Способ прогнозирования течения пиелонефрита

СОЮЗ СОВЕТСКИХСОЦИАЛИСТИЧЕСКИРЕСПУБЛИК 001 19) ГОСУДАРСТВЕННОЕ ПАТЕНТНОВЕДОМСТВО СССР(ГОСПАТЕНТ СССР) ПИСАНИЕ ИЗОБРЕТЕНИ ВТОРСКОМ ИДЕТЕЛЪСТВ б оценки нырапроцесса в поч(21) 4905587/14(54) СПОСОБ ПРОГНОЗИРОВАНИЯ ТЕЧЕНИЯ ПИЕЛОНЕФРИТА(57) Изобретение относится к медицине, в частности к клинической урологии и нефрологии, Цель изобретения - повышение точности прогнозирования течения острого и хронического пиелонефрита, Поставленная цель достигае.ся путем определения степени снижения истинной Са-АТФазной активности микросомной фракции коркового вещества почек интактных крыс под дейст. вием плазмы крови больных острым и хроническим пиелонефритом. При снижении истинной Са-АГФазной активности микросом в присутствии плазмы крови больного с острым пиелонефритом более чем на 40% Изобретение относится к области медицины, в частности к клинической урологии и нефрологии,Среди наиболее распространенных методов определения активности воспалительного заболевания почек используются данные клинических анализов крови и мочи с подсчетом количества лейкоцитов в осадке мочи. К недостаткам способа относится приблизительность подсчета содержания лейкоцитов в моче, отсутствие зависимости от 111)с О 01 К 33/68//6 01 М 33/4 предполагается осложненное течение, по- требующее пооведения дополнительных вмешательств с возможным применением экстракорпоральных методов детоксикации, Снижение Са-АТФазной активности микросом почек крыс под действием плазмы крови больных с хроническим пиелонефритом более чем на 20;ь указывает на активность процесса, осложненность течения и необходимость длительной терапии. Практическое применение заявленного способа в клинической практике облегчит или документально подтвердит степень тяжести течения пиелонефрита, поможет выбрать наиболее эффективный способ лечения, что позволит избежать развития осложнений. улучшить результаты лечения больных с острым и хроническим пиелонефритом. Применяемый способ принесет определенный экономический эффект за счет сокращения времени для подбора наиболее эффективного способа лечения больных. Возможно. что снижение Са-АТФазной активности микросом почек крыс может наблюдаться и при некоторых других воспалительных заболеваниях. характера и тяжести воспалительного процесса в почках при хроническом пиелонефрите связанной с наличием инфекции в нижних мочевых путях, В связи с вышесказанным, изменения количества лейкоцитов в моче часто не коррелируют с тяжестью течения пиелонефрита и, кроме того, невозможно прогнозировать возможность развития осложнений,Известен также спосоженности воспалительногол; -.ет;ОМ, ХРОНИЧЕСКОМ ПИЕЛОНЕфрИе по определению степени бактериурии,л 1 тл этот меОд позволяет характеризовать:1;-Ичес. тели же недостатками, что иОл-.;уций,1-а более блэким аналогом к заявляе;о;.у ; зсобу иротоИпом) является способо,родоления тяжести течения воспаления вл к-:.х . выраженности интоксикации поопро 1 елеио у 1 Овня средних молекул вкроси больных, 1-едостатком этого меодаяЛяег.я тот факт, что ама коноепция такси ее ко о действия "средних молекул" является весьма дискутабельной, Недостатком:,: г .".,-,г:,а при его применении в клинилс",ой :,.:Тие для характеристики выра:,е:".:,и ос. роты заболевания и тяжести.;Осл ,:, .; больного явгЯется его недостас-виельность и специфичность к.; - ;л: с эобретения является повышелОсти прогнозирования тяжести, я о трого и хронического пиелонеф:- СО 1 осуДествляется следующимоб- е ": ; л е е ч ем з а 4 8 часов до момента; ая фрация иэ коркового вещестек здоровых крыс. Ыикросомы сусл.:.