Способ получения препарата хищных грибов

ОП ИСАЙИ Е ИЗОБРЕТЕНИЯ Свез Советских Социалистических РеспубликК АВТОРСКОМУ СВИДЕТЕЛЬСТВУ т авт. свидетельстваависимо 02,Х.190 ( 1487256/30ццеццем заявки01 и 1500 аявле с присое Комитет по делам асбретений и открытий при Совете Министров вопрЗаявитель Всесоюзный ордена Трудового гельминтологии имКрасного Знамени институтК. И, Скрябина СПОСОБ ПОЛУЧЕНИЯ ПРЕПАРАТА Х ЫХ ГРИБОВ Однаконых грибов де недост Содержани(на сухой ном, разли ми. Для пт Изобретение относится к технологии производства препарата нем атофаговых хищных грибов.Известные способы для достижения этой цели предусматривают использование в качесгве питательного субстрата отжимов сахарного тростника, пшеничных отрубей, древесных опилок, овсяной и ячменной соломы, листового перегноя, навоза, отходов текстильной промышленности, земляного ореха, овсяной шелухи и других органических материалов.Известен также способ, при котором для выращивания хищных грибов применяют зерно различных культур, всевозможные органические субстраты и свежий навоз. При использовании навоза как питательного субстрата метод выращивания этих грибов заключается в том, что исходную (в пробирках) и маточную (в колбах) культуры, отобранные по признаку высокой эффективности в уничтожении нематод, воспроизводят на агаризованной среде, а сам препарат - на стерилизованном навозе. при выращивании препарата хищэтим способом навоз в свежем виаточно богат азотом и углеродом. е азота в нем не превышает 3,57 о вес), который представлен, в основчными минеральными соединения- тания же хищных грибов нужен органический азот в виде белка. Углеводы как источник углерода в свежем навозе представлены в основном клетчаткой, которая не разлагается или трудно разлагается хищными5 грибами. В связи с обедненностью питательными веществами хищные грибы недостаточно интенсивно растут на стерилизованном свежемнавозе.Для промежуточного размножения (маточ 10 ная культура) по существующей методике используют агаровую среду, которая позволяет утилизировать только поверхностный слой, цо це объем субстрата.Предлагается способ получения препарата15 хищных грибов, при котором для выращива-.ния маточной культуры используют разваренное зерно злаков, например пшеницы. С целью получения более активного препарата ц снижения его стоимости в разваренное зерно зла 20 ков добавляют сухой размельченный торф, апоследующее культивирование грибов ведут на промытом в воде и растворе щелочи компосте, приготовленном цз конского навоза и соломы с добавлением азотных и фосфорных 25 удобрений.Исходные (пробцрочные) культуры хищныхгрибов выращивают ц сохраняют на пептонцокукурузном агаре, %; глюкоза 1, КаС 1 0,5, СаСОЗ 0,05, пептоц 0,5, кукурузный экстракт ЗО 0,5, агар - агар 2.353697 Применение в качестве питательного субстрата для маточной культуры разваренного зерна пшенищы позволяет использовать весь объем зерна, и следовательно, получать из одной емкости большое количество спор, необходимых для инокуляции. Таблчца 1 Максимальное количество цнст на 1 смкорня, оо Вес клубней содного куста, % Сорт Характеристика препаратаНазвание опыга картофеля Кг 132,2 105,639,1 73,1101,8 79,6 92,9 92,9 88,7101,9 115,8 125,6 191,2 197,2 222,6 188,0 Вегетационный опыт1 Пнрмунес Антинема Штамм 11-к)7Штамм Х 1 Х 4/27 Штамм Х 1 Х 4/27 Штамм 11-к Вегетационный опыт2Полевой опыт Пир мунес П р н м е ч а н н е. К, - контроль без внесения препарата, Кг - контроль с внесением автоклавнрованного препарата. Маточный материал воспроизводят в конических колбах на субстрате из разваренного зерна, которое приготовляют следующим спо. собом: на 1 кг целого пшеничного зерна добавляют 80 г сухого размельченного торфа, 70 г 5 технического мела, 1,15 л водопроводной воды, Зерно варят под текучим паром в течение 2 час с перемешиванием через каждые 30 мин. Сваренное зерно засыпают в конические колбы на половину их объема, закрывают ватными 10 пробками, которые обертывают пергаментной бумагой. Колбы с зерном стерилизуют при 1 ать 1 час, После этого зерно встряхивают и используют по назначению. Приготовленный таким способом субстрат имеет рН 7,2 - 7,4. 