Способ диагностики лекарственной аллергии

СОЮЗ СОВЕТСКИХСОЦИАЛИСТИЧЕСКИХРЕСПУБЛИН за) А 61 В 10/00 ОПИСАНИЕ ИЗОБРЕТЕНИЙК А ВТОРСКОМЪ( СВИДЕТЕЛЬСТВУ ГОСУДАРСТВЕННЫЙ КОМИТЕТ СССРПО ДЕЛАМ ИЗОБРЕТЕНИЙ И ОТКРЫТИЙ(71) Харьковский научно-исследовательский институт дерматологии и венерологии, Харьковский ордена Ленина физико-технический институт АН УССР и Московская ордена Трудового Красного Знамени ветеринарная академия им. К. И. СкрябинаЪ (53) 616.07 (088.8)(56) 1. Авторское свидетельство СССР660668, кл. А 61 В 10/00, 1979.2. Авторское свидетельство СССР833209, кл. б 01 М 33/16, 1981.3. Зелинский Ю. Г., Куликова Л, А. Хемилюминесценция сыворотки крови в диагностике лекарственной аллергии. Проблемы туберкулеза, 1978,5 (прототип). ЯО 1120967 А(54) (57) СПОСОБ ДИАГНОСТИКИ ЛЕКАРСТВЕННОЙ АЛЛЕРГИИ путем исследования биохемилюминесценции сыворотки крови, отличающийся тем, что, с целью повышения точности способа, к опытной пробе добавляют испытуемый аллерген, инкубируют при физиологических условиях, далее определяют интенсивность спонтанного сверхслабого свечения и после добавления перекиси водорода - максимум интенсивности сверхслабого свечения, а также в течение 4,5 - 5 мин - светосумму и при изменении этих показателей на 40 в 30 после индуцирования перекисью по сравнению с контролем диагностируют лекарственную аллергию.Изобретение относится к медицине, в частности к диагностике лекарственных аллергических реакций.Известен способ диагностики лекарствен. ной аллергии, основанный на данных аллергологического анамнеза, клинических проявлениях и течении заболевания,Однако распознать лекарственную аллер. гию при ее даже типичной клинической картине и характерном аллергологическом анамнезе сложно, несмотря на то, что подтверждением диагноза служит сравнительно быстрое исчезновение клинических проявлений после отмены медикаментов, подозре вавшихся в развитии аллергии, Основываясь только на клинике и течении заболевания, диагноз лекарственной аллергии можно поставить не сразу при осмотре больного, а в процессе наблюдения за ним, что создает определенные трудности, особенно на поликлинических приемах, когда требуется установить диагноз в течение короткого промежутка времени и срочно назначить больному лечение, которое различно при лекарственной аллергии, протекающей по типу любого заболевания (различные дерматозы, поражения дыхательной, сердечно-сосудистой системы, желудочно- кишечного тракта и т. д.) и аналогичной заболеваниям нелекарственного генеза. Кроме того, этот способ не позволяет выявить медикаменты (при одновременном употреблении более двух лекарственных пре паратов), виновные в развитии аллергической реакции, т. е. установить этиологический диагноз лекарственной аллергии и тем самым определить дальнейшую тактику терапии больного. Особенно большие диагностические трудности возникают на ранних стадиях раз вития лекарственной аллергии из-за разнообразных и мало специфичных симптомов (недомогание, субфибрилитет неясной этиологии, необъяснимое течение основного заболевания, на фоне которого развивается лекарственная аллергия и т. д,). Эти же трудности имеют место и при диагностике лекарственной аллергии в анамнезе, когда у больных, перенесших лекарственную аллергию на какой-либо медикамент или группу медикаментов, при отсутствии клинических проявлений ее в момент обследования, имеется боязнь приема любого лекарственного препарата по поводу соматической патологии даже по жизненным показаниям,Еще более сложна диагностика лекарственной аллергии, протекающей с кожными проявлениями, в стадии полного развития лекарственных дерматозов, клиническая картина которых может напоминать почти все известные кожные заболевания, например, крапивницу и отек Квинке, экзему, мно 5 10 15 20 25 Зо 35 40 45 50 55 гоформную экссудативную эритему, дерматит Дюринга, пузырчатку, красную волчанку, дерматомиозит, ретикулез и т. д,Нередки диагностические ошибки при развитии лекарственной аллергии на фоне течения хронических дерматозов (экзема, пузырчатка, псориаз, красная волчанка и т. д.), когда только по клинике и аллергологическому анамнезу невозможно отдифференцировать лекарственное осложнение от очередного рецидива заболевания. Дальнейший же прием медикаментов при уже развившейся, но не распознанной лекарственной аллергии, приводит к тяжелым последствиям, вплоть до летального исхода.