Способ количественного определения суммы капсаициноидов в экстракте стручкового перца густом

СОЮЗ СОВЕ 1 СКИХ СОИАПИСТИЧЕСКИ 83404 А 9) ( спуБлик 5)5 6 01 й 27/48 ЕНИ ЕИ И ЕЛЬСТВУ ОМУ СВ А ГОСУДАРСТВЕННОЕ ПАТЕНТНОВЕДОМСТВО СССР(71) Запорожский медицинский институт(56) Данельянц В, А, и др. Определение суммы капсаициноидов в экстракте стручковогоперца густом, - Фармация, 1984, с. 23, М 5,с, 35-37,Мееров Я. С, и др, Исследование СО 2 экстракта плодов Сарасиаппипз - Химияприродных соединений, 1974, М 4, с. 481485.(54) СПОСОБ КОЛИЧЕСТВЕННОГО ОПРЕ ДЕЛЕНИЯ СУММЫ КАПСАИЦИНОИДОВ ВЭКСТРАКТЕ СТРУЧКОВОГО ПЕРЦА ГУСТОМ Изобретение относится к аналитиче-. ской химии, а именно к способам количественного определения основных действующих веществ экстракта стручкового перца густого - капсаицина, дигидрокапсаицина, нордигидрокапсаицина, ванилил-н-нонамида, норкапсаицина, гомокапсаицина и гомодигидрокапсаицина, получивших общее название "капсаициноиды", применяющегося для приготовления. пласты ря перцового (Ф С 42-1978-83 на экстракте стручкового перца густом).Известен. способ фотоэлектроколориметрическогоопределения капсаициноидов в СО 2-экстракте плодов перца стручкового, Способ заключается в экстрагировании капсаициноидов смесью ацетона, дезодорированного керосина и раствора натрия хлорида с последующим выпариванием водного слоя и повторной экстракцией ацетоном. Затем добавляют ацетоновый раствор(57) Изобретение относится к аналитической химии, а именно к способам количественного определения основных действующих веществ экстракта стручкового перца густого, применяющегося для приготовления перцового пластыря,. Оп редел ение и ро водят методом амп еро- метрического титрования, В качестве реагента используют 1 10 М раствор 12-молибденофосфорной кислоты. Анализируемый образец растворяют в 0,1 М растворе сульфата натрия, 2 табл,ванадиекислого аммония в. качестве светореагента и измеряют оптическую плотность окрашенного раствора при помощи фото- а электроколориметра ФЭК. 3Наиболее близким к изобретению по достигаемому результату является способ хроматоспектроскопического определения суммы капсаициноидов в экстракте стручко- ф вого перца густом.. С)Способ основан на очистке суммы капсаициноидов густого экстракта стручкового перца от пигментов двойным эстрагирова нием смесью хлороформа и 0;5-ного вод ного раствора, хлористого натрия, упариванием после каждой экстрации хло роформных вытяжек на кипящей водяной бане под слабым вакуумом, последующим хроматографированием на тонком слое силикагеля методом восходящей хроматографии, проявлением хроматограмм 0,2 О-ным раствором 2,6-дихлорхинон-хлоримида в:этиловом спирте, фиксацией в парах аммиака, разрезанием хроматограмм на зоны и элюированием с этих зон капсаициноидов этанолом. Элюаты центрифугируют в течение 5 мин при скорости 8 тыс. об/мин и спектрофотометрируют в кювете с толщиной слоя 10 мм при длине волны 280 нм, В качестве раствора сравнения используют элюат, полученный с полосы хроматограммы, не содержащей капсаициноиды. Количество суммы капсаициноидов находят по калибровочному графику.Недостатком способа является неизбежность потерь капсаициноидов в.процессе экстракции, обусловленных плохой растворимостью солей и эфирных соединений в хлороформе, Возможны потери капсаициноидов при упаривании хлороформного слоя после экстракции, поскольку температура кипения хлороформа (59,5 - 62,0 С) приближается к температуре плавления капсаицина (65,5-66,0 С), Наизбежны потери капсаициноидов и при элюировании их с хроматограмм, Серьезным недостатком способа является также необходимость использования для построения калибровочного графика капсаицинастандарта, технология получения которого сложна, требует больших затрат времени и сырья, Сам же капсаицин-стандарт токсичен, и работа с ним небезопасна. Длительность анализа (2-3 ч на один анализ) и высокая погрешность определения ( 6,02при р=0,95) делает метод малопригодным для постадийного контроля, установления параметров качества и стабильности препарата.