с,и в 1-1,5 мл среды выделения и;," г вали до момента использования,- дальних взятая натощак в про,;:1 ; , -, Мл 1,34% оксалата К центрифуир.,алась и плазма брала-;ь длясс;: дован и,,.1,ЛЯ лределения влиЯниЯ плазмы крови бел, ь,;а истинную Са-АТФазную акт; в; осгь ми:росом почек крыс бралисьгак,:чи Ооьемом 3 мл с 1 мл соответст3",:,лцей среды инкубации и с Добавлениемс,г -.ензи, микоосом, добавляемых непосз-.:,ст;е.:. перед опредеинкубацией. Сазэ 1.,О активг ОСТЬ Микросомнои,. о. реде.яли го образованию неорГ,ес.:з.:гз фосфага и рассчитываги какмежду АТФаэной активностьюх:роса:,. в присутствии и в отсутствии в:рж Саг, В 1 ом и 2-ом стаканчиках средаи.уба,ии имела следу 10 щиЙ состде, 100МЬ 1.С 1, 4 .Ы МОС 1 г, 40 мкЫ СаСг, 5 ММ 0,5ММ,абан, 10 мЫ имидаэол (рН - 7,2 при37 С, -:, в 3-ем и 4-ом стаканчиках среда несодерх зла ионов .а и в среде инкубацииг+вместо СЯС 1 г был добавлен 0,5 ММ ЗГТА,Перед инкубацией во все пробы добавлялиал ;е-и,;: н 20 мкгмл). обеспечивающийоп р;:,; ел е гие ист ин ной Са-АТфазной актив,е:т , Икросам,б) Содержание белка оп 5 10 15 20 25 30 35 40 в 50 55 ределяли по биуретовой реакции. Работа Са-АТфазной системы микросом запускалась добавлением 3 м.моль АТФ.Определение действия плазмы крови больных на Са-АТфаэную активность микросом почек крыс.В 1-ом и 3-ем стаканчиках определяли активность Са-АТФазы в присутствии плазмы крови больных, для чего в каждый из них добавляли 0,05 мл исследуемой плазмы, микросом и инкубировали 3 минуты при 37 С, после чего реакцию запускали добавлением 3 м.моль АТФ. Во 2-ом и 4-ом стаканчиках определяли истинную Са-АТфазную активность микросом с добавкой, соответственно обьему добавленной ранее в пробах 1,3 плазмы, средь; инкубации, Пробы инкубировали 3 минуты и реакцию запускали 3 м.моль АТФ Инкубацию проводили 1 минуту, останавливали реакцию трихлоруксусной кислотой. В дальнейшем определяли во всех пробах количество образовавшегося в результате гидролиза АТФ АТфазами неорганического фосфора с помощью наборов фирмы "Лахема" ЧССР.Принимая истинную Са-АТфаэную активность микросом за 100, определяли % снижения истинной Са-АТФазной активности микросом при добавках плазмы больных, В качестве контроля обязательно в каждой серии исследований, наряду с плазмой крови больных с пиелонефритом, испытывали плазму крови здоровых людей Рассчитывали о снижения Са-АТФазной активности микросом почек крыс при действии плазмы крови больных с пиелонефритом, по отношению к значениям активностл определенной в присутствии плазмы здоровых людей.При добавлении в среду инкубации плазмы крови здоровых людей отмечалось некоторое снижение Са-АТФазной активности микросом почек крыс, однако это снижение не превыИало 12) от исходной истинной Са-АТфазной активности микросом, тогда как плазма крови больных с гИе. лонефритом ингибировала эту активность в значительно большей степени. Особенно выраженным ингибирование отмечено при остром пиелонефрите, причем степень ингибирования коррелировала с тяжесгью состОЯниЯ бОльнОГО,П р и м е р 1, Больной 1-ко поступил с диагнозом пузырно-мочеточниковый рефлюкс, хронический пиелонефрит, Послеоперации уретероцистоанастомоз разви-" лась атака острого пиелонефрита, Состояние больного средней тяжести, температура тела 37 ВОС, В общем анализе крови лейкоцитоз, ускорение СОЗ (лейкоциты 15600, СОЭмм/час), в клиническом анализе мочи лейкоцитурия (лейкоциты покрывают все поле зрения), Проведенное исследование ингибирующего влияния плазмы крови больного на Са-АТфазную активность микросомной системы почек крыс показало снижение Са-АТфазной активности микросом