283950

О П Й А Н И Е ИЗОБРЕТЕНИЯ 283950 Союз Соввтвииз Свцивлиотичвоииз РвооубливК ПАТЕНТУ Зависимый от патентаКл. 53 е, 6/01 6 а, 22/04 МПК А 23 с 9/12 С 12 д 13/10Заявлено 02,Х 11,1966 (М 1115336/28-13) Приоритет 02.Х 11.1965,51270/65,Великобритания Моттитвт ао авлэю изоврвтвннй и открытиВ при Совете Министров СССРУДК 637.333.1:576,8,093,1 (088.8) Опубликовано 06,Х.1970. Бюллетень31 Дата опубликования описания 23.Х 11.1970 Авторизобретения Иностранец Кнуд Аунструп(Дания) Иностранная фирма Ново Терапеутиск Лабораториум А/СЗаявитель СПОСОБ ПОЛУЧЕНИЯ ФЕРМЕНТНОГО ПРЕПАРАТА ДЛЯ КОАГУЛЯЦИИ БЕЛКОВ МОЛОКА ПРИ ПРОИЗВОДСТВЕ СЫРАДля коагуляции белков молока при производстве сыра обычно применяют сычужные ферменты, добываемые из телячьих желудков, Эти ферменты отвечают предъявляемым к ним требованиям, обеспечивают достаточный выход сыра и хорошее качество его. Однако возрастающий спрос на них опережает возможности, Это заставляет изыскивать микроорганизмы, продуцирующие ферментные препараты, коагулирующие белки молока.Такие микроорганизмы, например Вас 111 цз зцЫ 11 з и Азрегр 11 цз за 11 о 1, извевтны.Известен также способ получения фермент- ного препарата, коагулирующего белки молока, путем выращивания указанных выше микроорганизмов глубинным или поверхностным способом на питательной среде, содержащей источники углерода с добавлением необходимых минеральных солей и стимуляторов роста,Для получения ферментного препарата, обеспечивающего более качественное проведение процесса коагуляции и изготовление сыра с высокими органолептическими и биохимическими свойствами в качестве продуцирующих ферментов используют штаммы группы Мцсог ш 1 еЬе 1 Кунея и Эмерсона, из которых предпочтительным является штамм Мцсог ппе- Ы Кунея и Эмерсона СВЬ 370.65. Этот штамм был выделен из компоста, собранного в Копенгагене в сентябре 1965 г., идентифицированЦентральным бюро в Баарне (Голландия)как входящий в группу Мцсог гп 1 еЬе 1 Кунея иЭмерсона и зарегистрирован под номером370.65.Штамм характеризуется следующими морфологическими признаками, Тцг 1 короткий(высота 2 - 3 мл), вначале белый, а затем -10 от светлого мышино-серого до темного мышино-серого цвета. ЯрогапрорЬогез, диаметр6 - 10 ллк. Ярогапра сферичекие, диаметр25 - 60 млк. Сошпе 1 ае от полукруглых доовальных, диаметр 20 - 40 ллтк. Ярогапрозро 15 тез бесцветные от полушаровидных до эллиптических (размеры 3 - 5;4 - 6 ммк), Худозрогез многочисленные, полушаровидные, бородавчатые от желтоватого до красноватогоцвета в молодом возрасте, черноватые в зре 20 лом возрасте (диаметр 30 - 45 лик). Агуозрогез имеются, 0 епппае не известны. Ростпроисходит,при температуре 30 - 55 С и оченьбыстрый - при 40 С,Пример 1. Применяют питательную сре 25 ду следующего состава (в г/л): крахмал,картофельный 40, соевая мука 30, ячменная мука100 и углекислый кальций 5, Соевое маслодобавляют в количестве 0,5 лл/л,Активность фермента после выращивания втечение Состав среды, г/л рН после выращивания в те- чение ф о М оо.ы о , - 3 О Э 8" 3 о ааа М Фс о Ы ой цзо = о Ей сб М а хф М м ойдо дао ос х оо среФЩОо ,о оХ 6дней 7 днейды 6,9 7,1 6,8 6,5 6,7 6,8 6,0 6,4 6,3 7,0 7,2 7,5 6,9 6,8 6,9 6,7 6,2 6,3 6,1 6,1 7,0 6,1 6,0 6,2 6,1 6,2 5,9 15,4 10,7 11,9 19,2 17,8 13,2 13,3 14,8 14,0 17,2 14,6 13,8 21,2 18,2 14,6 12,9 16,7 15,4 13,5 9,7 11,5 13,6 13,6 12,0 2,6 7,1 4,9 30 30 30 30 30 30 20 20 20 95 97 05 25 26 55 62 63 64 100 100 100 50 100 100 100 100 40 40 40 40 40 40 40 40 100 40 50 10 10 10 В три колбы Эрленмейера, емкостью при 500 мл каждая, вносят,по 100 мл этой питательной среды и инокулируют суспензией спор Мцсог гпепе 1. Колбы выдерживают на качающемся столе 7 дней при температуре 30 С. Мицелий отфильтровывают и определяют активность методом Кунитца,Активность фермента (в единицах Кунитца на 1 л среды) составляет: в первой колбе 15800, во второй - 17700, третьей - 15700.П р и м ер 2. В чане для посева готовят питательную среду, состоящую из 2 кг,картофельного крахмала, 1,5 кг соевой муки, 5 кг ячменной муки, 5 г вактераильной амилазы Мочо 5000 ЯКВ, 500 г углекислого кальция и около 40 л воды.