Способ диагностики интоксикации высшими алифатическими аминами жирного ряда

СОЮЗ СОВЕТСКИХСОЦИАЛИСТИЧЕСКИРЕСПУБЛИК 119 1)5 О 01 К 33/53 ИСА Е ИЗС)Б Т И ТОРСКО СВИДЕТЕЛ ЬСТВ фессиональной интоксикации высшими .алифатическими аминами жирного ряда (ВААЖР). Сущность: Указанная цель достигается путем соединения лейкоцитов пациента с равными объемами 0,5 ф взвеси гл ютаризирован н ых эритроцитов барана, нагруженных ВААЖР, Смесь инкубируют в течение 10-15 минут при температуре + 37,0-37,5, центрифугируют, делают мазок, фиксируют его, высушивают, окрашивают по Романовскому-Гимза, Просматривают под микроскопом 100 лимфоцитов, отмечая среди них клетки, фиксировавшие на себе три и более эритроцитов барабан (РОК). При увеличении количества РОК, специфичных ВААЖР по сравнению с нормой(3,4+ 0,5%), диагностируют наличие ВААЖР в организ-ф ме и ставят диагноз: профессиональная ин-токсикация высшими алифатическими аминами жирного ряда. Точность способа возрастает на основе объективных данных. иненный,С.Сединиостике прооксикации.92. стоит в определе-пособных взаимоцитами барана, ААЖР.т следующим обраСпособ осуществля зом.Забирают 0,1-0,2 мл 0,1-0,2 мл 506-ного раств для предупреждения св После тщательного встря в нее добавляют для лизи тов 0,8 мл дистиллирова крови пациента в ора цитрата натрия ертывания крови. хивания пробирки рования эритроцинной воды на 30 с,. ГОСУДАРСТВЕННОЕ ПАТЕНТВЕДОМСТВО СССР1 ГОСПАТЕНТ СССР)(71) Пермский государствский институт(54) СПОСОБ ДИАГНОСТИКИ ИНТОКСИКАЦИИ ВЫСШИМИ АЛИФАТИЧЕСКИМИ АМИНАМИ ЖИРНОГО РЯДА(57) Способ диагностики хронической профессионал ьйой интоксикации алифатическими аминами жирного ряда относится к области медицины, а именно к лабораторной диагностике профессиональных заболеваний. Цель изобретения; повышение объективности и точности диагностики проИзобретение относится к медицине, в частности к лабораторной диагностике йрофессиональных заболеваний, и может быть использовано для постановки диагноза хронической профессиональной интоксикации вйсшими алифатическими аминами жирного ряда (С 16-С 2 о) (СААЖР),Цель изобретения - повышение объективности и точности диагностики профессиональных болезней, вызванных высшими алифатическими аминами жирного ряда.Сущность способа - обнаружение ВААЖР - основано на способности лимфоцитов. Организма сснсибилизироватьсл к веществу, попадаемому в организм любым путем, что сопровожда числа соответствующих аминам,Сущность способа с нии числа лимфоцитов, действовать с эритр сенсибилизированных В тся активизацией 160рецепторов к этима потом доливают до 9-10 мл среды 199 для восстановления рН=7,0, Пробирки центри фугируют 5-10 мин при 1500 об/мин, после чего надосадочную жидкость сливают, а осадок лейкоцитов ресуспенрируют в 0,1- 0,2 мл изотонического раствора хлорида натрия или среды 199, К полученной взвеси добавляют 0,1-0,2 мл 0,5-ной взвеси глютаризированных эритроцитов барана, нагруженных ВААЖР, смесь инкубируют 10-15 мин при+37,0-37,5 С, после чего центрифугируют при 1500 об/мин 5-10 мин. Надосадочную жидкость удаляют пипеткой, осадок ресуспендиру,от в капле любой интактной сыворотки (бычьей, лошадиной, человеческой). Из полученной суспензии клеток делают мазок, фиксируют в метиловом спирте или этиловом спирте, высушивают, окрашивают по Романовскому-Гимза, Под микроскопом рассматривают 100 лимфоцитов, отмечая среди них число ( ) клеток, фиксировавших на себе три и более эритроцитов (РОК), Обработку эритроцитов барана в глютаровом альдегиде производят следующим образом; соединяют 1 мл 5 - ной взвеси тщательно отмытых нативных эритроцитов барана с 0,25 -ным раствором глютарового альдегида в соотношении 1;1. Смесь выдерживают при+37,0 С в течение 15 мин, после чего эритроциты дважды отмывают от альдегида забуференным изотоническим раствором хлорида натрия рН=7,2 и доводят до первоначального объема этим же раствором (5 -ная взвесь), Для сенсибилизации эритроцитов готовят раствор с концентрацией ВААЖР 0,01 мкг/мл на забуференном физиологическом растворе рН=6,4, 1 мл 5 -ной взвеси глютаризированных эритроцитов центрифугируют, надосадочную жидкость удаляют, а к осадку эритроцитов приливают 1 мл раствора ВААЖР, Смесь тщательно встряхивают и выдерживают при комнатной температуре 25-30 мин, после чего лимфоциты дважды отмывают центрифугированием при 1500 об/мин в течение 10 мин изотоническим раствором хлорида натрия и им же доводят до 0,5 -ной взвеси. Показателем нормы является обнарукение числа РОК, специфичных ВААЖР, равное 3,4 .0,5 .Примеры практического использования способа.П р и м е р 1. Б-ная, Л-на, 36 лет, аппаратчица. До контакта с ВААЖР была здоровой. Ухудшение в состоянии здоровья отмечает после 9-1- лет работы с аминами, Стаж 15 лет. Жалуется на несдержанность, нервность, слезливость, постоянные головные боли, нарушено засыпание, сон чут 5 10 15 20 25 30 35 40 45 50 55 кий, прерывистый, Плохо переносит жару, резкие запахи, шум, громкие звуки, Лечилась по месту жительства, но улучшения не наступило.