Способ культивирования микроводоросли хлореллы

СОЮЗ СОВЕТСНИХсоциАЛистичеснихРЕСПУБЛИК 9) О 1 84 МИТЕТТНРЫТИЯМ ГОСУДАРСТВЕННЫЙ НПО ИЗОБРЕТЕНИЯМ И ОПРИ ГННТ СОСР ИОАН Бюл.19икробиологии А то др, Некото бенности ме штамма СЬ 1 о ыетноге 11 акий иоло гич 17-19.(54) СП ДОРОСЛИ (57) Из биологи ется ку ИРОВАНИЯ ИИКРОВОСОБ КУЛЬ ХЛОРЕЛЛЫ кас ослеи,т водо- переме:1 и х ос ращивщения тношении икробио- касается ли в услоания.Приме ши и культиния водо- льнуввытяжка стерильно льтивиров кчю питат в вирование). рослей готов ия й ит водна в, Для и олодовые то среду, коиз солодовь ния вытяжк потовл росткберут 400 г ростки т 1 л вона 8 ч я настам фазу,Й фильтр вляютзаливаю ичеств тавляют атуре дл т жидкую атерчатьнием разба 10 л) и р Ои Водыр осатной темперчтем отделяют ее через м допровод при комн вания, з фильтрую а перед водой в по 50 мл спользо 0 раз ( в колбы злил,ч темкс с гь 1 ленмейе А ВТОРСНОМУ СВИД:ТЕЛЬСТ(56) Бильмес Б.И. ифизиологические ософотоорганотрофногочц 1 аг 1 з, - Узбецкий бжурнал, 1985,2, сбретение относится к миеской промышленности иьтивирования микроводо Изобретение относится к м логической промышленности и культивирования микроводорослей масса которых широко применяетс личных отраслях народного ства.Цель изобретения - повышение выхода биомассы микроводоросли хлореллы.Способ культивирования микроводоросли хлореллы заключается в том, что инокулят микроводоросли хлореллы вносят в жидкую органоминеральнчю питательную среду, представляющую собой 2-4%-ную водную вытяжку солодовых ростков или смесь 2%-ной водной вытяжки солодовых ростков и 0,5%-ного водного экстракта хлопкового шрота биомасса которых широко применяетсяв различных отраслях народного хозяйства. Цель изобретения - повышение выхода биомассы мцкроводоросли хлореллы. Способ культивирования хлореллы заключается в том, что инокулят микроводоросли хлореллы вносят в жщкую органоминеральную питательнуюсреду, представляющую собой 2-4%-нуюводную вытяжку солодовых ростков и0,5%-ного водного экстракта хлопкового шрота в соотношении 1: 1, и выращивают водоросли в условиях освещенияи перемешивания. Предлагаемый способпозволяет увеличить выход биомассыфотоорганотрофных микроводорослейболее чем в два раза по сравнению сизвестным способом.з.п. Ф-лЫ,3 табл.750 мл и по 1 О мл в колбыемкостью100 мп, стерилиэуют при 0,5 атм20 мин.Для получения посевного материалаиспользуют 2"суточную культуру Фотоорганотрофного штамма СИ. чц 1 яагв.зшталя Е.К., выращенную на косякахтвердой питательной среды, которуюпереносят путем смыва в колбы, содаржащие 10 мл приготовленной вытяжкииз солодовых ростков, .и выращиваютв люминостате 2 сут. Полученную активированную культуру водорослей пере,носят в .колбы, содержащие по 50 мл,:в течение 4 сут с периодическим осве,щением люминесцентными лампами по 8 чв сутки при 26 С и перемешиваниивстряхиванием,Данные по интенсивности накопления, биомассы хлореллы приведены в табл. 1,Иэ табл. 1 видно, что продуктивность Фотоорганотрофныхводорослей 25при стерильном культивировании этимспособом составляет 165,0 млн. клетокна 1 мл среды, максимальная продук-.тивность этого штамма хлореллы наизвестной среде составляет 77,3 млн.клеток на 1 мл среды.3П р и м е р 2 (нестерильное культивирование). Питательную среду готовят так же, как в примере 1, но не, стерилизуют. Полученную среду разли вают в культиваторы лабораторной ус, тановки для выращивания водорослей,,состоящей из 10 культиваторов емко стью по 1 л каждый, и засевают активированной культурой фотоорганотрофных водорослей СЫ, чц 18 агхэ штаммЕ.К.Для получения активированной культуры (посевного материала) используют2-суточную культуру хлореллы, выращенную на косяках твердой питательнойсреды. Ее переносят ив расчета 1820 млн. клеток на 1 мп среды путемсмыва в колбы Эрленмейера, содержащиепо 10 мл нестерильной жидкой питательной среды, которой служит воднаявытяжка из солодовых ростков, и ведутвыращивание в люминостате при 2226 С 4 сут при периодическом освещении по 8 ч в сутки и леремешивании.Выросшую 4-суточную жидкую культуру55хлореллы переносят в колбы Эрленмейера емкостью 500 мл, содержащие по5 О мл питательной срецы из расчетаПлотность культуры водорослейна 4-е суткироста, млн,клеток/1 млсреды Варианты культивиро- вания Стерильное (в колбах):на пептонно-солевой средена предлагаемойсреде (4 -наяводная вытяжка изсолодовых ростков) Нестернльное (в культиваторах):на пептонно-солевой средена предлагаемойсреде (4 Е-наяводная вытяжка изсолодовых ростков) 77,3 165,0 Роста нетф 155,7 Рост водорослей подавляется из-за бурного развития бактерий.