Смесь нагревают до 70 С и выдерживают при этой температуре 30 мин, Затем ее кипятят острым паром в течение 90 мин при 120 С. Охлаждают до 34 С, инокулируют спорами из колбы Фернбаха.Для выращивания спор в колбу предварительно помещают среду, состоящую из 4 г дрожжевого экстракта, 1 г КНРО 4, 0,5 г Мд 504 7 Н 20, 15 г растворимого крахмала, 20 г агара и 100 мл воды. Среду инокулируют лиофилизированной культурой Мцсог ппе 11 е 1 и выращивают при 40 С до образования спор.После выращивания эту среду перемешивают со скоростью 240 об/мин и аэрируют со скоростью 60 л/мин. Длительность ферментации 48 час.Содержимое чана переносят в основной ферментационный чан, в котором находится пиП,р и м е р 4, Коагулирующне молоко ферменты при применении Мцсог рцз 111 цз получены в количестве около 300 единиц Кунитца на 1 л среды 95 см, а при применении Мцсог ппеЬе 1 СВЬ 370.65 количество полученных энзимов составило примерно 10000 единиц Кунитца на 1 л среды или значительно больше.При,применении среды, состоящей из 10% снятого молока, 1% глюкозы, 0,1% дрожжевого экстракта и 0,005 М хлористого кальция, получены следующие результаты. Активность Мцсог рцз 111 цз составляет 900 единиц Кунитца на 1 л среды, а активность Мцсог ппепе 1 тательная среда, состоящая из 8 кг картофельного,крахмала, 6 кг соевой муки, 20 кг ячменной муки, 25 г бактериальной амилазы Хочо 5000 5 КВ и 2 кг углекислого кальция.5 Среду разливают в бутылки и стерилизуюттак же, как среду в чане для инокуляции.Конечный объем среды составляет 200 л.После,инокуляции среду перемешивают со скоростью 400 об/мин и аэрируют со ско ростью 0,2 мг/мин. Для предотвращения вспенивания вносят соевое масло. Во время ферментации величина рН не меняется и равна 6,5.Активность, полученного фермента 2580 еди ниц Кунитца на 1 л среды.П р и м е р 3. В колбе Эрленмейера, емкостью по 500 мл каждая, вносят по 100 мл питательной среды (состав приведен в таблице) и инокулируют ее суспензией спор, полу ченных,при культивировании Мцсог тп 1 еЬе 1 насреде, состоящей из 4 г дрожжевого экстракта, 1 г К 2 НРО 4, 0,5 г Мд 804 7 Н 20, 15 г растворимого крахмала, 20 г агара и 1000 мл воды, в течение 2 - 3 дней при температуре 25 40 С,Инокулированную среду выращивают при30 С на вращающемся со скоростью 240 об/мин столе (продолжительность выращивания 6,7 и 8 дней).Активность коагулирующих молоко ферментов определяют по Кунитцу.Из всех примененных сред только крахмалразложился при воздействии бактериальной амилазы до стерилизации (см. таблицу). СВ 3 370.65 - 5500 единиц Кунитца на 1 л среды,55 П ример 5. Поверхностное культивирова.ние.В колбах Эрленмейера емкостью 500 мл стерилизуют 25 г смеси пшеничных отрубей иводы (1:1) при нагревании да 120 С в тече60 ние 45 мин. После охлаждения содержимоеинокулируют спорами Мцсог пнейе 1 СБ 8370.65. Выращивают 3 дня лри температуре40 С. После этого отруби экстрагируют 200 млводы. Активность экстракта составляет 450065 единиц Кунитца на 1 л среды,283950 Предмет изобретения Составитель М. Андреева Корректор Т, А. Уманец Редактор Н. Вирко Заказ 3651/14 Тираж 480 ПодписноеЦ 1.1 ИИПИ Комитета по делам изобретений и открытий при Совете Министров СССРМосква, Ж, Раушская наб., д. 4(5 Типография, пр, Сапунова, 2 Способ получения ферментного препарата я коатуляции белков молока при производве сыра путем выращивания продуцируюх этот препарат, микроорганизмов глубингм или поверхностным способом на питательй среде, содержащей источники углерода с бавлением необходимых минеральных солей стимуляторов роста, отличающийся тем, что, целью получения ферментного препарата,6обеспечивающего более качественное проведение процесса коагуляции и изготовление сыра,с высокими органолептическими и биохими,ческими свойствами, в качестве продуцирую 5 щих ферменты микроорганизмов используютштаммы группы Мцсог пцейе 1 Кунея и Эмерсона,2. Способ по п. 1, отличающийся тем, что,из группы Мцсог пие 11 е 1 Кунея и Эмерсона ис.10 пользуют предпочтительно штамм Мцсог пиеЬе 1 Кунея и Эмерсона СВЯ 30,65.