Способ получения микробиологического инсектицидного препарата

Согласно предлагаемому изобретению, этацель достигается тем, что, в отличие от известного способа, гриб сначала выращиваготв глубинной культуре па жидкой органической питательной среде в стерильных условиях, а затем гголучепнуго жидкую культуру гриба разливагот в плоские сосуды и в пестерильных условиях получают конидиальную пленку, которую высушивают, перемалывают ясмешивают с биологически инертным наполнителем.Культивирование гриба ведут в кукурузнопаточной среде (смесь кукурузного экстрактаи кормовой патоки) с нейтральным исходнымрН, содержащей 55 - 60 лгг % аминного азота и 2500 - 2700 лгг % сахара. Такое содержание основных питательных веществ позволяетполучать достаточное количество мицелиальной массы (13 - 15 г/л) в глубинной культуреи обеспечивает интенсивное конидиеобразование в период поверхностного образования конидий.Засев питательной среды производят конидиальной суспензией гриба из расчета 9 -25 вглрд/л. Конидиальнуго суспензию предварительно подвергают термической обработке втечение 40 - 50 1 гас при температуре 0 - 5.С,что позволяет при низкой густоте засева получать однородную по развитию мицелнальнуюмассу при глубинном выращивании и равномерную конидиальную пленку в период поверхностного культивирования.Глубинное выращивание гриба проводятпри температуре 24 - 26"С с принудительнойаэрацией (1 - 1,5 обьема воздуха на 1 объемаэрируемой среды), При разливе культурыгриба устанавливают температуру 20 - 22 С споследующим повышением ее до 27 - 29=С длястимуляции процесса конидиеобразования.Предлагаемый способ получения микробиологического инсектицидного препарата апробирован в лабораторных условиях (приводятся результаты этих испытаний),П р и м е р, Культивирование гриба вели всреде, представляющей собой смесь кукурузного экстракта (1,9%) и кормовой патоки(6,2%), содержащей 57,5 лгк % аминпого азота и 2683 лгг % сахара. Исходное рН среды - 6,93,Питательную среду заливали в ферментер,стерилизовали ее при температуре 120"С в течение 50 лгин и засевали конпдиальной суспензией гриба, предварительно отшуттелированной в течение 2 - 3 час и выдержанной притемпературе 2"С в течение 45 час, Густота засева была 9 млрд. конидий на 1 л среды,Глубинное выращивание гриба вели притемпературе 26"С и непрерывной аэрации -1,5 л стерильного воздуха гна 1 л аэрируемойсреды, добавляя по мере вспепивапия питательной среды растительное масло, общийрасход которого составил 0,4% от объема среды. В этот период вели обычный микроскопический контроль чистоты культуры и степениразвития ее, Через 60 час после засева закан 40 Показатели известный способ50 55 1,7 - 2,30,35 - 0,70 0,5-0,6 8,0 0,5 - 1,3 0,03 60 65 5 10 15 20 25 30 35 чивали глубинное выращивание, при этом ко. личество мицелиальной массы в культуральной жидкости достигало 15,5 г/л (воздушно- сухой вес).Полученную жидкую культуру гриба разливали в противни слоем 0,75 слг поддерживая температуру 20-С до образования сплошной белой пленки и повышая ее до 28 С. Через 140 гас после розлива, когда заканчивается процесс конидиеобр азова ния, конидиальную пленку снимали с культуральной жидкости, высушивали при температуре 35 С, определяли титр (количество конидий в 1 г), размалывали в шаровой мельнице, смешивая с каолгном из расчета содержания в 1 г препарата 1,5 млрд. воздушных конидий гриба.Глубинное выращивание гриба позволяет за сравнительно короткий срок (50 - 60 час) получать значительное количество мицелиальной массы, сократить, благодаря этому, продолжительность поверхностного получения конидий с 330 в 3 час до 120 в 1 час и избежать при этом губительного влияния посторонней микрофлоры, поскольку развитая культура гриба обладает сильным антимикробным потенциалом, быстрое образование грибной пленки препятствует проникновению в культуральную жидкость микробов, а дефицит аминного азота в культуральной жидкости также препятствует накоплению посторонних микроорганизмов, Добавление биологически инертного наполнителя (каолина) позволяет получать легко смачивающийся порошковидный стандартный препарат.Технико-экономические показатели предлагаегяого способа приведены в таблице,Сравнительные технико-зкономические показатели известного и предлагаемого способов получения микробиологического инсектицидного препарата ПродолжительностьчасСтоимость 1 л питательной срсды коиВыход коиидий, г/и-Титр конидий, млрд/гПроизводительность по гото.вогиу препарату, г/лг 2/час Расход конидий при обработке посевов, кг/гаОтношение выхода конидийс 1 лг- к количеству конидий, используемых для обработки 1 га Использование предлагаемого изобретения при получении микробиологического инсектицидного препарата позволяет повысить выход конидий в 2 раза, производительность - в 4 раза, сократить продолкительность процесса в 2 раза, онизить стоимость питательной среды292685 Предмет изобретения Редактор К. Н. Шанаурова Тскрсд Л. Я. Левина Корректор Н. Л. Бронская Заказ 539/7 Издат. 74 е 250 Тирам 473 ПодписноеЦНИИПИ Комитета по делам изобретений и открытий при Совете Министров СССРМосква, Ж, Раушская иаб., д. 45 Типография, пр. Сапунова, 2 в 20 - 30 раз и расход конидий для обработки 1 га - в 25 - 40 раз, Все это дает возможность использовать предлагаемый способ получения микробиологического инсектицидного препарата для массового производства его в заводских условиях. 1. Способ получения микробиологического инсектицидного препарата, включающий выращивание гриба Ме 1 аггЫгцгп апЬор 11 ае (Ме 1 с 11) Бог. на жидкой органической питательной среде, получение конидий с поверхности этой среды и смешение их с биологически инертным наполнптелем, отличающийся тем, что, с целью увеличения выхода готового препарата и снижения его стоимости, гриб 5 предварительно выращивают в глубиннойкультуре на этой же среде в стерильных условиях с принудительной аэрацией.2. Способ по п, 1, отличающийся тем, чтозасев питательной среды производят кониди альной суспензией гриба, выдержанной притемпературе 0 - 5"С в течение 40 - 50 час,3. Способ по пп. 1 и 2, отличающийся тем,что в качестве питательной среды берут смесь кукурузного экстракта и кормовой патоки.