Известен способ лабораторной диагностики лекарственной аллергии. Это специфический иммунологический метод, использующийся в этиологической диагностике (тест лимфобластической трансформации, ингибиция миграции лейкоцитов, показатель повреждаемости нейтрофилов, тест Шелли, дегрануляция тучных клеток соединительной ткани, реакции агломерации и альтерации лейкоцитов, тест специфического подавления ретракции кровяного сгустка, реакция микропреципитации Уанье, тромбоцитопенический тест, реакция пассивной гемагглютинации и т. д.) 1. Известен способ определения непереносимости к нестероидным препаратам путем исследования плазмы венозной крови больного, которую инкубируют в течение 20 - 40 мин с равными количествами исследуемого препарата и физиологического раствора при 15 - 38 С, определяют содержание простогландинов серии Е и К при повышении которых по сравнению с исходным диагносцируют эту непереносимость 2.Однако почти все указанные тесты трудоемки, требуют продолжительного времени для постановки (например, тест лимфобластической трансформации - 3 - 5 сут),стерильных условий, нередко дефицитных реактивов (фитгемагглютинин, порошкообразный гепарин, фиколл и т. д.), оборудования (люминесцентный микроскоп для реакции альтерации лейкоцитов), вивария (тест Шелли, дегрануляция тучных клеток соединительной ткани и т. д.). Поэтому специфические им му но-биохимические методы мало приемлемы для экспресс-диагностики лекарственной аллергии в широкой клинической практике, тем более в поликлинических условиях, при массовых обследованиях лиц, занятых в производстве лекарственных препаратов, медицинских работников, контактирующих с лекарственными препаратами и т.д.Известны провокационные пробы (кожные, подъязычные и т. д.) в диагностике лекарственной аллергии, от которых, однако, отказывается большинство исследователей из-за их опасности для жизни больного (развитие анафилактического шока даже на ингаляцию лекарства) и большой частоты ложноположительных и ложноотрицательных результатов.Наиболее близким по технической сущности к предлагаемому является способ диагностики лекарственной аллергии путем биофизического анализа, основанный на измерении сверхслабого свечения сыворотки кро. ви больных туберкулезом легких с явлениями непереносимости у них лекарственных препаратов с добавлением и без добавления последних в исследуемом образце сыворотки крови. По разности интенсивности свечения в первом и втором экспериментах судят об аллергенности препарата, находя повышение уровня сверхслабого свечения сыворотки крови у больных туберкулезом легких с лекарственной аллергией 3.Однако и этот способ не. позволяет точно диагностировать лекарственную аллергию. Это связано с тем, что при данном способе диагностики регистрация сверхслабого свечения затруднена слабой интенсивностью свечения сыворотки крови, низ ким коэффициентом отношения сигнала к шуму, что приводит к необходимости на бора большой статистики для выявления отличий. Не исключена недостоверность отдельных измерений в малых сериях. Кроме того, обследование данным способом больных туберкулезом легких с лекарственной аллергией не позволяет делать четкие и категоричные выводы, как изменяется уровень сверхслабого свечения сыворотки крови при лекарственной аллергии и следует ли расценивать повышение интенсивности свечения сыворотки крови за счет процессов, связанных с повышенной чувствительностью к лекарствам или за счет воспалительного легочного процесса. Цель изобретения - повышение точности диагностики лекарственной аллергии.Поставленная цель достигается тем, что согласно способу диагностики лекарственной аллергии путем исследования биохемилюминесценции сыворотки крови, к опытной пробе добавляют испытуемый аллерген, инкубируют при физиологических условиях, далее определяют интенсивность спонтанного сверхслабого свечения и после добавления перекиси водорода - максимум интенсивности сверхслабого свечения, а также в течение 4,5 - 5 мин - светосумму и при изменении этих показателей на 40 - 300 О/о после индуцирования перекисью по сравнению с контролем диагностируют лекарственную аллергию.Способ осуществляют следующим об. разом.Используют сыворотку крови, полученную известным способом. Готовят несколько 5 О 15 20 25 30 35 40 45 50 55 ее образцов, в первый из которых добавляют физиологический раствор (контроль), а в остальные (количество их может быть различным в каждом конкретном случае) - лекарственные аллергены в концентрации 250 мкг/л (опыт), подозревающиеся в развитии аллергического состояния в равных количествах (по 0,5 м). Смесь выдерживают в термостате при 37 С 15 мин, затем ставят кювету вначале с контрольным, а потом опытными растворами в теиновую термостатированную камеру торцом на ФЭУ, Измеряют интенсивность спонтанного свечения, после чего добавляют 0,5 мл Зо/о-ного раствора перекиси водорода, предварительно нагретой до температуры объекта. Вспышку хемилюминесценции регистрируют на автоматическом потенциометре ЭПР. Определяют максимум интенсивности свечения, а также по графику свечения - светосумму, как площадь под кривой в течение 5 