Способ определения амедина

(5946 1 11 21 78 ОП АНИЕ ИЗОБРЕТ ОМУ СВИДЕТЕЛЬСТВУ(21) 4274378/ (22) 01.07.87 (46) 30.05.89 (71) Каунасск тут Бюл. У 20медицинский инсти П,В айн ауск ас 432 (088.8) 2-946-75. И.И. Справочни мин. М.: Химияпо аналити, с. 23 Лурьеческой хи А сительной5 табл. аналитичес делен чеснолнсуществляют следу Спосо образом.м е р 1. Опртанции,тельную ворсаствора амедпробе), приной буферно деление амед в субВ дели ят потандарт которота. За носят 1на (О авляю одного ,12 мг рН смеси ниверс ал ГОСУДАРСТВЕННЫЙ КОМИТЕТПО ИЗОБРЕТЕНИЯМ И ОТКРЫТИЯМПРИ ГКНТ СССР 54) СПОСОБ ОПРЕДЕЛЕНИЯ57) Изобретение касаетсой химии, в частности о Изобретение относится к аналитической химии, а именно к способам количественного определения амедина - 2-диметиламиноэтилового эфира фенил" циклогексилгликолевой кислоты гидрохлорида - экстракционно-фотометри ким методом, и может быть примене в фармацевтическом анализе для ко чественного определения препарата в субстанции.и лекарственных формах.Целью изобретения является повышение точности и чувствительности определения и раслирение области применения способа. амедина в фармацевтических препаратах и лекарственных формах, Для повьппения точности и чувствительности анализа исходную пробу в водном раст" воре обрабатывают кислотным фиолетовым антрахиноновым красителем прн рН 2-5 с последукщей экстракцией хлороформом, обработкой экстракта водным раствором щелочи и фотометрированием водного слоя. Эти условия позволяют снизить открываежй минимум амедина с 3400 до 7,3 мкг при отноощибке ф 2 против 2,54%. 4,0, 2 мл 0,043-ного водного раство- С ра реагента и 10 мп хлороформа.Смесь взбалтывают в течение 3 мин,затем оставляют для разделения фазна 10 мин. После разделения фаз хлороформный слой переносят в делитель- пЬ ную воронку, содержащую 12 мл 0,1 н. 00 раствора гидроксида натрия, и встря хивают 10-15 с. После отстаивания фаз фф отделяют окраиенный щелочной раствор. фп Оптическую плотность окращенного раствора измеряйт с помощью фотоэлектроколориметра КФК(светофильтр при590+10 нм, кювета 20 мм). В качестве раствора сравнения берут0,1 н,раствор, гидроксида натрия.Построение калибровочного графи- ффффф В делительные воронки вноэ 2 э Ою 4 016 Оь 8 и 10 млого раствора амедина, в 1 мло содержится 0,12 мг препар10 тем во все делительные воронки прибавляют раствор УБС (рН 4,0) до 8 мл, по 2 мл 0,04%-ного раствора реагента и по 10 мл хлороформа и поступают, как указано выше. Используя полученные значения оптической плотности (табл,1, строят калибровочный граФик.Подчиняемость закону Бугера-Ламберта"Вера наблюдается в пределах концентраций амедина 0,024-0,12 мг/мл,Используя калибровочный график, определяют количество анализируемого препарата. Этот метод можно применять для количественного определения амедина как в субстанции, так и в таблетах.П р и м е р 2. Количественное определение амедина в таблетах по 0,003.Одну таблету взвешивают (точная навеска) и измельчают. Берут около 0,05 (точная :навеска) измельченной 25 таблеточной массы, помещают в мерную колбу емкостью 100 мл, растворяют и доводят до метки раствором УБС (рН 4).В делительную воронку вносят 8 мл раствора анализируемого препарата и 2 мл 0,04%-ного раствора реагента. Далее поступают аналогично примеру 1.Расчет концентрации амедина в таблетах можно производить не только по калибровочному графику, но и по Формуле Э 0 0001 2. я. 1 р 1 00С,Х = ф П Ча 0,003 где Э - оптическая плотность анали 40зируемого раствора;П - оптическая плотность станс,тдартного раствора амедина (П = 0,83 при содержании 0,12 мг/мп амедина);45 0,00012 - содержание амедина в 1 млстандартного раствора;точная навеска исследуемой таблеты амедина;а - точная навеска измельченной масси таблеты амедина, 50взятая на анализ;- объем в котором растворенаГвзятая на анализ навескатаблеты амедина; 1 - объем исследуемого раствок ра, взятый на анализ; 0,003- количество амедина в исследуемой таблете, Ланние о выборе оптимальных условий количественного определения амедина представлены в табл.2 и 3.Из результатов, приведенных втабл.2, следует, что ионный ассоциатамедина и реагента в наибольших количествах экстрагируется хлороформомпри рН 2-5, В дальнейших исследованиях использовали раствор универсальной буферной смеси с рН 4.