Способ интенсификации энергетического обмена

.801090405 А 61, К 31/19 ОПИСАНИЕ ИЗОБРЕТЕНИЯ 13 3 ЦЩД 1 г г АВТОРСКОМ 17А Косенко, явцев и щ ни зи во- ."В 1 о 1. 162 1980 ь ротоГОСУДАРСТВЕННЫЙ НОМИТЕТ СССРПО ДЕЛАМ ИЗОБРЕТЕНИЙ И ОТНРЫТИЙ(71) Институт биологическАН СССР) (57) СПОСОБ ИНТЕНСИФИКАЦИИ ЭНЕРИЧЕСКОГО ОБМЕНА, включающий ввеие животным биостимулятора энергееского обмена, о т л и ч а ю - й с я тем, что, с целью повьппеконцентрации адениннуклеотидов кани, в качестве биостимулятора рганизм животного внутрибрюшинно дят янтарнокислый аммоний в дозе 50 мг на 1 мг живой массы в сутки.Изобретение относится к медико - биологическим исследованиям и предназначено для интенсификации энерго- обмена в печени старых млекопитающихся, 5Известен способ интенсификацииэнергетического обмена в мышечномэкстракте, включающий введение дезоксиглюкозы и непрерывное измерениеконцентрации адениннуклеотидов, При 1 Оэтом в процессе реакции происходитснижение содержания адениннуклеотидов с последующим самопроизвольнымего восстановлением 1 3Недостатком способа является то, 15что эксперимент проводится на экстракте, приготовленном из вьделенногооргана животного. Кроме того, токсичность дезоксиглюкозы, приводит кповреждению тканевых клеток, гоНаиболее близким к изобретениюпо технической сущности и достигаемому результату является способ интенсификации энергетического обмена,заключающийся в повышении концентрации адениннуклеотидов в сердце молодых животных с помощью рибозы. Способвключает в себя следующие операции;введение анестезированным животнымизопротеренола для предварительного ЗОснижения тканевой концентрации адениннуклеотидов, внутривенное введениераствора рибозы (1,2 г на крысу массой 250 г), приводящее к повышениюконцентрации адениннуклеотидов допервоначального уровня, последующеевьделение тканевого экстракта из исследуемого органа и измерение концентрации адениннуклеотидов в экстракте ферментативным методом Г 23.Однако способ характеризуетсянедостаточно высокой достигаемостьюуровня энергетического обмена, атакже необходимостью анестезирования животного во время длительноговведения рибозы (в течение 24 ч),травмирующего животное в течениеэксперимента, и очень большая действующая доза рибозы, а также кратковременное ее действие (4 ч).Более того, для предварительногоснижения концентрации адениннуклеотидов в исследуемых органах используют органические соединения синтетического происхождения, не имеющиеся в организме,Целью изобретения является повышение концентрации адениниуклеотидов вткани,Поставленная цель достигаетсятем, что согласно способу интенсификации энергетического обмена в качестве биостимулятора в организм животного внутрибрюшинно вводят янтарнокислый аммоний в дозе 10-50 мг на1 кг живой массы в сутки,В предлагаемых дозах янтарнокислый аммоний не оказывает влияние нафизиологическое состояние и поведение животных в результате того, чтоосновная часть вводимой дозы препарата выводится через почечные канал ьцы.На чертеже представлены концентрации адениннуклеотидов в печени крысы: а-в печени молодой крысы; б - впечени старой крысы; в - в печенистарой крысы через сутки после6-дневного сеанса введения физиологического раствора; г - в печени старой крысы через сутки после 6-дневного сеанса введения янтарнокислогоаммония. По оси ординат - концентрации адениннуклеотидов в наномоль на1 г ткани. Вертикальная черта надкаждым столбиком - среднеквадратичная ошибка среднего значения (для14-26 животных в каждой группе), Каквидно из фиг. 1, янтарнокислый аммоний увеличивает суммарное содержаниеадениннуклеотидов у старых крыс доуровня у молодых животных.