Способ определения неспецифической резистентности организма к условиям высокогорья

. СОКИ СОВЕТСНИХ СОЦИАЛИСТИЧЕСКИХ РЕСПУБЛИК,80137 А 1 32 159 4О 1 11 33/ НИЕ ИЭОБРЕТЕНИ ОП НАВ сия иеактив 1978,ЩИФИАНИЗИА к медициения инзателясти орга.я у нациповывеГОСУДАРСТВЕННЫЙ КОМИТЕТ СССРПО ДЕЛАМ ИЗОБРЕТЕНИЙ И ОТНРЫТИЙ ТОРСНОМУ СВИДЕТЕЛЬСТВ(54) СПОСОБ ОПРЕДЕЛЕНИЯ НЕЧЕСКОЙ РЕЗИСТЕНТНОСТИ ОРГУСЛОВИЯИ ВЫСОКОГОРЬЯ(7) Изобретение относитсяне, предназначено для выявлдивидуального значения нокнеспецифической резистентннизма к условиям высокогорентовЦель изобретенияние точности способа. Для этого про изводят забор крови, разведение ее цитратно-физнологическим раствором, инкубацию в термостате при комнат-. ной температуре взвеси зритроцитов, центрифугирование н определение экстинкции супернатанта. Инкубируют одновременно две пробы - одну в.теро мостате при температуре 42-44 С, .другую в холодильнике при 4-10 С в течение 30-90 мин и затем обе пробы инкубируют при комнатной температу .ре 18-22 С в течение 30-60 мин. Цель . ную кровь разводят цитратно-буфернофизиологическим раствором до концен . трации 5-103 и затем после центрнфугирования определяют экстинкцию надосадочной зидкости, по которой судят о степенй гемолнза и соответсФ- венно резистентности эритроцитов.Изобретение относится к медицине и может быть использовано для выявления индивидуальных значений этого показателя у пациентов.Целью изобретения является повышение точности способа.В предлагаемом способе, включающем забор крови, разведение ее цитратно-физиологическим раствором, инкубацию в термостате при комнатной температуре взвеси эритроцитов, центрифугирование и определение экстинкции супернатанта, инкубируют одновременно две пробы, одну в термостате при температуре (+41) - (+43) С, другую в холодильнике при (+4) (+10) С в течение 30-60 мин при этом цельную кровь разводят цитратно-Физиологическим раствором до. концентрации 5-15%, и после центрифугирования определяют экстинкцию надосадочной жидкости (супернатанта), по которой судят о степени гемолиза и соответственно резистентности организма.П р и м е р 1. У исследуемой М,Л.И., 25 лет, рост 163 см, вес 57 кг, средней степени тренированности произведен забор крови из пальца. Пробы крови разводят цитратно-буферно-физиологической смесью до концентрации 5-10%, центрифугируют при 1800 об/мин в течение 10 мин При помощи пастеровской пипетки супернатант переносят в кювету емкостью 1 мл и на "Спеколе" определяют экс- " тинкцию при длине волны 536 ммк. Е, пробы 1 0,05; Е пробы 2 0,05. Супернатант из кюветы осторожно сливают обратно в пробирку с осадком эритроцитов, после чего путем встряхивания и пипетирования восстанавливают однородность суспензии. Обе пробы инкубируют одновременно, одну в термостате при (+42) - (+41) С, другуюов холодильнике при +4 С в течение 30 мин, затем при комнатной температуре +18 С в течение 30-60 мин, Пробы центрифугируют при 3000 об/мин в. течение 5 мин после чего определяют экстинкцию супернатанта в пробах при той же длине волны Ез пробы 1 - ТГ = = 0,065; Е 4 пробы 2 - ХГ = 0,095. В каждую пробирку доливают дистиллированную воду до 5 мл, после чего осадок эритроцитов пипетируют и ге-. молизируют в течение 15 мин, После центрифугирования при 3000 об/мин вЕ х 100 0,065 х 10010 Е д + Ед 10 х 0,16+0,095 0,5 ф - = 5,6%. 30 Параллельно производят определение перекисной резистентности эритроцитов: Е = 0,08; Е = 0,07; Е = 35 = 0,341 Е 4 0,04.Производят рассчет показателейперекисной резистентности эритроцитов: 40(Е+Е - Е ) х ОО2 4ПРЭ =Е -Е 4 45 (0,075-0,04)х 100 0,035 х 100 0,34-0,04 0,3 11,6%. После курса тренировки при помощи кратковременной острой гипоксиии. вызываемой гипоксической 10,3%."ной смесью кислорода с азотом, в течение 5 сут при дыхании по 1 разу в 1 сут в течение 20 мин произведено повторное обследование и определение всех перечисленных выпе показателей.