Способ моделирования паркинсонического синдрома

СОЮЗ СОВЕТСНИС ОЦИАЛИСТИЧРЕСПУБЛИК А 2 еБ,3 ЕТ ЕНИЯ УДАРСТВЕННЫЙ НОМИТЕТ ССС ДЕЛАМ ИЗОБРЕТЕНИЙ И ОТНРЫТ ИСАНИЕ ИЗ(57) Изобретение относится к экспериментальной медицине и может быть использовано для изучения патофизиологических механизмов развития пар.кинсонизма, Для повьвпения воспроизводимости способа крысе в течение двух-трех дней ежедневно однократно внутрибрюшинно вводят резерпин в дозе 0,5-0,7 мг/кг. На третий-четвертый день билатерально в хвостатые ядра вводят раствор каиновой кислоты в дозе 0,1-0,2 мкг в каждое ядро.1 табл.1 12987Изобретение относится к экспериментальной медицине и может быть использовано для изучения патофизиоло-ических механизмов развития паркинсонизма.5Цель изобретения - повышение воспроизводимости способа эа счет предварительного введения животным резерпина с последующей инъекцией каиновой кислоты 10П р и м е р 1. Крысе весом 270 г в течение двух дней ежедневно однократно внутрибрюшинно вводят резерпин из расчета 0,5 мг/кг. На 3-й день через предварительно (за 2 нед, до 15 начала эксперимента) имплантированные канюли животному билатерально в хвостатые ядра вводят раствор каиновой кислоты в количестве О, 1 мкг в каждое ядро. Через 30 с после инъекции 20 отмечается застывание животного, Крыса сидит на месте неподвижно в течение 3,5 мин, после чего возникает непродолжительная спонтанная локомоция, в течение которой отмечается скованность движений, нарушения походки ("переваливание" с лапы на лапу), уменьшение длины шага. Отмечается повышенный тонус хвоста. Локомоция заканчивается застыванием, Через 30 15 мин после введения каиновой кис,лоты у крысы отмечается ригидность (появление горбатости), флексорная установка туловища (голова прижата к передним конечностям, задние конеч" 35 ности широко расставлены и выдвинуты вперед). Через 30 мин от момента введения каиновой кислоты происходит развитие тремора туловища Через 1,5 ч от момента введения каиновой 10 кислоты у крысы отсутствуют спонтанные локомоторные акты, При провокации локомоций (защипывание хвоста) во время движения крысы отмечается ригидность (горбатость) и тремор д 5 туловища, Таким образом, тяжесть паркинсонического синдрома составляет 4 балла. На 2-3-й дни наблюдения у живот 50 ных сохраняются указанные симптомы имеет место афагия, адипсия, развивается птоз. Начиная с 2-го дня осуществляют кормление животного через зонд, На 4-й день наблюдения у крысы локомоции не провоцируются при защипывании хвоста. Отмечается развитие дистрофических изменений верст- ного покрова, диареи, саливации (тяжесть паркинсонического синдрома составляет 5 баллов). Указанные симптомы паркинсонизма сохраняются до 10-годня наблюдения, При этом происходитснижение массы животного до 190 г, Гистологический контроль локализации введения кончиков канюль показал, что введение каиновой кислоты произведено в передне-дорзальные отделыхвостатых ядер,Таким образом, у крысы имел место остро развившийся тяжелый паркинсонический синдром.П р и м е р 2. Крысевесом 290 гв течение 3 дн. однократно внутрибрюшинно ежедневно вводят резерпин из расчета 0,7 мг/кг, Ба. 4-й день через предварительно (за 2 нед, до начала эксперимента) имплантированные канюли животному билатерально в хвостатые ядра вводят раствор каиновой кислоты в количестве по 0,2 мкг в каждое ядро, Через 2 ьин после введения каиновой кислоты у животного отмечается замирание - крыса сидит на месте в течение 5 мин, При этом имеет место развитие выраженной горбатости, появление флексорной установки туловища - приведение головы к передним конечностям, задние конечности выдвинуты вперед и расставлены в стороны, При спонтанно возникающей непродолжительной локомоции у животного отмечается уменьшение длины шага, снижение скорости ходьбы, скованность движений конечностей. Отмечается повышенный тонус хвоста, сохранение, горбатости во время движения, Через 15 мин от момента введения каиновой кислоты происходит развитие тремора головы, который через 3 мин охватывает туловище крысы.При предъявлении пищи у крысы от. сутствуют нюхательные движения вибрисс, Развивается птоз. Через 1,5 ч с момента введения каиновой кислоты у крысы отсутствуют спонтанные локомоторные акты, Провокация непроцолжительных локомоций достигается сильным болевым раздражителем. Зо время движения у крысы имеет место четкая горбатость и тремор туловища. Еще через 30 мин у животного локомоции не провоцируются при интенсивном болевом раздражении, Через 2,5 ч ог момента введения каиновой кислоты у крысы отмечается обильная саливация, нерегулярное дыхание частотой 50 раз в мин а через 5 ч - явле3 1 98ния диареи. Таким образом, тяжестьпаркинсоническога синдрома у крысыв первый день наблюдения составила5 баллов.