Из данных, приведенных в табл.3,следует, что для полного образованияионного ассоциата между амедином иреагентом, необходимо прибавить 1,82,5 мл 0,04%-ного раствора кислотного Фиолетового антрахинонового красителя, В дальнейших исследованияхприбавляли по 2 мл раствора указанного реагента,Для достижения оптимальных условий количественного определения аме"дина, основанного на взаимодействии .препарата с кислотным Фиолетовымантрахиноновым красителем, необходимобрать 1-2 мл раствора амедина, содержащего в этом объеме 0,024 -0,12 мг этого препарата, 6-7 мп раствора универсальной буферной смесис рН 4, 2 мл 0,04%-ногораствора реагента и 10 мп хлороформа.П р и м е р 3. Определение амединав биологическом материале.К 100 г мелкоизмельченной печенитрупа было добавлено 10 мг амединаи оставлено на сутки при периодическом перемешивании. Исследуемый препарат из печени трехкратно изолируютсмесью воды и этанола (1:1), подкисленной до рН 2,0 10%-ным растворомсерной кислоты. Объединенные вытяжкифильтруют через 4-5 слои обеззоленных бумажных Фильтров под вакуумом,отгоняют этанол. Амедин из вытяжекэкстрагируют хлороформом из щелочнойсреды (рН 9,0-11,0), Сухие остаткивытяжек после отгонки хлороформарастворяют в 40-100 мп универсальнойбуферной смеси (рН 4,0). Для количественного определения берут 1-2 млэтого раствора и далее поступают,как в примере 1. После определенияоптической плотности количество выделенного амедина из биологического.материала рассчитывают по калибровочному графику.В табл,4 приведены результаты определения при использовании различныхщелочейТаблица 1 Зависимость оптической плотности окрашенных растворов от количества амединаОптическая плотность мл мг 0,15 0 в 18 0,18 0,17 0,33 0,34 0,34 0,34 0,49 0,51 0,51 0,50 0,66 0,67 0,68 0,67 0 82 0 84 0 84 0 83 0,024 0,048 0,072 0,096 0,12 0,2 0,4 0,6 0,8 1,0 Т аблиц а 2 Зависимость величины оптической плотностиот рН универсальной буферной смеси (УБС) Р (среднее из рН Взято амедина Взято0,04%-ного растворареагента,УБС трех определений) мг 0,120,120,120,120,12 1,0 1,0 1,0 1,01,0 0,83 0,83 0,83 0,82 0,72 5 148Сравнительная оценка количественного определения амедина в субстанции известным и предлагаемым способами и результаты количественного определения амедина в таблетах предлагаемым способом приведены в табл,5.Таким образом, предлагаемый способ более чувствителен, чем известный (открываемый минимум его 7,3 мкг в пробе, тогда как открываемый минимум известного способа определения амедина в субстанции 3400 мкг).Предлагаемый способ характеризуется более высокой точностью, чем известный. Относительная ошибка определения амедина в субстанции в таблетах не превышает 2 , в то время как относительная ошибка определения амедина в субстанции изестным методом составляет -,54%.Предлагаемым способом можно определять амедин не только в субстанции 3343 6(как известным способом), но и в таблетах и объектах биологического происхождения,Формула изобретения Способ определения .амедина путем растворения анализируемого вещества с последующим измерением его содержания, о т л и ч а ю щ и й с я тем, что, с целью повышения точности, чувствительности определения и расширения области применения способа, растворение проводят в воде, водный раствор обрабатывают кислотным фиолетовым антрахиноновым красителем при рН 2-5, экстрагируют хлороформом, экстракт обрабатывают водным раствором щелочи и измерение содержания анализируемого вещества осуществляют ,фотометрированием водного слоя.1483343 ТаблицаЗ Зависимость величины оптической плотности от объема 0,04 -ного растворареагента П (среднее из рНУБС Взято амедина Взято 0,04%- ного раствора реагента,мг трех определений) 1,0 0,12 1,0 . 0,12 1,0 0,12 1,0 0,12 1,0 0,12 1,0 0,12 Таб лиц а 4 КоличестОптическая плотность при обработке 0,1 н,растворами во амедина мг КОН ИаОН Таблица 5 Предлагаемый способ Известный способ Найде- Иетропогичесно, % кие характе- ристики Найдено, % Иетрологические характеНавеска, г Навеска; г ристики Амедин в субстанции 0,01 99,75 х=100,040,01 101,20 8=1,210,01 101,20 Ву =0,54Ою 01 98 э 31 о,щ =1 э 50001 9975 А, н =1 э 50Амедин в таблетах по 0,003 х=99,758=2,028 =-0,91,:2,53А=т 2,54 точную навеску амедина (0,01 г) при определении его в субстанциипредлагаемым способом растворяют в, 100 мл воды, для анализа беру1 мл полученного раствора. 0,3 0,3 0,3 0,3 0,3 97,7397,73101,1099,93102,27 0,12 0,12 0,12 0,12 0,12 4 4 4 4 4.4 0,83 0,82 0,83 0,84 0,83 0,05 0,05 0,05 0,05 0,05 1,0 1,5 1,8 2,0 2,2 2,5 0,83 0,82 0,83 0,84 0,83 97,50 99,37 101,20 97,50 99,37 0,78 0,81 0,83 0,83 0,83 0,83 х=98,998=1,55Ьт= 0,70ощ