Способ диагностики ревматоидного васкулита

(19) (11) 5 СПУБЛИ 151)5 6 0 3 53 РЕТЕНИЯ ГОСУДАРСТВЕННЫЙ КОМИТЕТПО ИЗОБРЕТЕНИЯМ И ОТКРЫТИЯМПРИ ГКНТ СССР АВТОРСКОМУ СВИДЕТЕЛЬСТ(71) Казанский государственный медицинский институт им.С,В.Курашова(56) Казанский мед, журнал, М 1, 1987, с.9 -11. Изобртение относится к медицине, в частности к внутренним болезням, а именно к способу диагностики ревматоидного васку- лита.Цель изобретения - повышение точности диагностики ревматоидного васкулита путем определения функциональной активности нейтрофилов через исследование реакций адгезии нейтрофилов к сефарозе, конъюгированной с иммуноглобулином 6, и к сефадексу, конъюгированному с СЗв-фактором комплемента.Поставленная цель достигается тем, что из гепаринизированной венозной крови исследуемого больного выделяются нейтрофилы на двуступенчатом градиенте плотности фиколлверогрэфина 1,077/1,116 и определяются уровни их адгезии на сорбенты, содержащие дб и СЗв-компонент комплемента, В качестве субстрата дб-зависимой адгезии нейтрофилов используется сефароэа 4 В ("Р)агдаса", Швеция), конъюгированная с агрегированным 96 с учетом рекомендаций фирмы-изготовите. ля. Для определения СЗ а -зависимой адгеэии применяется сефадекс 6-25 " Р)агвасэ",(54) СПОСОБ ДИАГНОСТИКИ РЕВМАТОИДНОГО ВАСКУЛИТА(57) Изобретение относится к медицине и может быть использовано при диагностике ревматоидного васкулита, Целью изобретения является повышениеточностидиагностики, функциональную активность нейтрофилов определяют путем выявления уровней адгезии нейтрофилов к сефарозе, коньюмрованной с дб, и к сефадексу, конъюмрованному с СЗв-фактором комплемента, и при значениях уровней адгезии соответственно 61 - 80 и 56 - 70% диагностируют ревматоидный васкулит, Положительный эффект заключается в повышении точности диагностики с 77,8 (прототип) до 96,4%. Швеция), опсонизированный комплементом пула сывороток здоровых доноров и освобожденный от прочих, помимо СЗв, лигандов посредством термической обработки. Реагенты используют в виде вэвесей в растворе Зенкса в концентрациях; нейтрофилы - 5 х 10 мл, дО-сефэроза - 2 х 10 мл-, СЗв-сефадекс - 1,5 х 10 мл . Взвесь нейтро 5 -1филов смешивается в равных объемах с указанными сорбентами и инкубируется параллельно с контролем в дважды силиконированной посуде 30 мин при 37 С. Контролями служат системы, состоящие иэ нейтрофилов и неопсонизированных гранул сефарозы и сефадекса в тех же концентрациях и объемах, что и в основном опыте. Разница концентраций нейтрофилов в суспернатантах контрольной и опытной систем, выраженная в %, является искомым параметром и называется уровнем адгезии нейтрофилов к соответствующему субстрату (сокращено УАН дО) и УАН (СЗв),Проведено комплексное обследование больных РА, включавшее, помимо предлагаемого способа ряд клинических, лаборатор 1663552ных методов, а также патогистологическуюэкспертизу кожного био птата с целью обьективиэации воспалительных изменений в сосудистой стенке. Результаты подвергнутыстатистическому анализу на основе точногометода Фишера. Исследование позволяетобосновать следующие клинические проекции интервалов количественных измененийпараметров дб и СЗв-зависимой адгеэиинейтрофилов; значения УАН ( дб) в пределах61 - 800 и УАН (СЗв) в пределах 56-70 являются характерными для больных РА,имеющих ревматоидный васкулит, Онивстречаются в 96,4% случаев клиническивыраженного ревматоидного васкулита (длясравнения: способ-прототип - в 77;80 ).Значения УАН (1 дб) в пределах 40 - 60 и УАН (СЗв) в пределах 36 - 55% являютсяхарактерными для больных РА, не имеющихни клинических, ни морфологических признаков ревматоидного васкулита, Уровеньдостоверности различий параметров адгезии нейтрофилов между больными РА с васкулитом и без него составляет р ( 0,01,П р и м е р 1, Больная М 47 лет, Диагноз: ревматоидный артрит, полиартрит спреимущественным поражением мелких суставов кистей и стоп, коленных суставов,серопозитивный, медленно прогрессирующее течение, активность 11, рентгенологическая стадия 111, функциональнаянедостаточность 1. Больна 3 года, Находится на лечении нестероидными противовоспалительными средствами, начато лечениекризанолом. Клинико-лабораторный статус;внесуставных знаков не отмечается. Ттала37 С, Суставной индекс Ричи 11 баллов,Концентрация лейкоцитов в крови 5,5 х 10змкл-, СОЭ 37 мм/ч, СРБ , РФ 1:320,ЦИК 0,122 ед.опт,пл,Дермограммы "кожного окна"; через бч: нейтрофилов 67/ моноцитов 33%; через12 ч:нейтрофилов 32 ,моноцитов 68%; через 24 ч: нейтрофилов 30%, моноцитов 70%.