Способ моделирования хромосомных аберраций в клетках роговицы глаза крысы

(51) 5 009 В ТЕНИЯ И М Комитет Российской Федерации по патентам и товарным знакам ОПИСАНК ПАТЕНТУ(71) Ростовский медицинский институт(73) Чернов Виктор Николаевич; ГлувштейнАпександр Яковлевич; Петров Сергей Степанович(54)СПОСОБ МОДЕЛИРОВАНИЯ ХРОМОСОМНЫХ АБЕРРАЦИЙ В КЛЕТКАХ РОГОВИЦЫГЛАЗА КРЫСЫ(57) Использование: экспериментальная биология и медицина. Цепью изобретения является получение однотипных аберраций хромосом. Сущность изобретения: дистантно-тотально воздействуют на опытное животное низкочастотным электромагнитным полем низкой интенсивности, сформированным сигналом управления, полученным путем обработки электрических ответов афферентного нерва животного, в ответ на химическую стимуляцию цитостатическим препаратом.50 55 Изобретение относится к молекулярной биологии и биотехнологии и может бытьиспользовано в экспериментальной генетике и медицине.Проведенными исследованиями выявлено, что для моделирования хромосомныхаберраций в эксперименте используютсяфармакологические средства, обладающиемутагенной активностью, например препараты циклофосфан, малфалан, блеомицин.Однако, указанные методы моделирования хромосомных аберраций в эксперименте с помощью фармакологических средствимеют ряд существенных недостатков:узкий интервал доз препаратов, при которых стабильно регистрируются хромосомные аберрации, так как дальнейшееувеличение концентрации препаратов ведет к гибели культуры клеток или организма;невозможность получения эффекта избирательного воздействия, так как наряду схромосомными нарушениями зти препараты обладают рядом выраженных побочныхэффектов, например нарушение проницаемости клеточной мембраны, подавлениебелкового синтеза и энергетического обмена в тканях,Известен способ моделирования хромосомных аберраций с помощью сеерхвысокочастотного электромагнитного полядлиной волны 12 см (1250 мГц) и плотностьюпотока мощностью 500 мкВ/см, которыйгвзят в качестве прототипа, Воздействиепроводится в течение 10 дн по 7 ч в день.Хромосомные аберрации наблюдаются ввиде полиплоидии, анеуплоидии, утраты части хромосомы,Недостатки укаэанного способа определяются тем, что;реализация этого способа требует больших затрат на время воздействия (10 дн по7 ч вдень);типы аберраций, полученных этим способом достаточно разнообразны, что не дает возможность стабилизировать модель;использование СВЧ-излучения связанотакже с изменением теплового баланса мишени, что может вести к различным неучтенным нарушениям метаболизма;затруднена дифференцировка события:являются ли хромосомные аберрации первичными, либо они следствие нарушенияработы ферментативных систем, возникающих при повышении температуры среды,Целью изобретения является получениеоднотипных аберраций путем уменьшениявремени экспозиции на экспериментальныхживотных. Эта цель достигается путем дистэнтного тотального воздействия на опытное животное низкочастотным 5 10 15 20 25 30 35 40 45 электромагнитным полем низкой интенсивности (Н Э М П Н И), Воздействие п роизводится в течение 30 мин однократно, напряженность действующего Н ЭМПНИ 0,7 - 1 А/м, Крысы обрабатываются в течение 30 мин с Но 1 А/м. Через 12 ч у них производится забор роговицы и путем окраски и световой микроскопии определяется уровень и характер хромосомных аберраций.Для контроля использовалась группа интактных крыс, крыс получивших в/б 400 мкг циклофосфана и животные, обработанные в течение 30 мин ЭМП частотой 1 Гц синусоидальной формы напряженностью 1 А/м,Цитогенетический анализ анафаэ роговицы выявил следующее, Достоверные отличия интактного контроля наблюдались только в двух вариантах: после введения животным циклофосфана и после обработки животных КЭМПИ. Уровень поврежденных клеток равный 2,8 ч 0,37% у крыс, получивших циклофосфан, достоверно не отличается от уровня аберратных клеток животных обработанных ИЭМП, который составлял 3,2+ 0,38%. Причем не наблюдалось отличий в этих вариантах и по распределению спектра хромосомных аберраций. Так на долю хромосомных разрывов приходилось 20,6 после циклофосфана и 37,5 после информационного ЭМП, на обмены 79,47 ь и 62,5% соответственно, В интактном контроле и в фоновой группе фрагментов хромосом 8,9 , а обменов 91,1%.Полученные результаты позволяют сделать вывод о том, что управляющее ЭМП обладает цитогенетическим эффектом, который аналогичен действию алкилирующего агента - циклофосфана,По сравнению с существующим способ характеризуется следующими преимуществами;Способ позволяет опосредованно через нервную систему осуществлять имитацию действия мутагенного препарата циклофосфана на клетки роговицы глаза крысы беэ введения препарата в организм; уровень напряженности, действующего поля не превышает физиологические границы, что предупреждает возникновение побочных эффектов, связанных с энергетическими эффектами электромагнитных полей; данный способ позволяет имитироватьгруппы мутагенов в зависимости от того.какой из них использован при полученииуправляющего сигнала;2001443 Составитель С, ПетровТехред М,Моргентал Корректор Н. Король Редактор Заказ 3129 Тираж ПодписноеНПО "Поиск" Роспатента113035, Москва, Ж. Раушская наб., 4/5 Производственно-издательский комбинат "Патент", г. Ужгород, ул.Гагарина, 101 возможно создание портативных про-. граммируемых генераторов поля, использующих для работы управляющие сигналы. Формула изобретения СПОСОб МОДЕ ПИРОВАНИЯ ХРОМОСОМНЫХ АБЕРРАЦИЙ В КЛЕТКАХ РОГОВИЦЫ ГЛАЗА КРЫ. сы путем тотального воздействия электромагнитным полем, отличающийся тем, что, с целью повышения эффективности метода путем уменьшения времени экспозиции и(56) Цитология и генетика, 1976. с,10, М 5,с,400-402. 5обеспечения образования однотипных аберраций, на экспериментальное животное воздействуют однократно низкочастотным магнитным полем сложной формы 10 в течение 30 мин напряженностью 0.07 - 1А/м.