Способ снижения микробной контаминации жидких сред

(54)(57) СПОС КОНТАМИНАЦИИ ЖИД вием ультразву итская,ва н нии пдейстном рется овыхисслеологисоедимежду вой ст с част ностью 5-15 ми частот не мен ниу не ной ст.ХХ УДАРСТВЕНКЫЙ КОМИТЕТ СССР ДЕЛАМ ИЗОБРЕТЕНИЙ И ОТКРЫТИ ИСАНИЕ ИЗОБРЕТЕ(71) Филиал по разработке голекарственных средств Научнодовательского института по бческим испытаниям хи 1 яческих.(56) 1. О. Б, РЬаппасорос 1 а1980.2.Патент США У 4086057,кл, А 61 Ь 2/02, опублик. 1 ОБ СНИЖЕНИЯ МИКРОБНОЙКИХ СРЕД воздейстка, отличаюс я тем, что, с целью умень- степени химических превращетем сокращения, времени возия ультразвуком в кавитационжиме, воздействие осуществлядве стадии с интервалом ними 5-15 мин, причем на перадии используют ультразвук отой 500-5000 кГц и интенсив,1 - 0,5 Вт/см в течение н, а на второй стадии - с ой 20-500 кГц и интенсивностью ее 1 Вт/см в течение времеобходимого для получения задан епени контаминации.1 11447Изобретение относится к стерилизации и дезинфекции жидких сред иможет быть использовано для получения жидкостей.Известен способ снижения микробнЬй контаминации жидкостей нагреванием их и выдерживанием при повышенной температуре Щ .,Недостаток способа заключаетсяв том, что он не применим для стерилизации термолабильных жидкостей.Наиболее близким к изобретениюявляется способ стерилизации термолабильных жидкостей при созданиив них ультразвукового поля с плотностью акустической энергии порядка 1 - 10 Вт/см при частоте 2025 кГц ф,Недостатком этого способа является то, что при указанных параметрах в жидкости возникает кавитация,инициирующая химические превращенияв стерилизуемых жидких .средах.Целью изобретения является уменьшение степени химических превращений путем сокращения времени воздействия ультразвуком на среду вкавитационном режиме.Указанная цель достигается тем,что согласно способу снижения микробной контаминации жидких средвоздействием ультразвука воздействие осуществляют в две стадии синтервалом между ними 5-15 мин, причем на первой стадии используютультразвук с частотой 500-5000 кГц 35и интенсивностью 0,1 - 0,5 Вт/смв течение 5-15 мин, а на второйстадии - с частотой 20-500 кГц иинтенсивностью не менее 1 Втссм/ 2в течение времени, необходимого4 Одля получения заданной степени контаминации.Минимальное время первой стадииобусловлено необходимостью нанесения обратимых повреждений микроор- ф 5ганизмом, увеличение времени свыше указанного максимального не влияет на конечный результат.Минимальное время интерваламежду стадиями обусловлено необхо Одимостью включения репарационныхсистем микроорганизмов, максималь -ное время интервала определяетсяэнергетическими ресурсами микроорганизмов, расходуемыми при функ- Ыционировании этих систем.Первая стадия обработки не приводит к изменению микробной конта 04 3минации. Длительность второй стадииопределяется достижением заданнойстепени контаминации.П р н м е р, Определение времени обработки среды в кавитационном режиме, требуемого для снижения микробной контаминации на порядок).Берут 35 мл физиологическогораствора (0,9%-ный раствор ИаС 1 вдистиллированной воде), предварительно контаминированного чистойкультурой микроорганизмов Е. соВ 1штамм К 12 с концентрацией 10микроорганизмов в 1 мл раствора.Делают контрольный посев на чашкиПетри с питательной средой, 10 млраствора наливают в реакционныйсосуд, который помещают в термостатированную ультразвуковую установку. Проводят первую стадию обработки в режиме: частота 800 кГц, интенсивность 0,3 Вт/см , время15 мин. Делают посев на чашки Петри с питательной средой. После интервала продолжительностью 10 минделают посев на чашки Петри. Берут10 мл раствора, наливают в реакционньй сосуд, помещают в термостатированную ультразвуковую установку,проводят первую стадию обработкив указанном режиме, делают интервал продолжительностью 10 мин, после чего проводят вторую стадию обработки в известном режиме: частота 20 кГц, интенсивность 1 Вт/смЧерез каждые 2 мин берут пробу иделают посев на чашки Петри с питательной средой. Через 10 мин обработ.ку заканчивают и делают посев начашки Петри с питательной средой.Берут 10 мл раствора, наливают вреакционный сосуд, помещают в термостатированную ультразвуковую установку и производят обработку визвестном режиме; частота 20 кГц,интенсивность 1 Вт/см. Через каждые5 мин берут пробу и делают посевна чашки Петри с питательной средой.Через 20 мин обработку заканчиваюти проводят посев на чашки Петрис питательной средой, Все чашкипомещают в термостат и выдерживают24 ч при 36,6 С. Производят подсчет числа выросших колоний.Концентрация микроорганизмовпо предлагаемому и известному спо-.собам представлены в табл. 1 и 2соответственно,1144704 4Таблица 1 Первая ста- дия Контроль Интервал 11 1+О, 1)10 10 ч 10 1 04 30 Т а.блица 3 Время воздействия кавитационным ультразвуком, требуемое для снижения микробной контаминациив 10 раз, мин Тип микроорганизмов1 3 ф Известный способ . Предлагаемый способ Е. соИВ. вцЬСИв 10 12 60 вС. варгойьсцв 20 По полученным результатам определяют время обработки в кавитационном режиме, требуемое для снижения,микробной контаминации на порядок 1 , которое в данном случае составляет: в предлагаемом способе м(п 1 2 мин, в известном способе Е 23 С 1 д(и 1 10 минДля сравнения эффективности предлагаемого способа с известным проводилась обработка физиологического раствора, предварительно контаминированного культурами различ- ,40 Продолжительность 2-й стадии,2 4 6 8 10 ных видов микроорганизмов Е. со 2, В. вцЬ 111 в, Я. варгоГ 111 сцв.Дополнительно было проведено сравнение зффективности.предлагаемого способа с известным для чистой культуры БСар 11 у ососсцв ацгецв, а также для микрофлоры воздуха на физиологическом растворе, которая была получена в результате суточного выстаивания открытого физраствора.В табл, 3 приведены результаты сравнения эффективности предлагаемого способа и известного 23 для различных микроорганизмов.1144704 Составитель Е. КпьинТехред Ж.Кастелевич Корректор И. Шекмар Редактор Н. Швыдкая1 Заказ 1018/4 Тираж Ггг Подписное ВНИИНИ Государственного комитета СССР ио делам изобретений и открытий 113035Москва, Ж, Раушская наб., д. 4/5.Нзобретение позволяет получить заданную степень контаминации жидких сред, сократив в несколько раз время воздействия ультразвука на среду в кавитационном режиме, прнэтом в стерилизуемой среде в меньшей степени происходят нежелательные химические превращения,