Способ микроклонального размножения картофеля

СОЮЗ СОВЕТСКИХСОЦИАЛИСТИЧЕСКИХРЕСПУБЛИК 285/ 51) ПАТЕНТ сс СР ИЕ РЕТЕ У СВИДЕТЕЛЬСТ ВТО 4792700/13 19.02,90 07.02.93, Бюл, йИ,О. А.П. Ермишин, Е ралева .Пузанков О,П., Г тодические указа енного картофеля 9(5 скои лите- использоришанович А.К, и др, ния по оздоровлению Минск; Урожай, 1988,зобретение относится к биотехнолоИзвестен способ микроклонального размножения картофеля, выбранный в качест е прототипа, включающий черенкование вьращиваемыхи чтго растений, посадку че енков на питательную среду, получение р стений, повторное их черенкование и выс,дку полученных регенерантов в грунт.Однако для этого способа характерны следующие недостатки: растения при высдке в грунт сильно повреждаются (обрыв корней, поломка стебля), что снижает их и иживаемость. Применение агариэованн й питательной среды предопределяет з ачительную сложность технологии микр клонирования, в частности, процедуру о вобождения пробирок от остатков иси льзованной среды, приготовления и разливки среды по пробиркам, посадки черенков, извлечения растений при высадке в грунт и др,ель изобретения состоит в повышен иваемости растений-регенерант 792971 А 1(54) СПОСОБ МИКРОКЛОНА МНОЖЕНИЯ КАРТОФЕЛЯ (57) Использование: биотех ское хозяйство, картофелево водство картофеля. Сущност микроклональное размноже проводят с использованием сителя для питательных сред пической. 2 табл,при высадке их в грунт и упрощение т ологии микроклонирования.Поставленная цель достигается тем, что в известном способе микроклонального размножения картофеля, включающем черенкование выращиваемых и чего растений, посадку черенков на среду, получение растений, повторное черенкование и высадку регенерантов в грунт, посадку черенков осуществляют на гигроскопическую вату, пропитанную питательной средой.Добавление в питательную среду, с которой будет производиться высадка растений в грунт, хлорхолинхлорида усиливает положительный эффект,Сопоставительный анализ заявляемого решения с прототипом показывает, что заявляемый способ отличается от известного тем, что посадку черенков осуществляют на гигроскопическую вату, пропитанную питательной средой. Таким образом, заявляемый способ соответствует критерию изобретения "новизна".В патентной и научно-техничературе отсутствуют сведения об1792971 хлорид вании гигроскопических субстратов, в частности, ваты, для улучшения приживаемости выращиваемых 1 п ч 1 го растений при высадке их в грунт при одновременном упрощении технологии микроклонирования. Это позволяет сделать вывод о соответствии заявляемого решения критерию "существенные отличия".Посадка черенков на гигроскопическую вату, пропитанную питательной средой, 10 обеспечивает повышение приживаемости растений при высадке в грунт за счет уменьшения их повреждаемости, позволяет существен но ускорить эту и роцедуру.Заполнение пробирок ватой и ее извлече ние после черенкования менее трудоемко по сравнению с агаризованной питательной средой, Смачивание ваты жидкой питательнойсредой производится с помощью автоматического дозатора, Нет необходимости 20 тратить время и электроэнергию на растапливание агар-агара. Посадка черенков на вату, как при посадке на агар, что позволяет ускорить йупростить процесс посадки черенков на среду. После извлечения 25 растений из пробирок стенки последних остаются практически чистыми, благодаря чему упрбщается процедура мытья пробирок,Предлагаемый способ микроклонально: горазмножения картофеляреализуетсясле- З 0 дующим образом.В вымытые и высушенные пробирки(14 хх 160 мм или 16 х 210 мм) вносят соответственно на Ь или 7 см длины пробирки вату гигроскопическую, проталкивая ее с помощью З 5 деревянной палочки. Вату сильйо не уплотняют. Пробирки расставляют на штативы.