по сравнению с истинной активностью, которая составляла 38,9 , В контрольном исследовании с плазмой крови здорового донора ингибирование составляло 5,9%. Концентрация средних молекул в сыворотке крови, измеренная при -254 нм - 0,405 усл,еда при -280 нм - 0,417 усл,едв то время как в контрольной сыворотке эти величины составляли 0,249 усл,ед 0,254 усл,ед, соответственно, Больному была проведена антибактериальная терапия и атака острого лиелонефрита была купирована,Данным примером проиллюстрировано ингибирование Са-АТфазной активности микросомной фракции плазмой крови больного, которое меньше критического уровня (40 о ) и которое сопровождается неосложненным течением острого пиелонефрита.П р и м е р 2, Больная 8-ва поступила в клинику с диагнозом двухсторонняя ахалазия мочеточников, После операции (уретероцистоанастомоз с обеих сторон) развилась атака острого пиелонефрита. Состояние больной в момент исследования тяжелое, температура тела 38 С. В общем анализе крови лейкоцитоз. ускорение СОЭ (лейкоциты 16500, СОЭ). в клиническом анализе мочи лейкоцитурия (лейкоциты покрывают все поле зрения). Проведено исследование ингибирующего действия плазмы крови больной на Са-АТФазную активность микросом почек крысы, которое составило по сравнению с истинной Са-АТФазной активностью фракции 72,7 , а при контрольном исследовании с плазмой здорового донора - 6. По сравнению с уровнем Са-АТфазной активностью в присутствии плазмы здорового донора, Са-АТфазная активность микросом под действием плазмы больной снизилась на 71%, Уровень средних молекул сыворотки составлял 0,44% усл, ед, при 1.-254 нм,м и 0.461 усл,ед, при Лнм,Несмотря на назначенную антибактериальную терапию, подобранную с учетом высеянной из мочи микрофлоры, состояние больной ухудшалось, нарастала гнойная интоксикация, в связи с чем был проведен сеанс гемосорбции, после которого состояние больной улучшилось, явления интоксикации значительно уменьшились, При 5 10 15 20 25 30 35 40 45 50 55 повторном исследовании ингибирующей активности плазмы крови больной на Са-АТФазную активность микросом почки крысы, снижение активности по сравнению с истинной Са-АТфазной активностью составило 37,1%, а по сравнению с активностью в присутствии контрольной плазмы на 30,4 , На фоне продолжающейся антибактериальной терапии атака пиелонефрита была купи- рована в течение последующих нескольких дней,Из данного примера видно, что резкое снижение Са-АТфазной активности микросом под действием плазмы крови больного сопряжено с осложненным течением острого пиелонефрита, что проявляется в тяжелой интоксикации и неэффективности антибактериальной терапии.Для клинической практики важно. что на основании предлагаемого способа можно предполагать осложненное течение пиелонефрита с проведением экстракорпоральных методов детоксикации в более ранние сроки,Сопоставляя диагностическую ценность заявляемого способа и метода-прототипа (по возрастанию уровня средних молекул) можно отметить, что в 1-ом и 2-ом случаях увеличение концентрации средних молекул в сыворотке крови было приблизительно однозначным, Общепринятые тесты (температура тела, клинические анализы крови и мочи) также не документировали тяжесть состояния больных. В то же время, предлагаемый способ выявил существенную разницу в ингибирующей активности плазмы, более выраженной у больной В- вой. Таким образом, заявляемый способ наиболее точно отражает тяжесть состояния и необходимость проведения более интенсивных методов лечения у больных с атакой острого пиелонефрита.