Способ приготовления гистологическогопрепарата костной ткани

Союз СоветскккСоциаинстическккРестгублик ОП ИСАНИНАИЗЬВРЕТЕН ИЯК АВТОРСКОМУ СВИДЕТЕЛЬСТВУ и 834439Опубликовано 30.05.81. Бюллетень 20Дата опубликования описания 05,06.81 до делан изобретений к етернтий(54) СПОСОБ ПРИГОТОВЛЕНИЯ ГИСТОЛОГИЧЕСКОГО ПРЕПАРАТА КОСТНОЛ ТКАНИИзобретение относится к медицине, а именно к гистологии.Известен способ приготовления гистологического препарата костной ткани путем фиксации с последующей обработкой спиртом, декальцинацией и промывкой в проточной воде 1.Однако приготовление препарата известным способом длится до 5 с сут и полученный препарат недостаточно высокого качества, что затрудняет точность диагноза заболевания.Цель изобретения - ускорение процесса обработки и. улучшение качества препаратов.Указанная цель достигается тем, что приготавливают гистологический препарат костной ткани путем его фиксации с последующей обработкой спиртом, декальцинацией и промывкой в проточной воде, при этом костную ткань после обработки спиртом последовательно дважды фиксируют хлороформом в течение 2,5 - 3 ч,а декальцинацию ведут в 16 - 20%-ой азотной кислоте на водном растворе глицерина в течение 24-65 ч.Пример. Для обработки берут образцы биопсии костной ткани следующих видов: 2губчатая костная ткань с проросшей мяккостью и трубчатая кость. Обработку образцов проводят по предлагаемому способу и параллельно по известному для сравнения полученных результатов. Доставленные для анализа образцы костной ткани вышеперечисленных видов предварительно обмывают 96 спиртом 7 мин.Обмытые спиртом образцы костной ткани погружают в 50 мл хлороформа и выдерживают в термостате 1 ч при 45 С. Затем сливают первую порцию хлороформа и заливают образцы 50 мл свежей порцией хлороформа, снова помещают в термостат на 2 ч, выдерживая при 45 С. Обработанные образцы обмывают 10 мин спиртом и 5 мин 1 Б проточной водой, промытые образцы погружают в декальцинирующий раствор.Для декальцинации готовят следующиерастворы.Составдля губчатых костных тканей с проросшей мякотью - 16% азотной кислоты на водном растворе глицерина, пред.варительно приготовленного смешиванием 50 мл глицерина и 50 мл дистиллированной воды.834439 Таблиц а 1 Известный способ обработки костной Фиксация в 157, ном растворе формалина 120 96 120 96 148 То же в 103-ом 1008 48 48 388 Итого: 1296 3Состав2 для трубчатой костной ткани - 200/О азотной кислоты на водном растворе глицерина, предварительно приготовленного смешиванием 50 мл глицерина и 50 мл дистиллированной воды.Образцы губчатой костной ткани декальцинируют в составе1 24 ч, образцы трубчатых костей в составе2 65 ч. Окончание процесса декальцинации проверяют лезвием бритвы, путем среза ткани, затем обработанные образцы промывают проточной водой 3 ч. Из обработанного материала изготавливают гистопрепараты для диагностики,Результаты обработки костной ткани по предлагаемому и известному способам приведены в табл.и 2.Из приведенных в таблицах данных видно, что скорость обработки костной ткани Обезжиривание в 96 -омоспирте Декальцинация в 7 Е-омрастворе азотнойкислоты Промывка в проточнойводе 4по предлагаемому способу увеличивается в10 - 20 раз.Предлагаемый способ высокоэффективный, позволяет сократить сроки постановкидиагноза в 10 - 20 раз в зависимости от вида обрабатываемого материала. Время нахождения в больнице исследуемого бОльногосокращается на 2 недели, что позволяетэкономить расход средств на медицинскоеобслуживание больных. Кроме того, ускорение постановки диагноза позволяет рань 1 О ше начать лечение и предупредить развитиезаболевания операционного вмешательства,Предлагаемый способ позволяет получить гистосрезы хорошого качества, так1 как они позволяют сохранить структуру даже мягкой ткани и кровяных телец, что оченьважно в постановке точного диагноза,834439 Таблица 2 Предлагаемый способ обработки костной ткани ПредварительнаяФобмывка 96 -ымспиртом 0,16 0,09 Промывка в 96 о-омспирте 0,16 0,16 Промывка проточнойводой О,1 0,1 Декальцинация в смеси азотной кислоты и водном растворе глицеринасостав Р 1 состав У. 2 Промывка проточной водой/ 24 65 Итого: 30 т 35 71,42 Формула изобретения. Составитель С. МалютинаТехред А. Бойкас Корректор Г. НазароваТираж 907 ПодписноеВНИИПИ Государственного комитета СССРпо делам изобретений и открытий113035, Москва, Ж - 35, Раушская наб., д. 4/5Филиал ППП Патент, г. Ужгород, ул. Проектная, 4 Редактор Е, Кинив Заказ 4000/63 Одновременнаяфиксация и обезжиривание в 2-х порциях хлороформа притемпературе 45 С Способ приготовления гистологического препарата костной ткани путем его фиксации с последуюшей обработкой спиртом, декальцинацией и промывкой в проточной воде, отлича 1 ощийся тем, что, с целью ускорения процесса обработки и улучшения качества препаратов, костную ткань после обработки спиртом последовательно дважды фиксируют хлороформом в течение 2,5 - 3 ч, а декальцинацию ведут в 16 - 20%-ой азотной кислоте на водном растворе глицерина 40 в течение 24-65 ч. Источники информации,принятые во внимание при экспертизе1. Меркулов Г. А. Курс патогистологической техники. Л., Медицина, 1969,45 с. 29 - 31.