Способ определения 1, 3-диметилксантина

СОЮЗ СОВЕТСКИХСОЦИАЛИСТИЧЕСНИХРЕСПУБЛИН391 ( 144 ОЗВ6 01 Я 21 Л 83)у ГОСУДАРСТВЕННЫЙ НОМИТЕТ СССР 10 ДЕЛАМ ИЗОБРЕТЕНИЙ И ОТНРЫТИ(71) Витебский государственный медицинский институт(56) 1. Коренман И,И. фотаметрический анализ, Методы определения органических соединений. М., "Химия",1970, с, 60-61,2. Хейдоров В.П., Рашкован Б.А.Фотозлектроколориметрическое определение теофиллина и зуфиллина в лекарственных смесях. - фармация,вып, 6, 1973, с. 85,3. Хейдеров В,П. Использованиеиндофеноловой реакции для определения теофиллина в присутствии пуриновых оснований. - В сб.: МатериалыВсесоюзного съезда фармацевтов,1974, Рига, 1974, с, 54 (прототип).(54) (57) СПОСОБ ОПРЕДЕЛЕНИЯ 1,3-ДИИКТИЛКСАНТИНА путем последовательнойобработки анализируемой пробы раство.рами окислителя и оксизамещенногобензольного ряда с последующим фотометрированием полученного окрашенного раствора, о т л и ч а ю щ и й с ятем, что, с целью повышения селекте.ности и чувствительностиспособа исокращения времени оиредепения, вкачестве окислителя используют раствор хлорамина в присутствии солянойкислоты, а в качестве оксизамещенного бензольного ряда - щелочнойраствор 2-изопропил-метил-оксибензола.1 11440Изобретение относится к аналитической химии органических соединений, а именно к способам количественного определения 1,3-диметилксантина (теофиллина)5Известен способ количественногоопределения 1,3-диметилксантина путем обработки анализируемой пробыраствором едкого кали при 100 С споследующим добавлением к полученному при этом раствору 11-нитроанилинав присутствии ледяной уксусной кислоты с получением окрашенного вкрасный цвет раствора Я ,Недостатки способа состоят внизкой чувствительности (открываемыйминимум 10 мкг) и низкой селективности (определению мешают другиепроизводные пурина).Известен Фотометрический способопределения теофиллина путем обработки анализируемой пробы гипохлоритом натрия в среде соляной кислоты, затем раствором фенола с последующим фотометрированием полученногоокрашенного раствора 2 .Недостатками способа являютсянизкая селективность, так как определению мешают другие производные пурина (кофеин, теобромин, дипрофиллини др.), барбитураты и другие азотсодержащие вещества, а также длительность (время определения 30-40 мин).Наиболее близким по техническойсущности и достигаемому результатук предлагаемому является способ, за 35ключающийся в последовательной обработке анализируемой пробы гипохлори-фтом натрия в среде фосфатно-боратно 40го буферного раствора и затем раствором Фенола при 50-60 С в течение15-20 мин с последующим фотометрированием полученного окрашенного раствора при 630 нм 3 .Недостатками известного способа45являются низкая чувствительность(0,6 мкг/мл), невысокая селективность (определению мешают барбитураты, бемегрид, бромизовал, карбромал,калия оротат, метилурацил, пентоксил,50тимин, цитозин и др.), а также дли.тельность определения (25 мин),Цель изобретения - повышение селективности и чувствительности способа и сокращение .времени определе ния.Поставленная цель достигаетсятем, что согласно способу, заключающемуся в последовательной обработкеанализируемой пробы растворами окислителя и оксизамещенного бенэольного ряда с последующим Фотометри"рованием полученного окрашенного раствора, в качестве окислителя используют раствор хлорамина в присутствиисоляной кислоты, а в качестве оксизамещенного бензольного ряда - щелочной раствор 2-изопропил-метил-оксибензола.