15 Отдельные зерна не слипаются, и хищные грибы на этом субстрате растут относительно быстро, осваивая весь его объем. Для приготовления легко усваемого гриба ми субстрата из конского навоза необходимо иметь исходную смесь с содержанием 60 об. % соломы озимых зерновых культур и 40 об. % фекалий лошадей, которую укладывают в бурт, При укладке в бурт на 1 мз добавляют 25 следующие компоненты (по действующему началу), кг: азот 0,5, РгОв 0,25, известь или мел 6 - 7. Смесь увлажняют водой до полного насыщения. Когда температура в бурте на глубине 30 - 40 сл от поверхности достигнет 40 - ": 30 45 С, производят первое перетряхивание, Последующие два перетряхивания производят с интервалом в четверо суток, На третий день после третьего перетряхивания компост промывают в воде, а затем в щелочном растворе, 35 рН 7,9 - 8,2. После промывания из компоста под прессом удаляют избыточную влагу. Затем компост дробят и подсушивают до 58 - 62%. При необходимости дробление повторяют. В конце обработки субстрат имеет рН 7,4 40 и следующий состав, %: азот (белковый) не менее 2,5, азот (общий) 4,5 - 5, углерод (на сухой вес) около 85. Отношение азот: углерод 1: 20. Инокуляцию маточных колб проводят споровой суспензией из расчета 500 в 7 тыс. конидий (в 30 нл воды) на 1 кг зернового субстрата. Инокуляцию конечных емкостей - 2,0 - 2,1 млн конидий (в 20 лл воды) на 1 кг субстрата из конского навоза, который набивают в банки объемом 2 л из расчета 750 - 800 г. Для убодства инокуляции в центре массы субстрата делают глубокий канал (прививочное отверстие). Банку закрывают металлической крышечкой с отверстием, куда вставляют ватную пробку. Затем банки с питательным субстратом стерилизуют в автоклаве 2 час при 2,5 ати. Охлажденные банки используют для инокуляции. Хищные грибы выращивают при 24 С. В конце выращивания (седьмой-десятый день после инокуляции) банки помещают в условия рассеяннного солнечного света для усиления спорообразования. Оценку качества препарата хищных грибов производят по существующим методам лабораторной оценки.При апробации препарата хищных грибов, выращенных предлагаемым способом, получены положительные результаты на Литовском опорном пункте Всесоюзного института гельминтологии им. К. И. Скрябина в опытах с картофельной нематодой (табл. 1), в условиях закрытого грунта в совхозе Тепличный и в Главном ботаническом саду АН СССР - с галловой нематодой огурцов (табл. 2 и 3). Таким образом, предлагаемый способ дает возможность получать стандартизированный и дешевый питательный субстрат из конского навоза, который обеспечивает интенсивный рост и спорообразование хищных грибов.353697 Таблица 2 Интенсивность инвазии, оо Экстенсивность инвазип, среднеарифметические значения (М5 х) галлов на одно растениеминимальные и максимальные значения к-ва галлов на одно расте- ние Варианты опыта 1 - 5 52,8 Живой препарат штамма Х 1 Х 4/27Живой препарат штамма Х 1 Х 1 - 9 75,9 Простерилизованный препарат в той же дозе Контроль (без внесения препарата)1 - 12 93,4 3 - 12 100,0 Таблица 3 П р едмет изобретения Среднее число галлов на одно растение, о, Доза препарата от веса почвы, %-кХ 1 Х 4/27П-кХ 1 Х 4/27 26,4 7,6 5,2 44,1 5 5 30 30 23,1195,8 Составитель В. КосовецТехред А. Камышникова Редактор Б. Пинчук Корректор Л. Царькова Заказ 3756/4 Изд.1492 Тираж 406 Подписное ЦНИИПИ Комитета по делам изобретений и открытий при Совете Министров СССР Москва, Ж, Раушская наб., д. 4/5 Типография, пр, Сапунова, 2 3,6 0,22 4,2 0,36 5,2 0,55 7,20,68 Способ получения препарата кпщныч грибов, включающий и выращивание в маточной 5 культуре, содержащей разваренное зерно злаков, например пшеницы, от,гачающийся тем, что, с целью получения более активного препарата и снижения его стоимости, в разваренное зерно добавляют сукой размельчеипый 10 торф, а последующее культивирование грибовведут на промытом в воде и растворе щелочи компосте, приготовленном из конского навоза и соломы с добавлением азотнык и фосфорными удобрений.