Цель изобретения - повышение точности, снижение затрат времени и упрощение способа.Поставленная цель достигается путем амперометрического титрования анализируемой пробы 10 М раствором 12-молиб.зденофосфорной гетерополикислоты после предварительного растворения пробы в 0,1 М водном растворе натрия сульфата.Отличительными признаками являются использование в качестве химического реактива 12-молибденофосфорной гетерополикислоты и проведение количественного определения непосредственно в водном растворе навески густого экстракта стручкового перца, что значительно повышает точность определения, снижает затраты времени на анализ и устраняет необходимость применения высокоочищенного капсаицина-стандарта,Определение суммы капсаициноидов вэкстракте стручкового перца густом 1,000 гэкстракта стручкового перца густого (точная навеска) растворяют в мерной колбе вместимостью 50 мл в 0,1 моль/л растворе натрия сульфата и доводят тем же раствором до метки, Раствор фильтруют через бумажный фильтр, Для титрования берут 8,0 мл фильтрата, добавляют 2 мл 0,1 г-экв/л раствора серной кислоты. Раствор переносят в электрохимическую ячейку с системой электродов (индикаторный - торцовый графит-510,у Мкапс310Чгпк501001000 8. 35 где Мкапс. - масса капсаицина (305,41 у.е.);Чглк - эквивалентный объем титранта.Результаты количественного определения капсаициноидов в экстракте стручкового перца густом (производитель - ПАХФО "Лубныхимфарм") приведены в табл, 1.Сравнительная характеристика известного и предлагаемого способов приведена в табл, 2,40 45 Как следует из табл, 2, точность предлагаемого способа в сравнении с известнымвыше в 5 63 раза, воспроизводимость - в 5раз. Кроме того, он более прост в выполнении, так как не требует применения экстра-гирования, вакуумной отгонки экстрагента,хроматографирования с последующим элюированием и центрифугирования элюата, авремя анализа сокращается в 8 - 9 раз.Минимальная оп ределяемая концентрация капсаициноидов предлагаемым способом 10 моль/л, определяемый минимум1,64 10 моль/л,50 55 ный электрод с диаметром рабочей поверхности 5 мм и скоростью вращения 600 об/мин, электрод сравнения - насыщеннй каломельный полуэлемент), задают 15 напряжение 40,10 в и фиксируют величину"нулевого тока". В электрохимическую ячейку добавляют титрант (10 моль/л раствор 12-молибденофосфорной гетерополикислоты) порциями по 0,50 мл. В пределах точки 20 эквивалентности титрант добавляют порциями по 0,10 мл. Фиксация величины диффузионного тока через 60 с после добавления титранта. Амперометрическое титрование заканчивается после резкого увеличения ве личины диффузионного тока, Объем титранта, пошедший на титрование, определяют графически на кривой амперометрического титрования. Другие компоненты экстракта не влияют на ход анализа.30 Содержание капсаициноидов в пробе впересчете на капсаицин рассчитывается по формуле1783404 Формула изобретения Способ количественного определения суммы капсаициноидов в экстракте стручкового перца густом путем растворения пробы 5 в водном растворе натриевой соли, о т л ич а ю щ и й с я тем, что, с целью повышения Таблица 1 лица Показате посо Иэвест П е анализа (относиибка среднего ре 1,07 одимость)ие специальны 0,0036Экстрагировани Вакуумная отгон Хроматографи роваЭлюирование Центрифугирован 00072утствует и Продолжительнмин нализ 20 - 18 5 1оставитель В.Гладышевехред М.Моргентал Корректор Н,Ревская Редактор Подписноеэобретениям и открытиям при ГКНТ СССРРаушская наб 4/5 4511 Тираж НИИПИ Государственного комитета 113035, Москва, Жзводственно-издательский комбинат "Патент", г. Ужгород, ул.Гагарина, 101 Точность тельная о зультата) Воспроиз (дисперси Примене приемов точности, снижения затрат времени и упрощения способа, анализируемую пробу растворяют в 0,1 М растворе сульфата натрия, а в качестве реагента при амперометрическом титровании капсаициноидов использован 0001 М раствор 12 молибденофосфорной гетерополикислоты.