Со стороны внутренних органов терапевтом патологии не обнаружено, Нервная система: сухожильные рефлексы оживлены, вегетативныэ реакции усилены: стойкий красный дермографизм, гипергидроз ладоней рук, ощущение онемения в дистальных отделах конечностей.Психическое состояние, Все виды ориентировки сохранены. Имеется гиперестезия к звукам, запахам. Внимание снижено по обьему, память ослаблена, прослеживается склонность к детализации, эмоционально лабильна, "близко" слезы, быстро устает.У больной взяли 0,1 мл крови и добавили 0,1 мл 0,5 ф -ной взвеси глютаризированньх эритроцитов барана, нагруженных ВААЖР, инкубировали 10 мин при+37,0 С. При подсчете в мазке обнаружено увеличение экспрессии ВААЖР-рецепторов, о чем свидетельствует высокое число РОК, равное 45;4, тогда как в норме оно не превышает 3,40,5,Диагноз: хроническая профессиональная интоксикация ВААЖР, психоорганический синдром.П р и м е р 2, Б-ная М-ва, 49 лет, аппаратчица. Через 6 лет после контакта с ВААЖР стала отмечать головную боль, быструю утомляемость, раздражительность, эффективную неустойчивость. Не переносит запахи, шум, езду на транспорте. Снизилась память, стала плаксивой,Нервная система; усилены вегетативные реакции: стойкий красный дермографизм, нарушение сна, онемение и зябкость рук.Психическое состояние. Все виды ориентировки сохранены, сосредоточена на неп риятн ых ощущениях. Имеется гиперестезия к физиогенным раздракителям. Внимание снижено по обьему, есть трудности в распределении, выражена истощаемость. Память снижена. Мышление с некоторой обстоятельностью, ригидностью. Эмоционально лабил ьна, конфликтна, медлительна, астенизирована, щадит себя в нагрузках, в общении с людьми.У больной взяли 0,1 мл крови и добавили 0,1 мл 0,5;4-ной взвеси глютаризированных эритроцитов барана, нагруженных ВААЖР, инкубировали 10 мин при+37,5 С. При подсчете в мазке обнаружено 41 фРОК, специфичных ВААЖР, тогда как в норме оно равно +3,4 =0,5.1783438 Предлагаемый способ в данном случае осуществляли в различных условиях: с использованием 0,1 мл или 0,2 мл крови и 0,1 или 0,2 мл 0,5%-ной взвеси эритроцитов барана, нагруженных ВААЖР, с последующей инкубацией втечение 10 или 15 мин при +37,0 С или+37,5 ОС. Составитель Г;КрюковаТехред М.Моргентал Корректор М,Керецман Редактор Т.Козлова Заказ 4512 Тираж ПодписноеВНИИПИ Государственного комитета по изобретениям и открытиям при ГКНТ СССР113035, Москва, Ж, Раушская наб., 4/5Ф Производственно-издательский комбинат "Патент", г. Ужгород, ул,Гагарина, 101 Диагноз: хроническая профессиональная интоксикация ВААЖР, психоорганический, ьвстено-ипохондрический синдром.П ример 3.3-ная, С-на,51 год, аппаратчица. Через 6 лет после контакта с ВААЖР стала жаловаться на повышенную утомляемость, головные боли, нарушение сна, обидчивость, конфликтность, раздражительность, неприятные ощущения в дистальных отделах конечностей,Нервная система: недостаточность конвергенции, оживлены сухожильные рефлексы, тремор пальцев вытянутых рук, вегетативные реакции усььлеь 1 ы.Со стороны соматического статуса терапевтом отмечены хронический холецистит, спастический колит.Психическое состояние. Имеется гиперестезия к шуму, свету, запахам Произвольное внимание мало по объему, отмечается быстрая истощаемость, трудности распределения. Память снижена на текущие события. Медлительна, неуверена в принятии решений, эмоционально лабильна, астенизирована. Диагноз: хроническая профессиональная интоксикация ВААЖР, астеническойпсихоорганический синдром.Преимущества способа заключаются в5 высокой специфичности и чувствительности, использовании малого количества крови обследуемых, простоте технического,исполнения, малого Количества доступныхреактивов, несложном оборудовании, воз 10 можности использования способа при массовых профилактических осмотрах. Способпозволяет диагностировать ранние, начальные доклинические стадии -хроническойпрофессиональной интоксикации ВААЖР15 на основании обьективности результатовобследования,Формула изобретенияСпособ диагностики интоксикации высшими алифатическими аминами жирного20 ряда путем обследования пациента, о т л ич а ю щ и й с я тем, что, с целью повышенияточности и объективности диагностики, исследуют кровь, при этом к крови больногодобавляют равные объемы 0,5% взвеси глю 25 таризированных эритроцитов барана, нагруженных высшими алифатическимиаминами, смесь инкубируют при 37-37,5 ОС втечение 10-15 мин, подсчитывают в мазкечисло роэеткообразующих лимфоцитов и30 при увеличении числа розеток по сравнению с нормой диагностируют хроническуюпрофессиональную интоксикацию высшимиалифатическими аминами жирного ряда.