При определении экстинкции на "Спеколе" при той же длине волны,течение 10 мин гемолизат дополнительно разводят в 2 раза и определяютэкстинкцию на спектрофотометре, например "Спеколе", при длине волны536 ммк: Е пробы 1 = О,7 х 10; Епробы 2 = О,бх 10, Производят рассчет спонтанно-механического, теплового и холодового гемолиза эритро цитов.ТГ = Наряду с этим определяют поКаза 1 О тели перекисной резистентности зритроцитов: Е, = 0;09; Е = 0,07, Е= 0,35, Е = 0,05,Е х ОО 1,61 ОЕ + Е86 85Производятрассчет показа,телей пе 0,09 х 100 9 , 15 рекисной резистентности эритроцитов:3,49 3,49 0,08-0,05 х 100 3ПРЭ 0,35 - 0,05 О, ЗО- 10%. После тренировки при помощи кратковременной острой гипоксиии (условия 25 аналогичные примеру 1) произведеноповторное определение произведенных выше показателей спонтанно-механического, теплового и холодового гемоли-.за эритроцитов: Е = 0,06; Е = 30 = Оу 081 Е (Т 1) = 0,201 Еф (Х 1)0,04 х 10055 0,33 0,08 х 00 8Зф 4 + Оэ 16 Зэ 56 Определены также показатели перекисной резистентности эрнтроцитов в 20 соответствии с указанной вьппе методикой; Е = 0,09; Е = О,2; Е= = 0,371 Е = 0,05. Исследуемая М,Л.И. подъем на вьг.соту 3200 м в условиях Тян-Шаня перенесла хуже, чем остальные испытуемые. Предъявляла жалобы на головную35 боль, слабость, головокружение.П р и м е.р 2, У исследуемой Д.Г.И., 28 лет, 167 см ростом, весом 64 кг, средней степени тренированности произведен забор крови из 40 локтевой вены в количестве 9 мл, к ней добавлен 1 мл 3,8%-ного раствора цитрата натрия. В пробирки разлит буферно-физиологический раствор по 1,1 мл и добавлена кровь по 0,1 мл. 45 Последующие операции выполнялисьв той же последовательности, что и впримере 1.На "Спеколе" определена степень 50спонтанно-механического, теплового и= 6,17 1 О. Наряду с этим определяют показатели перекисной резистентности эритроцитов: Е, = 0,08; Е = 0,08; Е= 0,08; Е, = 0,04.Производят рассчет показателей перекисной резистентности эритроци тов: Испытуемая Д.Г.И,.подъем на высоту 3200 и перенесла удовлетворитель"5 1377732 6но. Жалоб на плохое самочувствие не П р и м е р 3. Использована предъявляла. Объективно: отмечены кровь исследуемой Д,Г.И, температу обычные сдвиги со стороны дыхания и ра и время выдеожано такое же, как в кровообращения .характерные для этой примере 2. Изменяли только концент 5высоты. рацию эритроцитов; Концентрация эритроцитов, 7 СМГ ТГХГ Ое 02 Оэ 10 Ое 09 0,04 0,13 0,1 0,05 0,16 0,12 1 О 0,15 0,14 0,06 15 20 0,15 0,18 0,08 формула и з о б р е т е н и я Способ определения неспецифической резистентности,организма к условиям высокогорья, включающий йнкуба Составитель А, АндреевРедактор Э. Слиган Техред Л,Олийнык Корректор М. ШарошиЗаказ 865/40 Тираж 847 ПодписноеВНИИПИ Государственного комитета СССРпо делам изобретений и открытий113035, Москва, Ж, Раушская наб., д. 4/5 Производственно-полиграфическое предприятие, г. Ужгород, ул. Проектная, 4 Таким образом, оптимальной является концентрация 1 ОХ, граничным 5 и 15%.Как,видно из приведенных примеров, при концентрации эрнтроцитов0,2 Ж падает величина экстинкции,при 203 ингибируется холодовой гемолиз эритроцитов, т.е. при этих условиях указанная выше закономерностьне выявляется.,20ции пробы цитратной крови, центрифугирование и определение экстинкциис последующим расчетом, о т л ич а ю щ.и й с я тем, что, с цельюповышения точности способа, инкубируют две пробы крови, одну при (+41)- (443) С, другую при (+4) - (+10) Св течение 30-90 мин, затем обе пробыдополнительно инкубируют при (+18) 30 (+22 ) С, при этом перед первой инкубацией пробы разводят до концентрации 5-153, далее рассчитывают коэффициенты тепловой и холодовой реэис"тентности,эритроцитов, а о резистентности организма судят по соотноше 35 ни рассжтаяных в личин,