П р и м е р 3. Больная Г-ль поступила с диагнозом хронический пиелонефрит, структура нижней трети правого мочеточника. Состояние больной удовлетворительное, температура тела нормальная, в общем анализе крови - без патологии. В общем анализе мочи - лейкоцитурия (лейкоциты покрывают все поле зрения). Клиренс крезтинина - 122 млмин.Проведено исследование ингибирующего действия плазмы крови больной на Са-АТФазную активность микросомной фракции почек крысы. Ингибирование составило 12,2 о , а при исследовании с контрольной плазмой - 9,4 о . Концентрация средних молекул сыворотки была при Я -254 нм 0,154 усл.ед., а при Янм - 0,192 усл.ед,1780013 Формула изобретения Составитель Л,КонюховаТехред М.Моргентал Корректор Т,Палий Редактор С,Кулакова Заказ 4433 Тираж ПодписноеВНИИПИ Государственного комитета по изобретениям и открытиям при ГКНТ СССР113035, Москва, Ж, Раушская наб 4/5 Производственно-издательский комбинат "Патент", г. Ужгород, ул. Гагарина 101 что в пределах нормы, Больной начато комплексное лечение уросептиками и в течение 15 дней признаки активности хронического пиелонефрита были ликвидированы.П р и м е р 4, Больной Л-ри поступила с диагнозом хронический пиелонефрит, 2-х сторонний пузырно-мочеточниковый рефлюкс, нейрогенный мочевой пузырь, Состояние больной в момент исследования удовлетворительное, температура тела нормальная, общий анализ крови - без патологии. В общем анализе мочи-лейкоцитурия, эритроцитурия (лейкоциты покрывают все поле зрения). Клиренс креатинина - 95 мл/мин. При обследовании обнаружено: отсутствие функции правой почки, уретерогидронефроз слева, нарушение проходимости пузырно-мочеточникового соустья слева, Проведено исследование ингибирующего действия плазмы крови больной на Са-АТФазную активность микросом почек крыс. Ингибирование ферментной активности по соавнению с истинной Са-АТФазной активностью микросом составило 26.4 о , а по сравнению со значением АТФазной активности микросом в присутствии контрольной плазмы - 17 о . Концентрация средних молекул сыворотки при -254 нм -. 0,262 усл.ед., а при -280 нм - 0,290 усл,едчто в пределах нормы. После проведенного лечения больная выписана с нефростомическим дренажом, лейкоцитурией для продолжения антибактериального лечения по назначенной схеме и повторной госпитализацией после завершения лечения.Из данноо примера видно, что при более значительном ингибировании плазмой крови Са-АТФазной активности микросомпочек крыс у больных хроническим пиелонефритом отмечается более низкая эффективность противовоспалительной терапии и5 требуется более тщательный подбор адекватных методов лечения,Представленные примеры показывают,что предлагаемый способ позволяет прогнозировать выраженность и характер течения10 не только при остром, но и при хроническомпиелонефрите,Практическое применение заявляемогоспособа в клинической практике облегчитили документально подтвердит степень тя 15 жести течения пиелонефрита, поможет выбрать наиболее эффективный способлечения, что позволит избежать развитияосложнений и улучшить результаты лечениябольных с острым и хроническим пиелонеф 20 ритом,Способ прогнозирования течения пие 25 лонефрита, включающий исследованиеплазмыкрови,отличающийся тем,что,с целью повышения точности способа, плазму крови добавляют в среду инкубации, содержащую стандартную микросомную30 систему коркового вещества почек крысы,определяют Са-АТФазную активность микросом до и после инкубации с плазмой крови больного и при снижении относительноисходного уровня у больных с острым пие 35 лонефритом на 40 и более, а у больных схроническим пиелонефритом на 24 и более прогнозируют осложненное течение болезни,