Способ определения эризимина

Союз СоветскикСоциалистическикРеспублик ОП ИСАНИ ИЗОБРЕТЕН И ВТОРС КОМУ СВИДЕТЕЛЬСТВУ(61) Дополнительно авт, свид-ву78 (21) 2609180/282) Заявлено 24.04 рисоединением заявки М ПриоритетОпубликовано Дата опубли ударственный кеннтет СССР 23). дв делам нзобретенн н еткрцтнй 8 02.80.,Бюллетен ния описания 03.03 В. В, Михно, В. В. Петренко, И, Г. Постриганьи П. П. Пуцко/ 2) Авторы изобретен и 1) Заявит Запорожский медицинский инст СПОСОБ ОПРЕДЕЛЕНИЯ ЭРИЗИМИ области кли нно к способу изимина и моколичественно этого соединеле для клиниризими-:мыйй фо- енного звестен спос еделени нв путем воздействия на исследу материал реагентом с последующ тометрией образовавшегося окра продукта 11. Недостатком этого способа я его 3 малая специфичность и точи.Йель предлагаемого изобрете вышение чувствительности и спе сти анализа,Поставленная цель достигает что в качестве ревгента испольш яет ость.ния - полз цифичнося темзуютеакцию го 0,1 млдо Изобретение относитс лической биохимии, а им определения гликозида э жет быть применено для и качественного анализа ния в различном матери ческих исследований. 3 мл 96" этанол. 2,5 мл 15%-ного спиртового раствора ТНДФ, 0,5 мл 0,15 н. родного раствора едкого кали. Смесь охлаждают цо 20-22 ОС. При этом возникает синее окрашивание. В опыте длясрвзнения проба бесцветна.Построение калибровочного графика определения эризиминв.Точную навеску препарата (0,0500 г) растворяют в 96 з этаноле, количественно переносят в мерную колбу на 50 мл и доводят до метки этим же рвстворйте:- лем (раствор А). Из разведения берут 10 мл (точно мерной пипеткой) переносят в мерную колбу нв 100 мл и доводят 96 этанолом до метки (рвстворБ), Из раствора Б берут О, 1;0,2;0,5;1.1 и 2 мл, помещают в пробирки, добавляют 96 этанол до 2 мл, 2,5 мл 0,15% спир" тового раствора ТНДФ, 0,5 мл 0,15 н. водного раствора едкого кали. Смесь охлаждвют до 20-22 С и проводят измерение оптической плотности растворов, окрашенных в синий цвет, через 20 минут3 718092 4после добавления щелочи. Измерения комплексов 18-20 мин, стабильность проводят на фотоэлектроколориметре окрашивания М 8-10 мин. ПодчиняеФЭК И. В течение 20 мин "до измерения" мость продукта реакции основному за растворы хранят в темноте. Светофильтр кону светопоглощения наблюдается в красный, кювета 5 мм, фон - смесь5 пределах концентраций препарата 10 реактивов. Экспозиция Е окрашенных 150 мкг/мл. Данные приведены в таблице. Результаты зависимости величийы оптической плотностиокрашенных растворов эризимина с ТНДф от концентрации ть 50 0,050 0 50 0,050 0,050 О,0,100 О,50 0,5 0 0,870 2 досуха. С5 мл 96 1,0 мл,У н нол. Изоллогичноэтаноломпроцентнвыделеннола, провод Э риаия, мкг, най- калибровочно а - концентрац денная по графику; У 1 - объем мл лизЭ Ч - объем, мл рен сухой Р - количество добавленновзятый на ан в которомостатокэризимина,гок 100 г кт П р и м е р. К ЮО г печени, почеккрови и мочи трупа, погибшего от травмы, добавляют 1000 мкг эризимина.40Изолирование проводят через сутки70%-ным этанолом. Настаивают объектс растворителем 24 ч. После троекратного настаивания спиртовые вытяжкиобъединяют, упаривают при 60 фС и осаж 4дают белки 96 этанолом. Осадок коагулировавших белков отфильтровывают,раствор упаривают и растворяют в 50 мл20%-ного этанола. Полученный раствордвоекратно очищают от прймесей экстрак 5цией этиловым эфиром. Из оФййейногоспиртоводного раствора экстрагируютэризимин четырежды смесью этанола -хлороформа 1:4. Объединенный спирто.хлероформный экстракт очишают экстракцией 1 н, раствором едкого патра, промывают дистиллированной водой, осушивают, пропуская через слой безводногосульфата натрия и упаривают при 40 С ухой остаток растворяют вэтанола. Из разведения бедобавляют до 2 мл 960 этирование из мочи проводятопуская настаивание 70%-ни осаждение белков. Расчеого содержания эризимииаго из биологического матеят по формуле5 718093 бРезультаты исследования контрольных ф о р м у л а и з о б р е т е н и я, проб указывают наотсутствие влияйия Способ определения эризимина путем экстрактивных веществ из печени навоздействия на исследуемый материал реопределение эризимйна, колориметри- агентом с последующей фотометрией обра. руемые растворы практически бес зовавшегося окрашенного продукта, о т л иц ватны. ч а ю щ и й с я тем, что, с цельюповышения чувствительности и сцецифичСпособ позволяет повысить чувстви- ности анализа, в качестве реагента истельность и специфичность метода опре- пользуют 2,4,2,4-тетранитродифенил, и деления эризимина, исключить дорого О реакцию проводят в щелочной среде, стоящее оборудование, упростить мето- Источники информации, дику анализа аризимина, уменьшить рас- принятые во внимание при экспертизе ход исследуемого препарата. 1. Аптечное дело. 3, 1962, с. З 8-41.Заказ 9983/6 Тираж 673 Подпйсйое "ЦНИИПИ Государственного комитета СССР по делам изобретений и открытий 113035, Москва, Ж, Раушская наб., д, 4/5 Филиал ППП Патентф, г, Ужгород, ул, Проектная, 4