Способ разделения и выделения кумаринов

фар- сслемац дов амилени де,в вляазде- ание ются лени токси особ равключпробыом даврез колектроменных к Известен с ния кумаринов анализируемой при атмосфер растворителя ч адсорбентом, с рование разделзделения и выделеающий разделение путем пропускания лении подвижного онку с полимерным етрическое детектиомпонентов в облаГОСУДАРСТВЕННЫИ КОМИТЕТПО ИЗОБРЕТЕНИЯМ И ОТКРЫТПРИ ГКНТ СССР(71) Кемеровский государственный медицинский институт(56) Микаберидзе К,Г., Мониава И.И, Умбеллиферон из листьев чая // Хим. природ, соед., 1974, М 1, с, 84,Непале 1.Н. Ргэрага 1 че абзогрз 1 оп - сЬгогпа 1 одгарЬзсЬе Тгеппопд огдапзсЬег ЧегЬпсопдеп ап ЯерЬасех 2 Ни)1 Астап //1 аЬог. Ргахз, 1986, Ч. 10, М 6, Я, 668 - 679,Гончаров Н.Ф., Ступакова Э,ПКомиссаренко Н.ФГелла Э.В. Кумарины надземной части Росема егеста // Хим. природ. соед 1978, Кг 2, с. 299-300.Ки)пэг ЧРезеЬ 1., ЯсКгегпагаСое О.В,М. 61 епепе апб 91 епадепе, 5,7- соп)ейохусоиглагпз 1 гогп Мцггауа Ыепее Воо 1 // РЬу 1 осЬетз 1 гу, 1987, ч. 26, р. 511 - 514,зобретение относится к химии и и, а именно к фитохимическому и ию кумаринов.звестны способы выделения и р кумаринов на сефадексах, пол том числе и методом ВЭЖХ, едостатками данных способов невозможность аналитического р я смесей кумаринов, использо чных, пожароопасных реагентов(54) СПОСОБ РАЗДЕЛЕНИ ЕН И Я КУМАРИ Н О В(57) Сущность изобретения: для разделения, выделения кумэринов и их производных используют полимерный абсорбент аффинного типа - КХ-т, с иммобилизированным лигандом полифенольной природы, Хроматографический процесс проводят с небольшим объемом адсорбента в режиме жидкостной хроматографии низкого давления, подвижная фаза - дистиллированная вода. водно-органические смеси; детектирование - спектрофотометрическое. 2 ил. сти 250 - 345 нм и их выделение в виде фракций элюата.Недостатками известного способа являются: низкая устойчивость кремнеземной матрицы сорбента при рН 8, применение значительного количества адсорбента (около 160 см ), длительность во времени, применение в качестве подвижной фазы органических растворителей.Цель изобретения - повышение селективности и упрощение способа выделения кумаринов,Поставленная цель достигается тем, что согласно способу, вкл 1 очающему разделение пробы смеси кумаринов путем пропускания при атмосферном давлении подвижного растворителя через колонку с полимерным сорбентом, спектрометриче 1770897ское детектирование разделенных компонентов в области 250-345 нм и их выделение в виде фракций элюата, подвижныйрастворитель, в качестве которого используют дистиллированную воду, или буферные растворы, или 10-60% раствор этанолав воде, пропускают через колонку с полимерным сорбентом аффинного типа - (+)катехин-азобензгидразидо-оксип ро пил-тойопалом. 101-а фиг. 1, 2 приведены хроматограммы,иллюстрирующие возможности предложенного способа,Способ осуществляется следующим образом. 15Анализируемую пробу разделяют путемпропускания подвижного растворителя, вкачестве которого используют дистиллированную воду, или буферные растворы, или10 - 60 раствор этанола в воде, через колонку с полимерным сорбентом аффинноготипа - (.) катехин-азобензгидразидо-оксипропил-тойопалом, разделенные компо ненты детектирую спек грофотометрическив области 250-345 нм и выделяют в виде 25фракций злюата,П р и м е р 1. Разделение смеси неодикумарин-нитрофарин состава 1:1 на (+) катехин-азобензгидразидо-оксипропил-тойопале (КХ-т). 30Подготовка модельной смеси, Смешивают 1,5 мл 0,01% раствора нитрофарина (в6,4, водном диметилформамиде, ДМФА) с1,5 мл 0,01 ораствора неодикумарина(в 4 водном ДУВА или диметилсульфоксиде). 35Полученную смесь (3 мл) наносили а стеклянную хроматографическую .,олонку(15 х 1 см), заполненную 2,0 мл (1=55 мм) геляКХ-т и специально подготовленную,Годготовка хроматографической колонки. После упаковки 2 мл геля сорбента вхроматографическую колонку ее промывают последовательно 5 мл дистиллированной воды,3 мл 2 У раствора натрия хлоридаи огмывают хлорид-ионы дистиллированной водой до отрицатсльной пробы с нитратом серебра (25-30 мл).Хромачографирование модельной смеси, Пробу объемом 3. мл хроматографируютна подготовленной колонке, используя в качестве подвижной фазы дистиллированнуюводу, Злюат собирают фракциями по 3 мл,скорость хроматографирования 1,1 - 1,3 мл/ч, детектирование при длине волны 275 нм (спектрофотометр СФ).Хроматографический профиль разделения иллюстрируется графиком на фиг. 1 - хроматограммой разделения смеси неодикумаринаи нитрофарина (1) на КХ-т. Подвижная фаза - дистиллированная вода.П р и м е р 2. Разделение смеси эску- лин-кумарин-эскулетин-метилумбеллиферон на (. катехин-азобензгидразидо-оксипропил-тойопале.Подготовка модельной смеси, Смешивают 0,5 мл 0,04 ораствора эскулина (в 16 оводном диметилсульфоксиде: 0,2 мг), 0,325 мл 0,04 ораствора (в 16% водном диметилсульфоксиде; 0,13 мг) кумарина, 0,2 мл 0,04 раствора (в 16 оводном диметилсульфоксиде; 0,08 мг) эскулетина с 0,2 мл такого же раствора метилумбеллиферона. Полученную смесь (4 мл) хроматографируют на КХ-т, Хроматографическую колонку готовят по примеру 1.Условия хроматографирования, Скорость хроматографирования 0,3 мл в минуту, обьем фракции 2,5 мл, упакованный объем геля 5 мл, детектирование при длине волны 320 нм,Хроматографический профиль разделения иллюстрируется графиком на фиг, 2 - хроматограммой разделения смеси: эскулин , кумарин , эскулетин (111) и метилумбеллиферон (И) на КХ-т. Подвижная фаза - дистиллированная вода.Формула изобретения Способ разделения и выделения кумаринов, включающий разделение анализируемой пробы путем пропускания при атмосферном давлении подвижного растворителя через колонкус полимерным сорбентом, спектрометрическое детектирование разделенных компонентов в области 250- 345 нм и их выделение в виде фракций элюата, о т л и ч а ю щ и й с я тем, что, с целью повышения селективности и упрощения способа, подвижный растворитель. в качестве которого используют дистиллированную воду или буферные растворы, или 10-60 о -й раствор этанола в воде, пропускают через колонку с полимерным сорбентом аффинного типа - (+) катехин-азобензгидразидо-оксипропил-тойопалом.