Способ получения кислотного гидролизата белоксодержащего материала

(5)5 А 23 Л 1/О АНИЕ ИЗОБРЕТЕОУУ СВИДЕТЕЛЬСТВУ ОП АВТОР. (46) 07.08.92, (71) Всесоюз проектно-ко кладной биох (72) В, С Мура В, А, Румянц Бюл. М 29ный научно-исследовнструкторский инстимиитов, И, П. Уваров, А, Аев и Н, В, Чекотина тельскии тут при, Мялкин,(56) Матвеев Е. Е. и гидролиза дрожже цевтический журна 1499-1503,Угосп ,СИсп 1972, ч, 47, р. 348 - 3 др. Изучениеи БВК. Хими , 1984, т, 18 кинетики о-фарма- М 12, с,еез Р. чЧ55. Апп, Восйев ГОСУДАРСТВЕННЫЙ КОМИТЕТПО ИЗОБРЕТЕНИЯМ И ОТКРЫТИЯМПРИ ГКНТ СССР Изобретение относится к биотехнологии и касается способа кислотного гидролиэа белоксодержащего материала для приготовления питательных сред, используемых для выращивания микроорганизмовВ последнее время все большее распространение приобретает применение гидролизатов белоксодержащего материала как основного компонента питательных сред; Преимущество сред, приготовленных на основе гидролиэатов белоксодержащего материала, состоит в их лучших физико-химических свойствах, что облегчает проведение дальнейших этапов получения продуктов микробной деятельности, .Кислотные гидролиэаты белоксодержащего сырья имеют определенные преимущества перед ферментативными гидролизатами. В частности, процесс приготовления кислотных гидролизатов менее ив.Юлп 1752313 А 1(54) СПОСОБ ПОЛУЧЕНИЯ КИСЛОТНОГО ГИДРОЛИЗАТА БЕЛОКСОДЕРЖАЩЕГО МАТЕРИАЛА(57) Изобретение относится к области биотехнологии и касается способа кислотного , гидролиэа белоксодержащего материала, Цель изобретения - повышение выхода целевого продукта; Белоксодержащий материал (кормовые дрожжи, дрожжевой изолят, рыбокостную муку) обрабатывают раствором кислоты в присутствии антиоксиданта - 3,5-ди-трет-бутил-гидроксидиметиламинометилфенола и сульфата аммония. Количестао антиоксиданта 0,01 - 0,02, сульфата аммония 0,5-0,90 ь, 5 табл продолжителен, готовый продукт характе аеас ризуется большей стандартностью. В то же время, кислотный гидролиз белкового материала сопровождается разрушением ряда (Л аминокислот, что снижает питательную ценность гидролиэатов, предназначенных для (д 3 конструирования питательных сред. В этой связи изысканиепутем замены белоксодер- г ло жащего материала - одно иэ направлений пОвышения качества питательных сред, имеющее важное практическое значение.Известен, например, способ получейия кислотного гидролизата белоксодержащего материала, предусматривающий обработку кормовых дрожжей серной кислотой при температуре 191 С в течение 2 ч.Наиболее близким к изобретению является способ получения кислотных гидролиэатов яичного лизоцима, бычьего а-химотрипсиногена: цитохрома С, яичного45 50 альбумина в присутствии антиоксидан та-(индолил)-пропионовой кислоты,триптамина, тиогликолевой кислоты, р-меркаптоэтанола (в атмосфере азота или беэ).Все указанные добавки вводят в реакционную смесь в концентрациях 1 - 50 мг на3 мг белка, Использование этого методапозволяет снизить потери триптофана впроцессе гидролиза, а также улучшить аминокислотный состав гидролизата,Однако степень разрушения аминокислот в процессе гидролиза остается довольно значительной.,Целью изобретения является повышение выхода целевого продукта.Поставленная цель достигается тем, чтов способе получения кислотного гидролизата белоксодержащего материала,включающем обработку сырья раствором кислотыпри повышенной температуре в присутствии антиоксиданта, вкачестве антиоксиданта используют 3,5 дитретбутил-гидроксидиметиламиномет-илфенол (основание Манниха) и вводят егов реакционную смесь совместно с сульфатом аммония, при этом количество антиоксиданта и сульфата аммония составляетсоответственно 0,01 - 0,2 и 0,5 - 0,9,Способ осуществляют следующим образом,Белоксодержащий материал помещаютв гидролиэную емкость, заливают кислотой,добавляют сульфат аммония до конечнойконцентрации 0,5-0.90 и основание Манниха до конечной концентрации 0.01. 0,02;(реакционную смесь нагревают ивыдерживают в течение определенноговремени. Способ пригоден для получениягидролизата любого белоксодержащего материала: кормовых дрожжей, дрожжевогоизолята, рыбокостной муки и др. Гидролизможет осуществляться любой кислотой, нопредпочтительна серная кислота.