Штамм бактерий, используемый при мочке льна

Изобретение относится к микробиологической промышленности, а именно к получению активных споровых,материалов для мочки льна и представляет собой новый штамм бактерий, исполь зуемый при мочке льна.Известна культура С 1 озГгЫинп 8 цгГе 111, применяемая при мочке льна 13.Однако она не способнапри обычной 10 тепловой мочке в кислой среде разлагать пектиновые вещества, поскольку не синтезируют Фермент полигалактуро назу.Наиболее близким к предлагаемому 5 является штамм С 1 озйгЫдцш Ге 1 в 1- пецш 13 (ВНИИСХ), применяемый при мочке льна и способный разрушать пектиновые вещества 123.Недостатками данного штамма явля ются низкая активность продуцируемых им пектолитических Ферментов, неспособность к мочке льна в регенерированной мочильиой жидкости, а также неустойчивость при хранении, приво дящая к образованию различных морфологических Форм и малое спорообразование при промышленном выращивании.Цель изобретения - повышение активности спорового препарата для мочки льна.Поставленная цель достигается штаммом бактерий С 1 овггЫиив 1 е 1 ыпецш 84 (Всесоюзная коллекция микроорганизмов АН СССР, коллекционный .номер ВКИ В 1527 Д), используемым примочке льна,Штамм бактерий С 1 озггЫ 1 цш Ее 1 зхпецш 84 выделен с льносоломы,Полученный штамм идентифицирован 40по определителям Берже (1974) иРгечог (19 бб) и имеет следующие морфолого-культуральные и физиологическуюхарактеристики.Иорфолого-кулнтуральные признаки. 43Величина клеток 12-часовой культуры3-бхай,2 мкм. Клетки имеют вид палочек,которые через 1 бч превращаютсяв клостридии, имеющие Форму сигари через 48-80 ч споруются. В молодом,Явозрасте палочки очень подвижны,перитрихи окрашиваются по Граму.В клостридиальной стадии также подвижны, в клетках просматривается про=спора и накапливается гранулеэа. .ЫНа агаризовакной среде растет толь-ко в анаэробных условиях, образуя колонии оранжевого цвета, выпуклые,с ровными краями, с вросшей в агарболее темной точечной серединой,диаметр колонии 2-6 мм,На жидкой питательной среде приоптимальных температуре и рН проходитполный цикл развития и активно сбра"жнвает крахмал и пектиновые веществас образованием газа (в % по объему)водорода 54-60, углекислого газа40-46.Физиолого-биохимические признаки.Молоко с лакмусом, свертывает, нодкисляет, образует газ, желатину актив.но разжижает, целлюлозу разлагает ванаэробных условиях в присутствиистартовых доз углеводов. Анаэроб. Опотимум температуры для развития 35-37 С.Оптимальные значения рН 5,4-7,2.Отношение к источникам углерода.Растет на средах с различными углеводами, подкисляя среду и образуягаз. Активно используют ксилозу, глюкозу, лактозу, сахарозу, галактозу,фруктоэу, арабинозу, мальтозу,. декст.рин, крахмал, пектин; не используетрафинозу, спирты не усваивает.Отношение к источникам азота. Слабо использует.соли аммония и хорошоразвивается на средах с органическимиформами азота, такими как казеин,пелтон, кукурузный экстракт, аминокислотами (цистеином, цистином, аспарагиновой и глутаминовой, гистидином,тирозином, аргинином).Признаки штамма устойчивы, штаммне патогенен для человека и животных.Штамм С 1 ойггЫ 1 цш Ге 1 зхпецш 84хранится в музее Всесоюзной .коллекциимикроорганизмов института биохимиии Физиологии микроорганизмов ЯН СССРи имеет коллекционный номер ВКМВ 1527 Д.Сущность изобретения заключается в том, что штамм С 1 озггЫ 1 цш Ге 1 з 1- пецш 84 способен при выращивании образовывать споры, обладающие активным комплексом пектолитических ферментов,играющих существенную роль в процессе мочки льна,Бактериальный споровый препарат получают путем выращивания штамма С 1 озггЫхцш Ге 1 зпецш 84 на питательной среде следующего состава, г/л: картофельный или кукурузный крахмал 15-22; кукурузная мука 5-7; кукурузный экстракт 4-5; мел 4-6; аммоний сернокислый 1; 50%-ный раствор хлорного железа 3 мл; рН среды 5,8-7,4.1155618 Таблица 1 ПТЭ Штаммы Величина еличина эон зон 13 785 84 1496 619 0,98 3,30 0,27 5,60 1,89 0,35 Продолжение табл.1 КолиПГТЭ честноспор,млн/мл 12 мес, Хизмененныхформ 6 мес 3 мес 235 нм 550 нм ТВК 60 45 08 с 208 6 4 20 00 2,04 ата туры аблица 2 рН 5,В 4+1 521,3 После выращивания в 1 мл культуральной жидкости содержится 200 - 280 млнсдор. В табл. 1 представлена сравнительная характеристика спор предлагаемого штамма и известного, из которой видно, что новый штамм образует споры, обладающие хорошей выживаемостью в течение, одного года, а также высбЭффективность действия пре пектолитин, полученного из кулВнесены споры С 1. Ее 1 з 1 иецш 13 Внесены споры С 1. Ее 1 въпеош 84 2. В регенерированиой иочильно жидкости рН 6,8-7,0 кой активностью пектолитическнх ферментов, значительно превосходящейизвестный: по пектинметнлэкстеразев 1,9 раза, полигалактуроназе в1,3-1,8 раза, пектин-трансэлнминазе1,7-1,9 раза, полигалактуронат-трансэлиминаэе в 2-3 раза; и при этомобразует в 3,5 раза больше спор, чтосоответственно увеличивает выход 10 целевого продукта. Оптическая плотность 510 нм ТБК 235 нм 550 нм ТБК Выживаемость спор при хранении в 1 мл йтхс 1 иш Ее 1 з 3.пецш 84, на цроцесси льна отражена в табл, 2,Заказ 3042/23 Тирах 525 Подписное ВНИИПИ Государственного комитета СССР по делам изобретений и открытий113035, Москва, Ж, Раушская наб д. 4/5 Филиал ППП. "11 атент", г, Ужгород, ул. Проектная; 4 Предлагаемый штамм отличается от штамма-прототипа тем, что, образуя более активный комплекс пектолитических ферментов, он сокращает процесс мочки льна по сравнению со штаммом-прототипом при обычной тепловой мочке на 9 ч (на 27 ч по сравнению с контролем) и при мочкеф в регенерированной мочильной жидкости на 10 ч, в то время как штамм- прототип в последнем случае вообще неэффективен. Таким образом, предлагаемый штамм С 1 ов 1 гЫхцш 1 е 1 впешп84 позволяет получать препарат длямочки льна хорошего качества засчет сбалансированного синтеза пектолитических Ферментов. Ожидаемый экономический эффект от применения препарата, изготовленного на предлагаемом штамме С 1 овйг 1- с 1 дпш Ге 1 вхпецш 84 может составить 5-10 руб. на 1 т льносоломы или 10-20 руб. на 1 кг препарата.