На 2-3-й дни наблюдения у крысы5сохраняются указанные симптомы, имеет место афагия, адипсия, Начиная с2-го дня, осуществляют кормлениеживотного через зонд. На 3-й деньнаблюдения к указанным симптомам 10присоединяются дистрофические изменения шерстного покрова.В течение 4-10-го дней у крысыимеет место акинезия, отсутствуетспособность к лакомоции в ответ на 15болевое раздражение, Отмечается выраженная ригидноСть, вегетативньенарушения - диспноз, саливация, дистрофические изменения шерстнога покрова. Наблюдается тремар туловища. 20К 10-му дню масса крысы составляет200 г, Таким образом, тяжесть паркинсаническаго синдрома составляет5 баллов, Гистологический контрольлокализации введения кончиков канюль 25показал, что введение каиновой кислоты произведено в передне-дарзальныеотделы хвостатых ядер,Таким образом, у крысы имел местоостро развившийся тяжелый паркинсонический синдром,П р и м е р 3. Крысе весом 270 гв течение 2 дн. однократно ежедневновнутрибрюшинна вводят раствор резерпина из расчета 0,7 мг/кг, На 3-йдень через предварительно (за 15 неддо начала эксперимента) имплантираванные канюли животному билатеральнав хвостатые ядра вводят раствор каиновой кислоты па 0,1 мкг в каждое 40ядро. Через 40 с после инъекции отмечается застывание животного, Крысасидит на месте в течение 4,0 мин,после чего возникает непродолжительная локомоция, в течение которой отмечается скованность движений, уменьшение длины шага. Отмечается повьшенный тонус хвоста. Локомоция заканчивается застыванием животного, На про"тяжении этого застывания у крысы раз вивается ригидность (появление горбатости), флексорная установка туловища - голова прижата к передним конечностям, задние конечности расставлены в стороны и выдвинуты вперед. 5Отсутствует способность совершатьспонтанные локамоторные акты, Принанесении болевого раздражения у крысы возникают непродолжительные локо 793 4т мацли, ва время которых имеет место выраженная горбатость, повышенный тачус хвоста, тремар туловища. Таким образом, тяжесть паркинсонического синдрома у крысы составляет 4 балла. Еще через 2,0 ч у крыс отмечается от" сутствие провокации лакамоций в ответ на зашипывание хвоста.На 2-3-й дни наблюдения у крысы сохраняются указанные симптомы, имеетместо афагия, адипсия, Начиная с 2-го дня, осуществляется кормление живатнага через зонд. На 3-й день наблюдения у крысы отмечаются дистрофические изменения шерстного покрова, саливация, диспназ (тяжесть проявлений паркинсаническага синдрома сос-: тавляет 5 баллов). Указанные симптомы паркинсонизма сохраняются у животногода 10-га дня наблюдения. К этому времени масса крысы составляет 180 г.У крысы имеет место акинезия, ригидность, тремар, при болевом раздражении лакамации не провоцируются. Гистологический контроль локализациивведения кончиков канюль показал,чта введение каиновой кислоты произведена в передне-дарзальные отделыхвостатых ядер,Таким образам, у крысы имет местоостро развившийся тяжелый паркинсони ческий синдром.Результаты сценки проявлений парксинсанизма па предлагаемому и известному способам были обработаныстатистически,Динамика тяжести проявлений паркинсаническага синдрома при моделировании паркинсонизма различными способами приведены в таблице.Из приведенной таблицы следуетстатистически вьсоко достовернаябольшая выраженнасть васпроизводимости тяжелого паркинсаническага синдрома па предлагаемому способу в сравнении с известным способом моделирования паркинсанизма.Фа рмула изобретенияСпособ моделирования паркинсоническага синдрома путем введения фар-.1макалагических препаратов, а т л ич а ю щ и й с я тем, чта, с цельюповышения васпраизвадительнасти способа,животному вводят внутрибрюшинно раствор резерпина в дозе 0,5-0,7 мг/кг2-3 раза, затем однократно вводят вростральные отделы хвостатых ядермозга каиновую кислоту в дозе 0,10,2 мкг.1298793 Условия опыта Тяжесть проявлений паркинсонизма в баллах, (М+м)1-й день 3-й день 5-й день 7-й день Предложенный способ(резерпин 2,0 мг/кг)и = 20 0,9+0,1 1,4 ф 0,08 2,2+0,1 1,9+0,1 Составитель М.ПознякТехред И.Попович Корректор Г,Решетник Редактор В.Данко Тираж 434 Подписное ВНИИПИ Государственного комитета СССР по делам изобретений и открытий 113035, Москва, Ж, Раушская наб., д. 4/5