Таким образом, культивирование фотоорганотрофного штамма хлореллы на водной вытяжке из солодовых ростков позволяет увеличить продуктивность культуры в 2,1 раза по сравнению с известной средой, а также дает возможность проводить процесс культи нирования этих. водорослей в нестерильных условиях. не менее 18-20 млн. клеток на 1 мп среды, и выращивают в условиях люминостата при 22-26 С 4 сут. Полученную активированную культуру Фотооргано трофных водорослей переносят в культиваторы из расчета не менее 18- 20 млн, клеток на 1 мп среды и выращивают в течение 4 сут при периодическом барботировании и аэрации среды с помощью микрокомпрессора марки БКи освещении интенсивностью 6-8 тыс. лк от лампы ДРЛпри 22-26 С.Из приведенных в табл.1 результатов видно, что при культивировании хлореллы этим способом максимальная плотность культуры составляет 155,7 млн. клеток в 1 мл среды, На известной оптимальной среде (пептонно-солевой) вести культивирование таким способом, т.е. без соблюдения стерильности, невозможно.Т а б л и ц а 1(известная солодооды: одная выт ых ростко200 100 50 40 20 к 5,5 ,9 ,1 Стерильное на пепт в колбах):но-солеои сред а предл гаемойесь 2%108,бО,еде 5 15658П р и м е р 3 (стерильное культи вирование), Для культивирования фотоорганотрофных водорослей готовят жидкую питательную среду которой явля У1 5 ется смесь равных объемов водных вы-, тяжек из солодовых ростков и хлопкового шрота. Вытяжку из солодовых ростков (2%"ную) готовят аналогично примеру 1. Экстракт из хлопкового шрота (0,5%-ный раствор) получают следующим образом. Навеску шрота 50 г заливают 1 л водопроводной воды, кипятят 30 мин, остужают и фильтруют через матерчатый фильтр. Перед засевом инокулятом хлореллы смешивают по 1 л вытяжки солодовых ростков и экстракта из хлопкового шрота, доводят объем до 10 л. Среду стерилизуют при 0,5 атм в течение 20 мин. В даль нейшем способ культивирования выполняют, как в примере 1.Данные роста хлореллы на различных вариантах питательных сред приведены в табл,2, 25Продуктивность культуры хлореллы при стерильном культивировании этим способом 195 мпн. клеток на 1 мл на 4-е сутки, а на известной среде - 77,3 млн. клеток на 1 мл. ЭОП р и м е р 4, (нестерильное куль-. тивирование), Питательную среду готовят так же, как в примере 3, но не стерилизуют, Исходная плотность засева культурой хлореллы 18-20 или. кле 35 ток на 1 мл. В дальнейшем культивирование осуществляют аналогично примеру 2. Максимальная продуктивность хлореллы на предлагаемой среде 154, 1 млн. клеток на 1 мл, на известной среде (пептонно-солевой) рост водорослей отсутствовал из-за подавления бактериями (табл,2). ной водной вытяжки солодовых ростков и 0,5%-ного экстракта хлопкового шрота)Нестерильное (в культиваторах):на пептонно-солевой средена предлагаемой среде (смесь 2%- ной водной вытяжки солодовых ростков и 0,57-,ного экстракта хлопкового шрота) Из данных, приведенных в табл.2, видночто культивирование фотоорганотрофного штамма хлореллы на смеси (1: 1) 2%-ной водной вытяжки солодовых ростков и 0,57-ного экстракта хлопкового шрота увеличивает продуктивность культуры в 2,5 раза, а также позволяет проводить процесс в нестерильных условиях.Данные, обосновывающие использование 2-47-ной водной вытяжки солодовых ростков, а также смеси 27.-ной водной вытяжки солодовых ростков и 0,57-ного водного экстракта хлопкового шрота в соотношении 1:1 в качестве питательной среды для получения максимальной продуктивности культуры фото-. органотрофного штамма микроводоросли хлореллы, приведены в табл.З,Т а б л и ц а 31565884 женному способу по сравнению с известным обеспечивает увеличение выходабиомассы более чем в 2 раза. 52,2 88,6 50,0 129,2 195,2 138, 1 12. Способ по п.1, о т л и ч а ю - щ и й с я тем, что при использовании 2 Х-ной вытяжки солодовых ростков в нее дополнительно вносят 0,5 Х-ный водный экстракт хлопкового шрота в соотношении 11. Таким образом, культивирование,.микроводорослей хлореллы по предло Составитель Р.АндрееваРедактор О,Юрковецкая Техред И,Дидык Корректор Т,Малец Заказ 1199 Тираж 489 Подписное ВНИИПИ Государственного комитета по изобретениям и открытиям прн ГКНТ СССР 113035, Москва, Ж, Раушская наб., д. 4/5Производственно-издательский комбинат "Патент", г,Ужгород, ул. Гагарина, 101 Водный экстракт иэ хлопкового шрота, г/л воды:200100504020105,Смесь (1:1) из водной вытяжки солодовых ростков и хлопкового щрота соответственно, г/л:40 и 10,20 и 510 и 25 5 Формула изобретения 1. Способ культивирования микроводоросли хлореллы, включающий засев органоминеральной среды микроводорослями, выращивание их в условиях освещения и перемешивания, о т л и ч а - ю щ и й с я тем, что, с целью повышения выхода биомассы,в качестве органоминеральной среды используют 2- 4 Е-ную водную вытяжку солодовых ростков.