Способ получения препарата синхронизирующего половую охоту норок

%537681, кл, А 61 К 43меди й институт и И.Ю.Вы Н.Сухарева тельство ССС37/38, 1976. ГОСУДАРСТВЕННЫЙ КОМИТЕТПО ИЗОБРЕТЕНИЯМ И ОТКРЫТИЯМПРИ ГКНТ СССР ВТОРСКОМУ СВИДЕТЕЛЬСТ(54) СПОСОБ ПОЛУЧЕНИЯ ПРЕПАРАТАСИНХРОНИЗИРУЮЩЕГО ПОЛОВУЮ ОХОТУ НОРОК Изобретение относится к ветеринарии и может быть использовано для интенсификации воспроизводства пушных животных клеточного содержания, например норок.У многоплодных животных с провоцированным характером овуляции, в том числе и у норок, на величину помета оказывает влияние время спаривания. Оно должно быть приурочено к моменту, когда в яичниках созреет максимальное число яйцеклеток.Период спаривания у норок длится около 40 дн., но оптимальные сроки лежат в пределах 5-б дн. (с 10 по 15 марта), при спаривании ранее или позже этих сроков плодовитость животных резко падает.Применение различных химиотерапевтических препаратов синхронизирует и стимулирует охоту животных в разные сроки спаривания, что приводит к увеличению выхода щенков.Для стимуляици и синхронизации охоты крупноо и мелкого рогатого скота, а также пушных зверей в исследовательских целях в(57) Использование: звероводство, Сущность изобретения: арахидоновую кислоту, выделенную из простейшего Азтазаопца, инкубируют в буфере при 37 С с суперкатантом пузырьковых желез баранов в присутствии растворимой соли магния, добавляют спирт, центрифугируют, подкисляют, экстрагируют и хроматографируют на кремниевой кислоте. Простагландины вымывают 30-ным. раствором метанола в этиловом эфире уксусной кислоты, растворитель выпаривают, остаток растворяют в этиловом спирте и хранят при 4 ОС в атмосфере инертного газа. 1 табл,последнее время применяется препарат энэопрост Р), представляющий собой оптически активный простагландин.Однако действие этого препарата не всегда однозначно, синхронизирующий эффект низок при малых дозах, препарат резко, снижает специфические свойства при хра-3 нении, не производится в СССР. 4Известен синтетический лютеолитиче-СЬ ский препарат эстрофан фирмы Спофа (3).(Д применяемый для синхронизации половой охоты у телок, коров, кобыл и свиноматок.(Я Обработанных эстрофаном животных в течение суток нельзя забивать на мясо. Препарат в СССР не производится,В литературе имеются сообщения о применении препарата, содержащего антиоксиданты природного происхождения (4, а также синтетических простагландиновых препаратов - Эстуфалона (5), Синхронола - для синхронизации половых циклов животных. Однако все эти препараты нахо.дятся в стадии изучения, в печати отсутству 1776375ют сведения о составе и способе получения препаратов.Наиболее близким к заявляемому способу является способ получения хориогонического гонадотропина (1), который используется на практике для синхронизации охоты пушных зверей. Гонадотропин получают из мочи беременных женщин путем подкисления, осветления, адсорбции на каолине с кизельгуром, промывки подкисленной водой, элюирования водным раствором гидроокиси аммония и кислоты с добавкой органического растворителя и осаждения ацетоном. Препарат имеет ограниченное сырье и обладает недостаточно высоким синхронизирующим эффектом.Целью изобретения является повышение биологической активности препарата,Поставленная цель достигаюся тем, что арахидоновую кислоту, выделенную из микро-. оргайизма (простейшее) А,.оп 9 а по технологии (авт,св. СССР М 1132947 (7) инкубируют в буфере при 3 С с супернатантом пузырьковых желез баранов в присутствии растворимой соли магния, добавляют спирт, центрифугируют, подкисляют, экстрагируют и хроматографируют известным способом.Обработка самок норок а -астазеном повышает оплодотворяемость, снижает процент пропустовавших маток и неблагополучных родов, что приводит к увеличению выхода щенков до 5,43 й 0,44 на одну самку, что на 1,66 больше по сравнению с контрольной . группой (3,77 + 0 63), обработанной в эти же сроки хориогоническим гонадотрапином. Результаты щенения самок норок, обработанных этим препаратом простагландинов приведены в акте исйытаний.Использование в технологии препарата простагландинов другой арахидоновой кислоты (животного происхождения) дает препарат простагландинов, который лишь незначительно (на 0,43) повышает выход щенков у норок в сравнении с хориогоническим гонадотропином (см. таблицу),П р и м е р, В 200 мл супернатанта из168 г бараньих пузырьков желез в 0,2 М фосфатном буфере рН 8 приливают раствор 210 мг (0,5 к 10 М) арахидоновой кислоты 5 70 чистоты, выделенной из простейшегоАзиза Еопда по авт,св, М 1132947 (7). Затем в реакционную смесь добавляют 29,5 (4 10 М) сульфата магния в 50 мл фосфатного буфера, 22 мг(0,16 10М) гидрохинона в 50 10 мл буфера и 200 мг глютатиона (0,6 а 10М),, Смесь инкубируют при 37 С + 0,5 С втечение .30 мин при аэрации, после чего в реакционную колбу добавляют этиловый спирт. Реакционную массу оставляют на 2 ч при 4 С, 15 фильтруют и центрифугируют. Простагландины выделяют путем экстракции этиловым эфиром уксусной кислоты из подкисленного водного остатка. Этиловый эфир уксусной кислоты упаривают в вакууме, и сухой оста ток хроматографируют известным способом на кремниевой кислоте, простагландины (астазен) вымывают 30-ным раствором метанола в этиловом эфире уксусной кислоты, Растворитель 25 удаляют в вакууме, остаток растворяют вэтиловом спирте и сохраняют в закупоренных склянках с инертным газом при 4 С.Для синхронизации охоты норок а-астазен растворяют в физиологическом 30 растворе в концентрации О,2 м/мл и вводят внутримышечно в поздние сроки спаривания. Формула изобретения35Способ получения препарата, синхронизирующего половую охоту норок, включающий хроматографическое выделение, о т л и ч а ю щ и й с я тем, что, с целью 40 повышения биологической активности препарата, предварительно проводят азробное инкубирование арахидоновой кислоты микробиологического происхождения с супернатантом пузырьковых желез барана и 45 растворимой солью магния в буфере при соотношении 1:800:140 - 1:1000; 150.1776375 оставитель Л.Казансехред М,Моргентал Ред емчик ректо ГКНТ С оизводственно-издательский комбинат "Патент" род, ул,гагарина, 1 каз 4085 Тираж Подписное ВНИИПИ Государственного комитета по изобретениям и открытия 113035, Москва, Ж, Раушская наб., 45