Способ количественного определения метионина

(51) М, Кл, б 01 й.21/24 еоударстввнный квинтет по делан нзооретеннй н отнрытнй(088.8) Дата опубликования описания 30.04.80(72) Автор изобретения В. В, Петренко Запорожский медицинский институт(54) СПОСОБ КОЛИЧЕСТВЕННОГО ОПРЕДЕЛЕНИЯ МЕТИОНИНА Изобретение относится к аналитической хи мни, а именно, к способам количественного определения метионнна.Известен способ количественного определения метионина путем обработки анализируемой пробы нингидрином в иэобутиловом спирте при нагревании с последующим спектрофотометрнрованием полученного раствора 1,Недостатком способа является низкая избирательность определения. Определению меО шают другие аминокислоты.Наиболее близким к изобретению по технической сущности н достигаемому результату является способ количественного определения метионнна, заключающийся в последОвательной5 обработке анализируемой пробы двузамешенным фосфатом калия, однозамешенным фосфатом калия, иодидом калия и избытком 0,1 н раствора иода, с последующим титрованием полученного расгвора 0,1 н раствором тиосульфата натрия в присутствии крахмала 2).Недостатком способа является низкая чувствительность определения. Навеска препарата 0,3 г длительность проведения анализа 40 мин,Цель изобретения, - повышение чувствительности и сокращение времени определения.Поставленная цель достигается способомколичественного определения метионина,заключающимся в обработке анализируемой аллоксангидратом при нагревании на кипящей водяной бане в среде днметилформамида с последующим спектрофотометрнрованнем получен.ного окрашенного раствора.П р и м .е р 1. Определение удельного показателя поглощения продукта реакции метионии-аллоксангндрат.Точную навеску препарата (0,0200 г) раст. воряют в 4 - 5 мл воды количественно диметилформамидом, переносят в мерную колбу на 100 мл н доводят до метки этим же растворителем, Из разведения берут 0,5 мл 1,0 мл4,0 и 4,5 мл раствора, помешают в пробирки, добавляют 2 мл 1 о-ного раствора аллоксангид. рата в диметилформамиде. Реакционную смесь нагревают на кипящей водяной бане 0,5 - 1 мин, охлаждают, переносят в мерную колбу на 25 мл, доводят диметилформамидом до метки и спект. рофотометрируют при Хакс =. 524 нм, Подчи.,312 8,51 4,0 1,45 453,12 3,6 459 441,6 50 25оЬ Р 2.2см П р ние ме (0,0154 нии на воды и колбе лотность при Лмас ойтическа = 524 нм где О Е Ло/ 5 1 смния раствормидомпри бавлягидра таРасчепроводят определения ны в табл. 2.количественно препарате приве зультат мети онина аблица 2 ки 135 х=100 0,015 100,13 0 1,155,0154 50135 ияемость продукта реакции основному законусветопоглощения наблюдается в пределах концентраций метионина 0,4 - 3,2 мг/100 мл. и м е р 2. Количественное определетионива в препарате, Точную навеску г) препарата растворяют при нагрева- кипящей водяной бане в смеси 4 - 5 мл 2 - 3 мл диметилформамнда в мерной на 50 мл. После растворения метионина охлаждают и доводят диметилформа. до метки. Из разведения берут 2 мл, ют 2 мл 1%-ного раствора аллоксани затем поступают как в примере 1. т процентного содержания метионинапо формуле4 Данные удельного поглощения продукта реакции метионян-аллоксангидрата приведены в табл, 1.удельныи показатель погпри Л м 2 С, = 524 нм;толщина слоя, см;навеска препарата, г,73362Продолжение табл, 2 0,0154 0,0154 0,0154 1,142 100,76 8=0,9161 1,127 99,43 8 - -0,0091 1,154 101,81 8,=+2,24 0,0154 0,0154 1,149 1,125 101,37 99,26 х+Ят 100 56+2 24х=100,55 45 1,133 99,96 8=0,9264 1,140 8=0,0092 1,137 45 Я =+2,27 1,153 х+8 =100,55+2,27 0,0154 1,150 П р и м е р 3. Количественное определь Расчет граммового содержания метнонинание метионина в таблетках 0,25 г покрытых 5 в пересчете на средний вес таблетки проводятоболочкой. по формулеТочную навеску тщательно измельченнойтаблеточной массы (0,0121 г) помещают в мер- ВЮО ЛОХМную колбу на 50 мл и растворяют в смеси о,4 - 5 мл воды и 3 - 5 мл диметилформамидаЗО Е Р а Моопри нагревании на кипящей водяной бане.После растворения и охлаждения, раствор доводят диметилформамидом до метки. Иэ разведения берут 2 мл и поступают как в примере 1,Таблица 3 где 0,386 - средний вес таблетки, г.Результатьг количественного определенияметионина в таблетках по 0,25 г приведеныв табл. 3. ремяН агреания, с 0.2553=0,2512+0,0120 0,2484 0,5 0,25 0,5 0121 еского реагента и обработку прово ида при наревев последуюшым сп ученного окрашен яет увеличить 2 раза и соачестве химн озвия7 - 8 оксангидратдиметилформ дяной бане с рованием пол Исформула и зо тен очники ин орма цин) кспертиз принятые в 1. Коренман из. Методы ор 970, с. 167. 2. Государст 968, с. 420 (иколичественного определения метиоработки анализируемой пробы агентом, о т л и ч а ю щ и Й- , с целью повышения чувствитель ческии ан М., Хими енна я фа рмако 1оготип мели определения,Составитель Л.Соло Техред Н,Бабурка ева Кор рек то р Г.к нор иова едактор А. Долини Заказ 497/2 Подписноетета, СССРытий Тираж ЦНИИПИ Государстве по делам изобрете 113035, Москва, Жнного к ний и о Раущс наб. д, 45 П "Патент", г. Ужгород, ул,Фили) ктная. 4 Предлагаемый способ чувствительность определ кратить время анализа л нина путем об химическим ре с я тем, что ности и сокра пользуют ал.дят в средеи на кипящей к трофотометного раствора