Способ получения водорастворимого линейного полисахарида

ОП ИСАНИЕ ИЗОБРЕТЕНИЯ К АВТОРСКОМУ СВИДЕТЕЛЬСТВУ оц 981322 Союз СоветскнхСфцкалнсткческкхРеснублккДата опубликования описания 15, 12.82 Л. С. Гальбрайх, Л. И. Барсова, Г. А. Вих Р, М. Норейка и А. И. Шер . ь., Ф Московский ордена Трудового Красного Зйаменн текстильный институт им. А. Н. Косыгина .,:..(54) СПССОБ ПОЛУЧЕНИЯ ВОДОРАСТВОРИМОГО ЛИНЕЙНОГО ПОЛИСАХАРИЦАЦель изобретения - увеличение антикоагулянтной активности водорастворимыхлинейных полисахаридов и упрощение технологического процесса,Поставленная цель достигается тем,что в способе получения водорастворимого линейного полисахарица обладающегоантикоагулянтной активностью; обработкой цолисахарида сульфатирующим агентомв диметилформамиде, в качестве полиса.харида используют карбоксиметилцеллюлозу, в качестве сульфатируюшего агентахлорсульфоновую кислоту, н обработку проводят 0,5 - 1,0 час 16,0 - 29,4%-нымраствором хлорсульфоновой кислоты в диметилформамиде при соотношении растворан карбоксиметилцеллюлозы 15,5-18,8; 1при 20 - 255 С,1Изобретение относится к способам получения водорастворимых линейных полисахариаов с функциональными группамикислотного характера, обладающих биологической активностью которые могут бытьиспользованы в биолсв ии и медицине.Известен способ сульфатнрования карбоксиметилцеллюлозы (КМ Ц) хлорсульфоновой кислотой (ХСК) в среде пиридина,который позволяет получать высокозамещениый (11,0 - 14;5% серы), но сильнодекструктированный сульфат карбоксиметилцеллюлозы с низкой активностью (2025 ед/мг)11 .Наиболее близкям к изобретению техняческим решением по достигаемому эф-,фекту является способ сульфатированияхитозана коьтплексом триоксиде серы сдиметилфомамидом. Этот способ позволяетполучить высокоактивные (50 - 56 ед/мг) хвпрепараты 12 .Однако в этом случае для получениясульфатирующего комплексе исполь обуетсягазообразное и неустойчивое при хранении 2вещество - триоксид серы, что значительно усложняет технологический процесс. Недостатком способа является также большая продолжительность процесса - до 12 часов.3 98 13П р и м е р 1. Переосаждение и ииклюдировение КМЦ. 10 г КМЕТЫ раств.орвот в 100 мл 10%-ного раствора ецкого иатрв. Полученный раствор фильтруют, и натриевую соль кербоксиметилцеллюлозы (Иа -КМБ) осаждают из раствора трехкратным объемом этилового спирта. Осадок промывают спиртом, спирт затем вытесняют ДМФА (5 раз по 100 мл), Инклюдированную Йд-КМП хрвнят в ДМФА. 36Сульфатирование Яс-КМЦ системой ХСК - ДМФА. 1,4 мл ХСК постепенно добавляют в реакционный сосуд к 10 мл ДМФА при перемешивании и охлаждении (0-55 С), После этого охлаждение прекрв-и щвют, и реакционную смесь перемешивают еще в течение 15 мин. Затем добавляют 5 г инклюдированной ЙО-КМЦ со степенью 5 (1 губ-КМЦ в пересчете нв сухое вещество). Реакцию проводят 16%-ным щ раствором ХСК в ДМФА из расчете 15,52 вес.ч. раствора нв 1 вес. ч,йц-КМ 11 при постоянном перемешиввнии при 2 бС в течение 40 мин. По окончании реакции к раствору при охлаждении добавляют И 20 мл воды, 20 мл 10%-ного раствора ИсОН, 2 мл насыщенного раствора, и продукт реакции осаждают в 300 мл метанола. Осадок промывают метанолом и эфиром (2 раза по 50 мл), растворяют в рр 30 мл воды и добавлением 10%-ного рвствораИООН доводят рН до 9. Полученный раствор Мб - соли сульфата КМБ (ИО- - -КМБ) диализуют против дистиллированной воды до отсутствия в дивлизаторе ионовъЯ- и 50, Затем раствор концентрируютоупариванием при 40 С в вакууме до объема 20 мл, добавляют 0,5 мл насыщенного раствора ЯССР, и осаждают продукт в 100 мл метанола, Осадок промывают.ме танолом, эфиром и высушивают в вакууме нвд Р О до постоянной массы.Получают 1,14 г продукта, содержащего 9,5% серы, с антикоагулянтной активностью 69 ед/мг. Характеристическая 4 вязкость раствора в 0,5 М растворе ИОС 8 при 20 С( )= 1,2 дл/г. 22 4Получают 1,11 г продукта, содержащего 11,4% серы с антикоегулянтной ак-,тивностью 73 ед/мг,)1 ) - 0,4 дл/г.П р и м е р 3, Последовательностьопераций аналогична описанной в примере 1. Количество реагентов: 3, 1 мл ХСК;1 г ЙО -КМБ; 14 мл ДМФА, Условияреакции: 29,4%-ный раствор ХСК в ДМФА;18,82 вес-. ч. раствора на 1 вес. ч. ИЦ 6-КМБ, температура 20 С, продолжительность сульфатироввния 50 мин, Для нейтрализации реакционной массы добавляют40 мл 10% ного раствора /й 06.Получают 1,08 г продукта, содержащего 10,0% серы с антиковгулянтной активностью 74 ед/мг, = 0,72 дл/г.Исключительно важными характеристиками биологически активных веществ, применяемых в качестве лекарственныхсредств, являются их токсичность. Оценку острой токсичности синтезированныхсульфатов карбоксиметилиеллюлозы проводят не мышах, Установлено, что полученные продукты не обладают заметнымтоксическим действием, С целью изучениястабильности раствор продукта (1 мг/мл)в дистиллированной воде подвергаютускоренному старению при 60 С в течение3 месяцев, Потеря антикоагулянтной активности в этих условиях для продукта,полученного согласно предлагаемому способу, составляет 30%, для гепариие -20%,Таким образом, согласно предлагаемому изобретению синтезированы производные линейного полисехарида, содержащиегруппы кислотного характера с антиковгулянтной активностью 69 - 74 ед/мг, необладающие острой токсичностью и постабильности приближающиеся к гепарину,Предлагаемый способ является технологически более йростым, чем про,тотип, твккак предполагает использование устойчивых, доступных реагентов й проведениепроцесса в более мягких условиях: при20 - 25 С и небольшой продолжительносОти процесса (до 1 ч), П р и м е р 2. Последовательность операций аналогична описанной в примере 1, Количества реагентов; 2,1 мл ХСК;,Я 1 г МО-КМ 11; 14 мл ДМФА Условия реакции: 21,9%-ный раствор ХСК в ДМФА; 17,04 вес, ч. раствора нв 1 вес. ч. Йб -КМБ, температура 2."РС, продолжительность сульфатирования 60 мин, Для нейтрализации реакционной массы до: бавляют 30 мл 10%-ного раствора КООН Формула изобретения Способ получения водорастворимого линейного полисахаридв, обладающего антиковгулянтной активностью, обработкой полисахврида сульфатирующим агентом в диметилформвмиде, о т л и ч а ю ш и йс ятем, что, с целью повышения антиковгуляитной активности и упрощения про-, цесса, в качестве полисахеридв используют карбоксиметилцеллюлозу, в качестве