Показатели адгезии нейтрофилов: УАН(1 дО) = 53%, УАН (СЗ в) = 52%, т,е, находятся винтервалах значений, не характерных для ревматоидного васкулита. Справедливость вывода об отсутствии у больной ревматоидноговаскулита подтвердило патогистологическоеисследование кожного биоптата. Его заключение: эндопериваскулярный склероз и утолщение мелких сосудов, преимущественноартериол. Воспалительных реакций в зонесосудов не отмечено,П р и м е р 2, Больная Б 50 лет, Диагноз;ревматоидный артрит, полиартрит с преимущественным поражением мелких суставов кистей и стоп, коленных суставов,серопозитивный, медленно прогрессирую 5 10 15 20 25 30 35 40 45 50 55 щее течение, активностьстепени, рентгенологическая стадия 111, функциональная недостаточность 1 степени, Больна 6 лет. Находится на лечении ортофеном, криэанолом, Клинико-лабораторный статус: внесуставных проявлений не отмечено, Ттела 36,8 С. Суставной индекс Ричи 12 баллов. Концентрация лейкоцитов в крови 4,0 х 10 мкл, СОЭ 30 мм/ч, СРБ, РФ 1:160, ЦИК 0,120 ед.опт,пл,Дермограммы "кожного окна": через 6 ч: нейтрофилов 60%, моноцитов 40; через 12 ч; нейтрофилов 54%, моноцитов 46%; через 24 ч: нейтрофилов 64%, моноцитов 360/Показатели адгезии нейтрофилов: УАН (1 дО) = 61%, УАН (СЗв) = 60%, т,е, типичны для ревматоидного васкулита.Таким образом, в данном случае характерные изменения параметров адгезии нейтрофилов указывают на наличие у больной ревматоидного васкулита, хотя в клинической картине манифестных признаков ревматоидного васкулита не выявляется. Речь идет о диагностике с помощью критериев адгезивности нейтрофилов латентно текущего ревматоидного васкулита, Диагноз верифицирован при патогистологической экспертизе кожного биоптата. Заключение: выраженные продуктивные процессы в стенках мелких сосудов, капилляриты, Периваскулярные инфильтраты содержат лимфоциты, макрофаги. Признаки дезорганизации соединительной ткани,П р и м е р 3, Больная А 36 лет, Диагноз: ревматоидный артрит с системными проявлениями в виде ревматоидных узелков, лимфаденопатии, полинейропатии, полиартрит с преимущественным поражением мелких суставов кистей и стоп, коленных суставов, серопозитивный, медленно прогрессирующее течение, активность 11. рентгенологи- ческая стадия 111, функциональная недостаточность 1 степени. Больна 4 года, Находится на лечении нестероидными противовоспалительными средствами, начато лечение кризанолом. Клинико-лабораторный статус: Ттела 37,2 С, Суставной индекс Ричи 14 баллов, Концентрация лейкоцитов в крови 5,бх 10 мкл, СОЭ 38 мм/ч, СРБ, РФ 1:320, ЦИК 0,130 ед.опт.пл.Дермограммы "кожного окна": через 6 ч, нейтрофилов 65%, моноцитов 35%; через 12 ч: нейтрофилов 38%, моноцитов 62 ; через 24 ч: нейтрофилов 29, моноцитов 710/Показатели адгезии нейтрофилов, УАН (дб) = 740 , УАН (СЗв) = 58, т.е. указывает на наличие ревматоидного васкулита. Заключение патогистологического исследова1663552 Формула изобретения Составитель П,БонарецевТехред М,Моргентал Корректор Э.Лончакова Редактор И.Касарда Заказ 2263 Тираж 414 Подписное ВНИИПИ Государственного комитета по изобретениям и открытиям при ГКНТ СССР 113035, Москва, Ж, Раушская наб., 4/5 Производственно-издательский комбинат "Патент", г, Ужгород, ул. Гагарина, 101 ния кожного биоптата: отек сосочкового и ретикулярного слоев дермы, капилляриты, резко выраженные периваскулярные инфильтраты с формированием гранулом из лимфоцитов, макрофагов, единичных плазматических клеток.Указанные примеры характеризуют спектр диагностических возможностей предлагаемого способа: он позволяетдифференцировать РА с васкулитом (примеры 2 и 3) от РА без васкулита (пример 1), Применение способа дает положительный результат при диагностике латентно протекающего ревматоидного васкулита (пример 2). При этом способ-прототип ни в одном из данных примеров не показал типичного для ревматоидного васкулита "моноцитарного" профиля и не принес нужной диагностической информации. Налицо преимущество предлагаемого способа по отношению к способу-прототипу.состоящее в повышении точности диагностики ревматоидного васкулита, кроме того, предлагаемый способ нетравматичен, 5 Способ диагностики ревматоидного васкулита путем определения функциональной 10 активности нейтрофилов, о т л и ч а ю щ и й с я:тем, что, с целью повышения точности диагностики, функциональную активность нейтрофи- лов определяют путем выявления уровней адгезии нейтрофилов к сефарозе, конъюгиро ванйой с цб, и к сефадексу, конъюгированному с СЗв-фактором комплемента, и при значениях уровня адгезии соответственно 61 - 80% и 56-70 диагностируют ревматоидный васкулит,