Способ определения устойчивости растений к фитопатогенным поражениям

Союз СоветскихСоциалистическихРеспублик ОП ИСАНИЕИЗОБРЕТЕНИЯК АВТОРСКОМУ СВИДЕТЕЛЬСТВУ и 728783(51)М, Кл. А 01 б 7/06 с присоединением заявки РЙ Государственный камитет СССР(23) Приоритет ао делам иэееретеиий и втхрцтийОпубликовано 25.04.80. Бюллетень Рй 15 Дата опубликования описания 28,04.80(72) Авторы изобретения ф. Н. Пирназарова,ХХ. Сагдуллаев, Н. ф. Гимашева, А. И, Исмаилов и А. С. Садыков Институт биооргаиической химии АН Узбекской ССР(71) Заявитель ров и зависящих от степени устойчивостирастений к тем или иным внешним воздействиям и поражениям 2 .Однако такой способ достаточно трудоемкий, длительный и не дает точных 5данных.11 ель изобретения - повышение точности оценки устойчивости растений к патогену и ускорение определения.10Это достигается тем, что в качествебиохимического показателя используютпоказатель антиокислительной активностилипидпигментного комплекса через неделюпосле инфишрования, по сравнению с неинфицированным растением.На чертеже изображен график зависимости антиокислптельной активности,Способ осуществляется следуюшимобразом.Определяют антиокислнтельную активность липидпигментного комплекса(ЛПК), выделенного из листьев определенного яруса инфицированного растения,и сравнивают его с тем же показателем Изобретение относится к сельскому хозяйству, а именно к общим вопросам ботаники, и может быть использовано для определения устойчивости растений к фитопатогенным поражениям в селек. ционной работе.Известен способ выведения и испытания устойчивых к патогенным поражениям растений, при котором весь селективный материал выращивают в полевых условиях в течение всего периода вегетацииЯ,Однако такой способ связан с большими затратами труда и времени и визуальная реакция на патоген проростков или молодых растенйй не всегда позволяет предугадать реакцито целого растения.Известен способ определения устойчивости растений к неблагоприятнымусловиям внешней среды, в том числе кфитопатогенным поражениям, по которомуопределяют количество токсических веществ, ноявляю 1 цихся в липидах растенийпод действием неблагоприятных факто(54) СПОСОБ ОПРЕДЕЛЕНИЯ УСТОЙЧИВОСТИ РАСТЕНИЙ К ФИТОПАТОГЕННЫМ ПОРАЖЕНИЯМ372878 неинфицированного растения. Лнтиокислительную активность (ЛОА) определяют методом термического окисления метилолеатной модели. Для этого ЛПК зкстрагируют и листьев смесью хлороформ- метанол (1:2), растворяют в 3-4 мл5 метилолеата с концентрацией ЛПК 10-20 мг/мл и размещают в окисли - тельных ячейках с капиллярной трубкой, помещенной в термостат. Температурао10 окисления 80, ток кислорода - не менее 6 л/час на каждую ячейку. Одновременно с началом обесцвечивания зеленого пигмента - хлорофилла ( Эбо в ацетоне ( 0,3) из ячеек отбирают пробы для определения гидро- перекисей. 30 40 Использование предлагаемого способа значительно сократит сроки и повысит эффек -тивность диагностики устойчивости растений к фитолатогенным поражениям,Кзыл-Рават 0 4 300 12 2 10 3120 О О.27 5, 1040 7 0 2 20 Количество гидроперекисей определяется Йодометрическим титрованием. Для этого точное весовое количество окисляющегося субстрата ( г 200 мг) заливают 10 мл смеси хлороформ ледяная уксусная кислота (1:1), из сосуда удаляют воздух путем продувания 25 углекислым газом и прибавляют 1 мл насьпценного раствора КЭ в метаноле. Сосуд закрывают притертой пробкой и оставляют на 10-24 час в темном месте. Количество выделившихся гицроперекисей определяется по формуле:0 Ийо 50 Мо ЭОЩ -2 ргде Р - взятая навеска окисляющего - зБся субстрата;М иЧ - титр и объем раствора тио -сульфата натрия.При построении кинетических кривых накопления перекисей при окислении стандартного метилолеата и метилолеата с ЛПК в зависимости от времени за величину периода индукции принимается время, в течение которого концентрация гидроперекисей станет выше 0,1 ммоль/г, 45Величина АОА определяется по формуле "1 СОАОА = 4Где с( - периоц индукции при окислении стандартного метилолеата ,- период индукции при окисленииметилолеата с ЛПК;С - концентрация ЛПК в метил -олеате, г/мл.При изучении АОЛ ЛПК листьев растений, разлипых по устойчивости кзаболевицпо в норме (ЛОЛ ) и при за -ражении (ЛОЛО), характер измененияь ЛОА"ЛОА, ЛОЛ. на 2-й, 5-й и 7-йдни после заражения различен.Для устойчивых растений на 2-йдень наблюдается снижение ь ЛОА, на5-й день - резкое увеличение, на 7-йдень - устанавливается выше контроля.Для воспршычивых растений на 2 йдень наблюдается повышение ь ЛОА,на 5 - й - некоторый сиад, на 7=йснижение уровня ь ЛОА ниже контрольного.Устойчивость сорта определяют поположительной величине ь ЛОА ЛПК,измеренной па 7 - й день после инфициро -вания растения патогеном, восприимчивость - по аналогичной отрицательнойвеличине /, ЛОЛ.П р и м е р, Исследуют ЛОА ЛПК листьевхлопчатника сортов С - 4727 и Кзыл-Раватдвухмссячного возраста (стадия бутонизации), выращенных в одинаковых условиях теплицы Института экспериментальной биологии АН УЗССР. Опытныерастения инфицируют среднеагрессивнымштаммом гриба /его, 3 дЫс 0 КВ,биотип 2 (3 10 спор/мл), контрольныерастения инъецируют равным объемомдистиллированной воды. Данные по АОАи ь ЛОА, измеренные на 2-й, 5 - йи 7 - й дни после инфицирования, приведенные в таблице, подтверждают вилто -устойчивость сорта Кзыл-Рават ьАОАш=д 500) и восприимчивость сорта С 4727)5 Р 0 1 ааО Составитель Г. БростюкТехред Н. Бабурка Корректор М. Пожо Редактор М. Р 1824/3 Тираж 723 ШЛИИПИ Государственного по делам изобретений 113035, Москва, Ж, РаПодписноеета СССРытийнаб д 4 Л ак ми Филиал ППП Патент", г, Ужгород, ул. Проектная,Формула изобретения Способ определения устойчивости растений к фитопатогенным поражениям, включаюций ифицщивание растений фитопатогенами, извлечение липидпигментного комплекса и определение его биохимических показателей, О т л и ч а ю и и й с я ТЕМЧТО, С ЦОЛЬО НОВЕШЕИЯ ТОЧНОСТИ оценки устойчивости растения к патогену и ускорения Определения, в качестве биохимического показателя используют 8783 6показатель антиокислительно й активности липидпигментного комплекса через неделю после инфишрования, по сравнению с неинфицированныл растением, 5 Источники иъфорлюашипринятые во внимание при экспертизе1. Тарр С. Основы патологии растений, - М.; Мир, 1:75, с, 512-514. О 2. Авторское свидетельство СССРМ 303023, кл. А 01 Н 1/04,1970 (протот.и) .