Продолжительность гидролиза и температура, при которой проводят гидролиэ, не имеют принципиального значения и определяются требуемой глубиной расщепления белкового материала, Например, при получении гидролизата кормовых дрожжей оптимальным является следующий режим концентрация серной кислоты 12 ф, темпе-. ратура 131 С, продолжительностьгидролиза 1,5 ч, гидромодуль 1;7.Обеспечивающая .требуемый эффект концентрация сульфата аммония составляет 0,5 - 0,9. В реакционную смесь сульфат аммония вносят в кристаллическом виде или в виде раствора, Основание Манниха (3,5-дитретбутил-гидроксидиметиламинометилфенол) вносят в реакционную смесь в 5 10 15 20 25 30 35 40 конечной концентрации 0,01 - 0,02 как виндивидуальном виде, так и в виде растворов. Эффект обеспечивается лишь в присутствии одновременно сульфата аммония иоснования Манниха, использование каждого из них в отдельности не приводит к достижению цели,Характеристика гидролизатов кормовых дрожжей приведена в табл, 1.Влияние концентрации сульфата аммония на характеристики гидролизата кормовых дрожжей представлено в табл. 2,Влияние концентрации основания Манниха на характеристики гидролиэата кормовых дрожжей представлено в табл, 3,Как видно из данных табл. 2, оптимальный диапазон концентраций сульфата аммония составляет 0,5 - 0,90.Данные табл. 3 показывают, что диапазон наиболее приемлемых концентрацийоснований Манниха составляет 0,01-0,020.П р и м е р 1, Кормовые дрожжи в количестве 31,5 г помещают в аппарат емкостью250 мл и заливают 218 мл 120-ного раствора серной кислоты, В аппарат вносят 1,25 г(0,50) сульфата аммония и 25 мг (0,01)3,5-дитретбутил-гидроксидиметиламинометилфенола (основания Манниха). Гидролиэ проводят в течение 1,5 ч при 131 С, Поокончании процессагидролиэа гидролизатфильтруют через бельтинг и нейтрализуютдо рН 5,5,П р и м е р 2. Гидролиэ и обработкугидролизата проводят аналогично примеру1, В аппарат вносят 2,2 г (0,9) сульфатааммония и 250 мг (0.10 ь) основания Манниха,П р и м е р 3, Гидролиз и обработкугидролизата проводят аналогично примеру1, В аппарат вносят, 1 г (0,250 Д) сульфатааммония и 125 мг(0,050) основания Манниха.Показатели гидролизатов, полученных впримерах 1 - 3, представлены в табл,4.П р и м е р 4. Рыбокостную муку (РКМ) вколичестве 31,5 г загружают в аппарат рабочим объемом 250 мл и заливают 128 мл1206-ного раствора Н 280 л, Гидролиз проводят в течение 65 мин при 131 С, По окон-.чании процесса гидролиэа гидролизатфильтруют через бельтинг и нейтрализуютдо рН 4,1.П р и м е р 5. Дрожжевой изолят (ДИ) вколичестве 31,5 загружают в аппарат рабочим объемом 250 мл и заливают 218 мл 12 ного раствора Н 2804, Гидролиз проводят втечение 60 мин при 131 С. По окончаниипроцесса гидролиза гидролизат фильтруют через бельтинг и нейтрализуют дорН 4,1.1752313 формула изобретенияСпособ получения кислотного гидролизата белоксодержащего материала, включающий обработку сырья раствором кислоты при повышенной температуре в присутствии антиоксиданта, о т л и ч а ю щ и й с я тем,что, с целью повышения выхода целевого поодчкта, в качестве антиоксиданта используют 3,5-дитретбутил-гидроксидиметиламинометилфенол и вводят его совместно с 5 сульфатом аммония в количестве 0,01 -0,02%, и 0,5 - 0,9%, соответственно,Таблица 1 Показатель, ха кте из ю й пол ченный ги олизат Условия проведения гидролизаГлутаминг Аспарагиновая кисло. вая кислота, мг/мл та, мг/мл 8,1 9,45 11,0 8.9 1,4 11.5 32000 10,40 Б.2 16,4 11.5 9,80 53000 8,2 7,0 12,4 1 1,513,5 43400. 10.01 13,1 7,0 Т а б л и ц а 2 Показатель, ха е из ю Нпол енный ги олизат Концентрация сульфата аммоя, гам. мг/мл Цветность,град.Таблица 3 12-ная серная кислота 131 С, 1,5 чТо же, в присутствии 0,5 сульфата аммония То же, в присутствии 0,01 основания МаннихаТо же, в присутствии одновременно 0,5 сульфата аммония и 0,11 основания Манниха 0 0,1 0,3 0,5 0,7 0,9 1,О 1,3КНТ СССР оизводственно-иэдательский комбинат "Патент", г. Ужгород, ул, Гагарина, 10 акаэ 2711 ВНИИПИ Го Тиражтвенного комитета по иэобрете 113035, Москва, Ж, Раушска Подписноеям и открытиям прнаб 4/5