826744

СОЮЗ СОВЕТСНИХСОЦИАЛ ИСТИЧЕСНИХРЕСПУБЛИК 744 А 5/00 А 61 К 39 1 Ъ Ф уз Ч 1ИСАНИЕ ИЗОБРЕТЕН СВИДЕТЕЛЬСТВУ АВТОРСК(71) Казанский о дарственный вете им. Н.Э.Баумана (53) 616.998.1:61 рдена Ленина гос ринарный институ 1.372 (088.8-2 акривор а 0,0 0,038 Я ОСУДАРСТВЕННЫЙ НОМИТЕТ ССС О ДЕЛАМ ИЗОБРЕТЕНИЙ И ОТКРЫТ(54)(57) ВАКЦИНА ПРОТИВ ХЛАМИДИОЗАСЕЛЬСКОХОЗЯЙСТВЕННЫХ ЖИВОТНЫХ, содержащая антигенную жидкость из суспензии клеток желточного мешкакуриного эмбриона, зараженного хламидиями, о т л и ч а ю щ а я с я тем,что, с целью усиления иммуногенныхсвойств, она дополнительно содержитраствор тригидрооксиметиламинометана и тетраметилдиамина, растворамида и метилбисакриламида, раст персульфата аммония и раствор тарового альдегида при следую отношении компонентов, мл:Антигенная жидкость из20-40-ной суспензиижелточных мешков, зараженных хламидиями(0,8-ным) 31,4-ный раствор персульФата аммония 125-ный раствор глютарового альдегидадо конечной концентрции 0,05 2Для этого вакцина дополнительно содержит раствор тригидрооксиметил 25 аминометана и тетраметилдиамина, раствор акриламида и метилбисакриламида, раствор персульфата аммония и раствор глютарового альдегида при следующем соотношении компонентов,Антигенная жидкость из20-40-ной суспензиижелточных мешков, зараженных хламидиями(ЭЛД , 108-10 35Смесь растворов тригидрооксимет лламинометана (36,3-ного)с тетраметилдиамином(0,23 - ным) 1-2 40Смесь раст Во ро В акриламида , 30 - ного) сметилбнсакриламиДом(0,8 - ным)1,4-ный растворперсульфата аммония 1-225-ный раствор глютарового альдегидадо конечной;онцентрации 0,05 0,026-0,0381.Приготовление растворов. 3-4"А" - к 48 мл однонормальнагораствора соляной кислоты добавляют36,3 г тригидрооксиметиламинометан(С)1 Н(Сг)т Н(СНЗ)2, 0,23 млТЭМЭД (тетраметилэтилендиамин)н(1 тп)и доводят до 100 млстерильной дистиллированной водойс рН 8,9."С" - 30 г акриламида (СН СН СО .ги 0,8 г метитенбисаркриламида (С . СО. Ч:, Сц растворяют в стерильной дистиллированной Воде до 100 мл. Изобретение относится к области ветеринарной вирусологии, в частности к вакцинам против хламидийных инфекций сельскохозяйственных животных.Известна вакцина для специфической профилактики хламидийного энзо отического аборта овец, включающая антигенную жидкость из суспензии клеток желточного мешка куриного, эмбриона, зараженного хламидиями, В качестве инактиватора применен 10 Формалин, а в качестве адъюванта минеральное масло.Однако при вакцинировании животных вакциной, специфические антитела вырабатывают.ся в очень низких 15 титрах ( 1: 8-1: 16), вакци нированные животные не обладают иммунологической защитой при заражении на резистентность живым возбудителем хламидий,Целью изобретения является повышение иммуногенной активности вакцины и пролонгирования ее действия,Растворы "А" и "С" стабильны втечение месяца, если хранить при+5 С,1,4-ный раствор персульфата аммония, например 10 мл аммониЯ надсернокислый - (НН 4)т ,"08 - 140 мп,Рабочий раствор мертиолята готовят растворением 1 г мертиолята в100 мл дистиллированной воды.П р и м е р 1. Желточные мешкикуриных эмбрионов, зараженных возбудителем хламидийных инфекций, подвергаются определению титра возбуди"теля заражением в желточный мешок6-7 дней куриных эмбрионов. Опытным путем установлена высокая иммуногенность вакцины, приготовленнойиз инфицированных желточных мешковкуриных эмбрионов с титром хламидий ЭЛЙ(эмбрион летательных доз)10 ьЯ. дЖелточные мешки куриных эмбрионов, инфицированные хламидиями сукаэанным титром, суспендируют впределах до 20-40 на стерильномбуферном растворе Хениса, или 0,2 МФосфатном буфере, или физрастворес рН 7,6 - 7,8,Полученную взвесь отстаивают при температуре +4 фС в течение 2 ч. Надосадочнуючасть отсасывают стерильнойпипеткойи переносят в стерильную колбу.В надосадочную антигенную жидкость вводят раствор мертиолята до 0,1 и инактивируютоантиген в термостате при +37 С в течение 10-14 ч,Антиген полимеризуют путем последоВательного добавления к 80-100 объемамрастворов "А" 10-12 мл, "С" 30-40 мл,1,4-ного раствора персульфата аммония10-12 мл,25-ного раствора глютаровогоальдегида до конечной концентрации вантигенной жидкости 0,05,Смесь растворов с антигеном после тщательного смешиВания ставят в холодильник при +4+ 6 С на 16-18 ч или 2-3 ч в термоостат при +37 С.Полимеризованную вакцинную массув полиакриламидном геле перед употреблением гомогенизируют в гомогенизаторах или коллоидных мельницах(или других приспособлениях) с равнымобъемом раствора Хенкса или стерильного физиологического раствора(рН 7,2 - 7,4) до кашицеобразной консистенции, способной проходить черезинъекционную иглу,П р и м е р 2. Проводят перекрестные опыты по установлению минимальных и предельных объемных частей (в ьл ) компонентов при конструировании вакцины с последующим определением в каждом опыте иммуногенной активности полученной вакцины,С этой целью определяют объемные дозы антигенной жидкости из 20 40-ной суспензии инфицированных826744 1-2 Корректор А.Ильин Тираж 522 ПодписноеВНИИПИ Государственного комитета СССРпо делам изобретений и открытий113035, Москва, Ж, Раушская набд.4/5 Заказ 2363/2 Филиал ППП "Патент", г.ужгород, ул.Проектная,4 желточных мешков, смеси растворов"А", "С", 1,4-ного персульфата аммония с добавлением глютарового альдегида до конечной концентрации 0,05.Иммуногенную активность вакцин определяют по титру комплементсвяэывающих антител в сыворотке крови и отсутствию клинических признаков болезни вакцинированных подопытных животных (белые мыши и овцы) после эаражейия их живым возбудителем хламидий. Установлены максимальные титры антител (1:64 - 1:128) на 4-8-е сутки после иммунизации подопытных животных вакцинами, конструированными при следующем соотношении компонентов, мл: Редактор О.Юркова Техред А.Бабинец Антигенная жидкостьиз 20"40-ной суспензии желточных мешков,зараженных хламидиями(0,8-ным) 3-4 1,4-ный раствор персульфата аммония1-2 25-ный раствор глютарового альдегида до конечной концентрации 0,05 0026