П р и м е р 1. Самцам крыс линииВистар возрастом 2 года ежедневнов течение 6 дней вводили внутрибрюшинно раствор янтарнокислого аммонияв дозе 10 мг на 1 кг живой массы,растворенного в О, 25 мл воды, на животное. Через 24 ч после последнеговведения препарата животных забивали,быстро удаляли переднюю долю печении сдавливали ручным прессом, предва -рительно охлажденным в жидком азоте,Залитую жидким азотом ткань измельчали в ступке до порошка, заливали7 объемами охлажденной 8%-ной хлорной кислоты в 40%-ном этаноле иэкстрагировали 15 мин при -10 фС,Смесь центрифугировали 20 мин при3000 и -10 для удаления осадка.Затемэкстракт нейтрализовали едкимкалием и измеряли концентрации индивидуальных адениннуклеотидов в экстракте ферментативным методом.Для оценки действия препаратасравнивали содержание адениннуклеотидов в печени инъецированных иинтактных старых животных. В качест1090405 Номер опьгга Группаживотных Обработкаживотных Количествоживотных вгруппе Доза 26 Молодые, 3-4 мес Старые, 2 года Старые, 2 года Нет 16 Нет 0,25 мл 14 Внутрибрюшинно,физраствор,6 дней 10 мг на 1 кг 2 Старые, 2 года Внутрибрюшинно,янтарнокислыйаммоний,6 дней 20 мг на 1 кг 2 50 мг на 1 кг 16 ве контроля испольэовали Физиологическийй раствор. В параллельной серии опьггов животным внутрибрюшинно вводили 0,25 мл Физраствора. Полученные данные представлены в таблице (опыт 11 4). Вводимый янтарнокислый аммоний увеличивает содержание адениннуклеотидов в печени 2-х летних крыс на 7 Е причем различие между контролем и10 опытом статистически недостоверно.П р и м е р 2. Условия выполнения способа те же, что и в примере 1, но вводимая доза янтарнокислого аммония 20 мг на 1 кг живой массы. Полученные данные представлены в таблице15 (опыт Ф 5). Как видно из таблицы, янтарнокислый аммоний увеличивает суммарное содержание адениннуклеотидов на 277, т.е. до уровня у молодых животных. Таким образом, янтарнокислый аммоний действует как биостимулятор энергетического обмена.П р и м е р 3. Условия выполнения способа те же, что и в примере 1,25 только вводимая доза янтарнокислого 5 Старые, 2 года То же 6 Старые, 2 года То же аммония 50 мг на 1 кг живой мас сы,Данные представлены в таблице ГопьгЯф Ь) и указывают на то, что янтарнокислый аммоний увеличивает уровеньадениннуклеотндов на 257, приближаяего к уровню молодых животных. Использование предлагаемого способа по сравнению с известными позволяет повысить интенсивность энергетического обмена в печени старых животных, приближая его к уровню молодых животных, путем повышения уровня адениннуклеотидов; использовать в малых дозах нетоксичное и дешевое вещество - янтарнокислый аммоний природного происхождения, в то время как в известных способах используются дорогостоящие импортные препараты; вводить препарат неанестезированным животным в течение 1-5 ч в отличие от прототипа, в котором введение осуществляют в течение 24 ч.Данные, характеризующие предлагаемый способ, сведены в таблицу.1090405 Продолжение таблицы Содержание в печени мкмоль/г Номер опыта Сумма АН АТФ 1,88+0, 14 0,96+0,06 0,30+0, 03 3, 14+0, 22 1,46+0,03 0,62+0,02 0,29+0,02 2,37+0,04 1,61+0, 03 0,60+0,02 О, 20+0, 01 2,40+0, 02 1 ф 63+Оэ 20 Оэ 65+Ов 19 Оэ 25+Оэ 10 2 ъ 53+Ою 20 1,85+0,30 0,82+0,15 0,31+0,15 2,98+0,07 1,74+0,08 0,86+0,03 0,31+0,01 2,91+0,12 Составитель Б.КузьмичевРедактор Г.Гербер Техред Л.КоцюбнякКорректор Заказ 3548 Тираж 688 ПодписноеВНИИПИ Государственного комитета СССРпо делам изобретений и открытий1 13035, Москва, Ж, Раушская наб д. 4/5 филиал ППП "Патент", г. Ужгород, ул. Проектная, 4