Жидкую питательную среду, йапример Мурэсйге-Скуга (МЯ) (см. 1), разливают по про-" биркам с помощью медицинского 40 автоматйческого дозатора А, Экспериментально установлено; что оптимальйое Ф.ормула изобретения 1, Способ микроклонального размножения картофеля, включающий черенкование выращйваемых 1 и ч 11 го растений, посадку черенков на питательную среду, получение растений, повторное черенкование и высадку полученньи регенерантов в грунт, о т л ич,а ю щ и й с.я тем, что,с целью повышения приживаемости растений-регенерантов количество среды на пробирку 14 х 160 мм - 5 мл, но пробирку 16 х 210.мм - 10 мл, Пробирки закупоривают ватно-марлевыми пробками и автоклавируют 20 мин при 0,7 - 0,8 кг/см .Пробирочные растения, имеющие 5-6 листьев, извлекают в ламинар-боксе из и робирок и черенкуют на простерилизованной чашке Петри, Посадку черенков производят следующим. образом, В левую руку берут столько пробирок с ватой, смоченной средой; сколько получилось черенков, Извлекают пробирки и с помощью пинцета помещают черенки на поверхность субстрата, Пробирки закупоривают пробками, расставляют на штативе. После посадки штативы с пробирками йереносят на стеллаж, оборудованный люминесцейтными лампами ЛД, где производят культивирование при освещенности 2-4 тыс.люкс, фотопериоде 16 ч, температуре 22-24 С днем и 18 - 20 С - ночью.Образовавшиеся изчеренков пробирочные растения снова черенкуют или высаживают в грунт, В последнем случае целесообразно использовать среду, в которую добавляют хлорхолинхлорид (концентрация для каждого сорта подбирается индивидуально, обычно она бывает в пределах 50-200 мг/л). Для высадки растения вместе с субстратом извлекают из пробирок и высаживают в теплицу в торфо-перегнойный грунт,В табл, 1, 2 приведены результаты осуществления данного способа.Из таблиц следует, что способ позволяет снизить повреждаемость растений при высадке в грунт, что обеспечивает более высокую их приживаемость. Достигается существенное повышение производительности труда за счет упрощения технологии микроклонирования. при высадке в грунт и упрощения технологии микроклонирования, посадку черенковосуществляют на гигроскопическую вату,пропитанную питательной средой. 2. Способ по и. 1, о т л.и ч а ю щ и й с я тем, что в питательную среду перед высадкой растений в грунт добавляют хлорхолин1792971 Таблица 1 Показатель Известный способ (среда МЯ вмодификацииБел НИ И КПО) П едлагаемый способ Питательная среда МЯ Питательная среда МЯ с хлорхолинхлоридом 100 мг/л ломка стебля при извлечениистений из пробирок, оиживаемость (через 3 неделисле высадки,П р П и 7,8 7,1 5,8 29,8 72,4 78,8+Р0,01 Таблица 2 Процедура Известный способ Заявляемый способ 5,00 5,83 1,95 2,50 1,17 5,00 0,28 4,11,. 1,63 1,37 2,36 2,33 16,62 2,92 3,33 23,16 Редактор Заказ 482 Тираж Подписное ВНИИПИ Государственного комитета по изобретениям и открытиям при ГКНТ СССР 113035, Москва, Ж, Раушская наб;, 4/5 Производственно-издательский комбинат "Патент", г. Ужгород, ул.Гагарина, 101О з М П Н Ч че П (с В И Приживаемость растений картофеля после высадки в грунт (сорт Ласунак) Трудозатраты (чел/час) на производство 1000 растений картофеля вобождение пробирок от остатков испольванной среды, субстрататье пробирокиготовление питательной среды полнение пробирок питательной средой ренкование растений (250 растений на 4 ренка)садка черенков на питательную среду бстрат)садка растений в грунтого: Экономия составляет 6,54 чел/час, или 39,35 ОВ заявляемом способе эта процедура включает набивку пробирок ватой 3,0 чел ч и разлив жидкой питательной среды по пробиркам с помощью медицинского дозатора А(1,11 чел/ч). Составитель А. Е рмишинТехред М,Моргентал Корректор А.Мотыль