мин от момента добавления перекиси водорода. Находят разницу между контрольными и опытными образцами сыворотки крови, а также разницу этих показателей у исследуемого и здоровых лиц,Пример 1. Больная К. 54 лет, страдает около 4 х лет, когда впервые на фоне лечения нарушений мозгового кровообращения, появились петехиальные высыпания в области туловища, плеч, предплечий. Из анемнеза удалось установить, что кожный процесс периодически регрессирует и вновь обостряется после очередного приема медикаментов (каких точно больна я не значет). В прошлом перенесла энцефалит, гепатохолецистит, колитПоследнее обостроение 1 - 2 нед назад после приема медикаментов по поводу соматической патологии. При обследовании кожный процесс носит диффузный характер, захватывая туловище и конечности с мелкой петихиальной сыпью. У больной была заподозрена лекарственная аллергия, протекающая по типу геморрагич еского васкулита. Обследована по иммунологическим методам. В частности, больной была поставлена реакция агломерации лейкоцитов, которая не выявила сенсибилизации к подозревающимся медикаментам. Обследована по предлагаемому способу. Максимум. интенсивности индуцированного свечения составлял с новокаином 234 О/, от контрольного уровня (образец сыворотки без аллергена) и 9 О/о с сульфадимезином, светосумма соответственно 233 О/о и 24 О/,.Отклонение максимума интенсивности свечения сыворотки крови больной с новокаином от уровня интенсивности свечения сыворотки крови, индуцированной перекисью водорода здоровых лиц (доноров) с медикаментами было равно 63%, отклонение светосуммы 67 О/о. Поставлен диагноз ле1120967 Составитель Н. Хрусталева Редактор И. Касарда Техред И. Верес Корректор О. Луговая Заказ 7602/3 Тираж 687 Подписное ВНИИПИ Государственного комитета СССР по делам изобретений и открытий 113035, Москва, Ж - 35, Раушская наб д. 4/5 Филиал ППП Патент, г. Ужгород, ул. Проектная, 4карственной аллергии по типу геморрагического васкулита на новокаин, что позволило внести коррекцию в терапию и предотвратить нежелательные для больной последствия введения новокаина.Пример 2, Больная В 38 лет, страдает непереносимостью лекарств с 1978 г., когда стала появляться уртикарная сыпь и зуд на фоне лечения сахарного диабета и вегетососудистой дистонии. В анамнезе сахарный диабет с 1955 г, болезнь Боткина, гастрит, колит, хр. ларингит. Последний рецидив кожного процесса - 2 дня назад на фоне приема В-инсулина, витаминов группы В, АТФ. Поставлена реакция агломерации лейкоцитов РАЛ с лекарственными аллергенами, которые по анамнезу предполагались виновниками развития крапивницы лекарственного генеза. РАЛ выявила сенсибилизацию к В-инсулину и Суинсулину. Больная обследована предлагаемым способом. Интенсивность максимума свечения составляла с В-инсулином 300% от контрольного уровня, с Су-инсулином 390%, светосумма соответственно 333% и 360%. Отклонение максимума интенсивности свечения сыворотки крови больной с В-инсулином от уровня интенсивности свечения сыворотки здоровых лиц с медикаментами равно 64%, с Су-инсулином 53%, отклонение светосуммы соответственно 75% и 61%,Поставлен диагноз поливалентной лекарственной аллергии по типу крапивницы на В-инсулин и Су-инсулин. Это позволило больной продолжить лечение вита минами группы В, АТФ и заменить введение В- инсулина на другой вид инсулина, необходи мый больной по жизненным показателям.Предлагаемым способом было обследовано 19 доноров и 42 больных лекарственной аллергией.У здоровых лиц в образцах сывороткис добавлением лекарственных препаратов изменение максимума интенсивности сверх- слабого свечения и светосуммы относительно нормы (образцов сыворотки без добавления лекарственных препаратов) не превышает 25%.У больных лекарственной аллергией этоизменение интенсивности свечения в образцах сыворотки крови с добавлением неспецифических лекарственных препаратов (не вызывающих лекарственную аллергию у данного больного) также не превышает 20 - 35%. В образцах же сыворотки крови с добавлением специфических лекарственных аллергенов, вызывающих у больного аллер гическую реакцию, изменение максимумаинтенсивного свечения и светосуммы относительно нормы на 40% и более.Предлагаемый способ прост в осуществ.ленин, существенно улучшает диагностику, обеспечивает высокую точность и значительную экономию во времени при постановке диагноза по сравнению с известными способами иммунологического и биохимического анализа, а также по сравнению с способом-прототипом. Результаты клиничес- ЗО кого испытания способа диагностики лекарственной аллергии говорят о высокой практической ценности предлагаемого способа, что позволяет рекомендовать его для широкого внедрения в практическое здравоохранение, как экспресс-метода диагностики.