Способ стимуляции образования специфического иммунитета у животных

п 1540640 ОПИСАНИЕ ИЗОБРЕТЕНИЯ Союз Советских Соыиалистических Республик(22) Заявлено 28 А 13.75 (21) 2 присоединением заявкиавета Министров СССРпо делам изобретений и открытий 3) УДК 615,37(088.8 Опубликовано 30.12,76, БюллетеньДата опубликования описания 30,12.7 Авторыизобретения В, Цыбульскаяинститут гриппа(54) СПОСОБ СТИМУЛЯЦИИ БРАЗОВАНИЯ СПЕЦИФИЧЕСКОГО ИММУНИТЕТА У ЖИВОТНЫХГосударственный комитет (23) Приоритет Изобретение относигся к вчастности к способу стимуляциспецифического иммунитета у жрусу гриппа.Известны сносспецифическоговключающие ввеэнтерально 11.Для усиления образования циркулирующих в крови антител вместе с вирусом применяют адьювант 65, полинуклеотиды и др.Недостаток этих способов заключается в том, что они не стимулируют секреторный иммунитет,Известен также способ стимуляции образования специфического иммунитета у животных путем введения им иммунизирующего агента совместно с липополисахаридом 2.Однако этот способ не обеспечивает стимулирование образования секреторных антител в организме животных при иммунизации его вирусом гриппа,Цель изобретения - разработать способ, позволяющий одновременно со стимуляцией общего иммунитета у животных против вируса гриппа обеспечить стимуляцию секреторного специфического иммунитета,Это достигается тем, что иммунизирующий агент - вирус гриппа вводят вместе с липополисахаридом 5. 1 урЫ интраназально. обы стимуляции образования иммунитета у животных, дение им вируса гриппа пар 2В результате этого происходит увеличениенакопления антител в секретах дыхательныхпутей и сыворотках крови, которое определяют в реакции непрямой гемагглютинацииРНГА),На фиг. 1 графически изображена динамика образования циркулирующих в крови антител 1, секреторных антител 2 и 3 соответственно в смывах пз трахеи и носа у животных,интраназаль о иммунизированных вирусомгриппа с липополисахаридом Ь. 1 урЫ, Нафиг. 2 представлены те же данные, но у животных, интраназально иммунизированных вирусом без лппополпсахарида Ь. 1 урЫ.Кривые отражают данные, представленныев таблице, приведенной ниже.П р и и е р. Одну группу крыс Упстар в количестве 50 голов весом по 150 - 180 г иммунизировалп интраназально 0,5 мл разведенной 1: 10 впрусосодержащей эллантопснойкультурой с инфекционной активностью 7,5 дЗИД 50 О, мл в смеси с 0,02 мг лппополисахарида 5. 1 урЫ. Второй группе таких же животных вводили в качестве контроля тот же25 вирус без липополисахарида Ь. 1 урЫ. Послеиммунизации животных из обеих групп забивали крыс на 5, 10, 15, 30 и 60 день. Исследовали смывы из полости носа, трахеп и сыворотки крови. Для взятия смыва из носа жи 30 вотных, под легким эфирным наркозом, укла540640 магглютинации (РНГА). Для определения достоверности полученные данные обработаны статистическими методами и представлены в таблице.5 Данные иммунизации животных вирусомгриппа вместе с липополисахаридом Я. 1 урЫ в сравнении с данными по иммунизации животных вирусом гриппа без липополисахарида . 1 урЫ,Иммунизация животных вирусом гриппа с липополисахаридомсмывах из носа сыворотках кровисмывахиз трахеи сыворотках крови смывах из носа 0,2 0,10,8 0,33 0,80,2 0,50,16 0,4 0,05 0,20,28 1,0 0,39 5,4 0,08 5,6 0,14 5,00,26 3,70,09 2,0 0,07 0,2 0,1 2,10,14 2,7 0,28 3,00,14 3,1 0,26 2,2 0,14 1,00,39 5,30,09 5,60,28 5,7 0,43 8,20,28 4,80,09 0,20,12,20,143,0 0,213,5 0,173,9 0,12,80,1 0,2 0,11,40,271,30,281,6 0,20,6 0,020,40,2 10 15 30 60 10 туры и механизмов взаимодействия с вирусами. Предлагаемый способ может быть использован для усовершенствования метода иммунизации против гриппа людей, а также свиней и кур.15 Для выполнения данного способа требуется липополисахарид 5. 1 урЫ - отечественный, доступный препарат, изготавливаемый в промышленных масштабах производственными институтами вакцин и сывороток Министерст 20 ва здравоохранения СССР,Способ стимуляции образования специфиче 25 ского иммунитета у животных, включающийвведение иммунизирующего агента совместнос липополнсахаридом, о т л и ч а ю щ и й с ятем, что, с целью одновременного стимулирования образования секреторных антител в ор 30 ганизме животного при иммунизации его вирусом гриппа, последний вводят интраназально слипополисахаридом 8.1 урЫ.Источники информации, принятые во внимание при экспертизе:1. Патент СССР441711, кл. С 121 5/00,1968.2. Заявка Франции 2123562, А 61 К 23/00,1972 (прототип),дывали на бок. Полость носа промывали с помощью пастеровской пипетки 0,5 мл физиологического раствора, Для взятия смывов пз трахеи в верхнюю часть трахеп вводили кончик пипетки, фиксировали его и промывали 1,0 мл физиологического раствора. Для определения концентрации антител в смывах и сыворотках использовали реакцию непрямой геИз таблицы видно, что при иммунизации животных вирусом гриппа вместе с липополисахаридом Ь, 1 урЫ уже с 5 дня резко возрастает концентрация секреторных антител в смывах из трахеи и носа. Их титр был выше, чем во второй группе животных в 2,0 - 2,5 раза. Максимального развития ответная реакция у животных первой группы достигает к 30 дню, когда она начинает угасать у животных, иммунизированных вирусом без липополисахарида 5, 1 урЫ, В этот период уровень антител в смывах из полости носа у животных первой группы превышает уровень антител у животных второй группы в 8 раз, а в смывах из трахеи - в 16 раз. Одновременно с этим интраназальное введение вируса вместе с липополпсахарпдом 5, 1 урЫ стимулировало и образование циркулирующих антител на поздних сроках. На 30 и 60 день титр циркулирующих антител у животных первой группы был в 8 - 16 раз выше, чем у животных второй группы,Использование предлагаемого способа иммунизации лабораторных животных по сравнению с известным обеспечивает усиление образования секреторных и циркулирующих противогриппозных антител.В результате использования этого способа можно получить значительные количества секреторных антител с целью изучения пх струкИммунизация животных Вирусом гриппа без липополисахарида540640 Дии иг.2 Составитель Л. МураяРедактор М, Дмитриева Техред А, Камышникова Корректор Л. Денискин Поди игСССР Заказ 2881/11ЦНИИ Типография, пр. Сапунова, 2 Изд.1890 Тир Государственного комитета Сове 1по делам изобретений и открь 13035, Москва, Ж, Раушская н ж 630Ми писттийб., д, 4/5