Чувствительность предлагаемогоспособа на теофиллин составляет0,1 мкг/мл.Способ является избирательным,так как количественное определениетеофиллина возможно не только в присутствии кофеина, кофеина-бензоатанатрия, теобромина, дипрофиллина,но и в присутствии барбитуратов (барбамил, барбитал, барбиталнатрий,гексенал, гексабарбитал, Фенобарбитал), бемегрида, бромизовала, карбромала, калия оротата, метилурацила, пентоксила, тимина, циозина.идрВремя определения 17 мин,П р и м е р. Готовят раствор10 мг медицинского препарата в 100 млдистиллированной воды. К пробе0,5 мл полученного раствора прибав-.ляют 04 мл 0,1 н. соляной кислоты,доливают до 6 мл дистиллированнойводы, затем 3 мл 107-ного растворахлорамина Б и перемешивают. Через2-3 мин прибавляют 1 мл 0,17.-ногораствора 2-изопропил-метилоксибензола в 157-ном растворе гидроксида натрия. Смесь перемешивают ипомещают в водяную баню на 15 минопри 60 С. Окрашенные растворы охлаждают и измеряют оптическую плотностьна спектрофотометре при 469 нм или нафотоэлектроколориметре, например,ФЭКМ (светофильтр Р 4) относительно раствора сравнения, не содержащего теофиллина. Количество теофиллинав растворе находят по калибровочномуграфику, Растворы для расчета готовят аналогично с содержанием теофиллина от 10 до 80 мкг в аликвотнойчасти стандартного образца. В указанных пределах концентраций теофиллинасохраняется прямолинейная зависимость оптической плотности. Способ позволяет определять микрограммовые количества теофиллина в анализируемой пробе, а также в смеТаблица 1 Введено, мкг, Определено, мкг,теофиллина теофиллина Иетрологическая характеристика т Х ото 0,89 2,97 0,28 29,95 30,5 30,0 29,6 30,0 29,7 50,2 1,77 0,89 50,25 0,28 50,0 50,5 50,6 0,95 1,35 0,30 70,5 70,38 70,0 69,5 70,7 70,8 П р и м е ч а н и е. Х - средний результат определения; Я- - стандартноеотклонение среднего арифметического; Г 0 з - точностьопределения; Е,я - относительная дисперсия (прь сдля вероятности 957). 3 114403 сях без предварительного отделения сопутствующих компонентов.В табл. 1 приведены результаты анализа растворов теофиллина предла-: гаемым способом и статистическая обработка полученных данных. Метрологическая характеристика указывает на хорошую воспроизводимость и точность результатов, 10 В табл.2 представлены данные овлиянии концентрации 2-изопропил-метил-оксибензола и щелочи нарезультаты фотометрического опреде- ц 8 апения 1,3-диметилксантина (теофилль на).Из данных табл. 2 видно, что кон центрации растворов 2-.изопропил- метил-оксибензола в пределах 0,06- 0,137 щелочи в пределах 10-243 яв- ляются оптимальными, обеспечивают стабильность результатов и максимальный выход окрашенных продуктов реакции.Таким образом, из приведенных данных видно, что предлагаемый способ является более селективным и чувствительным, чем известный. Время анализа сокращено на ЗОХ.1144038 Таблица 2 Влияние концентрации щелочи 0,40 0,25 0,40 0,03 0,41 0,45 0,44 0,04 0,46 0,49 0,06 0,47 0,49 0,08 0,48 0,49 0,10 0,49 0,49 0,12 10 0,49 0,49 12 0,13 0,49 0,48 0,16 0,46 0,49 0,20 0,49 20 0,49 24 0,45 га Составитель В. Шкилькова Редактор В, Петраш ТехредМ.Гергель КорректорВ. ГирнякЗаказ 897/36 Тираж 897 ПодписноеВНИИПИ Государственного комитета СССРпо делам изобретений и открытий113035, Москва, Ж,.Раушская наб., д, 4/5 филиал ПЛП "Патент", г. Ужгород, ул, Проектная, 4 Влияние концентрации 2-изопропилметил-оксибензола Концентрация раство- Оптическая плотров, Х ность растворов Концентрация раство" Оптическая плотров, 7. ность растворов