложенные пластинки с порциями экскрементов Внутрен (между нщ) обследуемьп уклафьвает обратно в карман полиэтиленового пакета и вновь заклеивает той жес липкой лентой. 15На следуощий день далогичньм способом используется содержпое второго кармана, на третий день - третьего кармана.После окончания использования гер метизцровднцой липкой лентой пакет укладьвают в конверт, ца котором написаны необходимые сведения об обследуемом. Конверт с пакетом сдается (отсылается) в лабораторию, 25В лаборатории полиэтиленовьй пакет вынимают из конверта. Лаборант, не вскрывая пакет, про,длывает полиэтиленовую пленку коцо стеклянной пипетки, через которую и вводит в каждый 1 карман на индикдторцую бумагу несколько капель 3 .-цой перекиси водорода. Если исследуемый материал содержал 0,1% и более крови, немедленно или в течение блждйше минуты появляется фиолетово-сиреневое окрапвае, хорошо заметиое нд светлом Ьое пластинок через прозрачную пленку полэтлеа, Около порций экскрементов, не содержавших кровь, окрашивдцие це проявляется. эП р и и е р 2, Обследуемьп ца нали - чие микрогематурии получает конверт с пакетом. В пакете 3 кармана, в каждом кармане индикаторное устройство. Обращение с пакетом аналогично при меру 1, только в каждую лунку вводится не порция экскрементов, а капля мочи.,Далее конверт с использованным 4 Ьпакетом доставляют (отсылдют) в лабораторию, где итдикдция крови проводится аналогично примеру 1. В случае необходимости обследуемьп 1 может сам произвести дцдлиз, нанеся на смоченную мочой индикаторную бумагу по 1-2 капли З -ной перекиси водорода.,Результаты анализа записывают ня конверте, который сдают в лаборато-, ;рщо или врачу.Использование предлагаемого решения обеспечивает по сравненсо с известными способами вьсокуо точность (правильность результатов) за счет информативности, надежную изоляцию инфицированного материала от окружающей среды и медицинского персонала, использование безопасцлх в рдботе,легкодоступых и недорогих отечественх реактивов и материалов, а также простоту изгутовлея и применения. формула изобретения1. Способ определения скрытой крови в биологическом материале путем взаимодействия пробы с реактивом, содержащем раствор амидопирина 15-20%, раство, анилица гидрохлорида 0,5-2 и этанол 95 с последующм проявлением продук 1 д реакции раствором перекиси водорода, о т л и ч а ю ц и й с я тем, что, с целью изоляции инфицированного материала, повышецня точности и упрощения способа, реактивом пропитывают индикаторную бумагу, которая приклеена к пластине толщной 1,5- 2,0 мм с отверстиями диаметром 10- 15 мм, в образовавшиеся лунки вносят пробы и закрывают неперфорированной пластиной, комплект помещают в пакет из прозрачного полимерного материала и герметизруот, а проявление осуществляют путем прокола пакета.2. Способ по п. 1, о т л и ч а ющ и й с я тем, что, с целью стабили" зации реактива, он дополцительно содержит 0,1-0,2 гидроксиламина.