Способ выделения фитофторовых грибов из почвы

СОЮЗ СОВЕТСКИХСОЦИАЛИСТИЧЕСКИХРЕСПУБЛИК 16630291 1)5 С 12 0 1/02, С 12 й 1/О 1с ИЕ ИЗ ТЕНИЯ К АВ КОМУ СВИ ЛЬС(57) Изобретение относится к фитопатологии и может быть использовано в сельском хозяйстве для оценки зараженности почвы фитофторовыми грибами. Цель изобретения - упрощение способа. Отбирают пробу почвы, помещают ее в чашку Петри или другой сосуд, заливают водой так, чтобы она полностью покрывала почву тонким слоем, помещают на поверхность воды несколько свежих лепестков земляники, закрывают чашку и выдерживают при комнатной температуре, а затем микроскопирчют. Способ прост и позволяет сократить время на выделение фитофторовых грибов,тельскии зональныи нечерноземной поло Дроздовский льство СССР1/00, 1988,ЕНИЯ ФИТОФТОРОВЫ Изобретение относится к фитопатологии и может быть использовано в сельском хозяйстве для оценки зараженности почвы фитофторовыми грибами - опасными патогенами многих сельскохозяйственных культ р под микроскопом по краям лепе шо видны зооспорангии гриба, П ву побуревших лепестков. зоосп их морфологическим особеннос судить не только о наличии ф почве, и о виде гриба но и об инт ее заселения патогеном, При о почве фитофторы лепестки остами или на них развиваются д грибов (А 11 егпагГа Рцзаг 1 огп). Цель изобретения - упрощение спосо следу вы по аналог тобы о тонки яники чувствительны к тиевым грибам. Уже чех лепестков формируютхламидоспоры грибов, на лепестках развивабо, лишь после продолывания лепестков в и (4 - 7 дн) и не мешают ровых грибов. ики,комнофторесткитичнодметн ГОСУДАРСТВЕННЫЙ КОМИТЕТПО ИЗОБРЕТЕНИЯМ И ОТКРЫТИПРИ ГКНТ СССР(54) СПОСОБ ВЫДЕЛВЫХ ГРИБОВ ИЗ ПОЧ ба.Способ заключается в большое количество поч чашку Петри или в другой суд, заливают водой так, ч стью покрывала почву помещают на поверхность свежих лепестков земля чашку и выдерживают при пературе, При наличии фи дуемом образце почвы ле 2-3 сут полностью или ча при помещении их на пр ющем. Немещают в ичный сана полном слоем, несколько акрывают атной темы в исслеуже через буреют, а ом стекле Лепестки землфитофторовым и пирез 1 - 2 дня на краяся. зооспорангии,Грибы других родовются довольно слажительного пребпочвенной суспензивыявления фитофто стков хорса количесторангиев и тям можно итофторы в енсивности тсутствии в ются свежиругие виды10 20 25 30 35 40 50 П р и м е р, Проведен параллельныйанализ трех образцов почвы: 1) почва изсада, естественно зараженная Рпуторппо гасассогцп и Рп. с 1 тгсо 1 а; 2) стерильная почвенная смесь из теплицы; 3) стерильная почвенная смесь, искусственно зараженная чистойкультурой Рй. сас 1 огогп (смыв с одной чашкиПетри на 100 см почвы). Каждый образецзразделен на 3 части и проанализирован тремя способами, описанными ниже.Исследуемую почву заливают водой всоотношении 1 объем воды на 2 объема почвы с таким расчетом, чтобы слитая с почвыотстоявшаяся вода образовала в сосуде диаметром 10 см слой толщиной 1-2 см, В эту 1воду помещают зеленые ягоды земляники"концом, противоположным плодоножка", ивыдерживают. В случае наличия в почвеспорангиев, при условиях, наиболее благоприятных, ягода может за 48 ч покрытьсяочень характерным войлоком белого мицелия,Анализируемую почву заливают в чашках Петри водой слоем 5 - 10 мм и нэ поверхность воды помещают в каждую чашку потри отдельных доли листа растений земляники, полученных в культуре тканей, и выдерживают. Листья берут примерно через 5недель после высадки этих растений вгрунт, В случае наличия в почве фитофторы,через 3 - 5 дней на листьях должны появиться некротизированные участки, которыеанализируют под микроскопом на наличиегриба,Анализируемую почву заливают в чашках Петри водой слоем 1 - 2 мм над уровнемпочвы и на поверхность воды помещают несколько лепестков цветков земляники (срастений, выращенных в стерилизованнойпочве и содержащихся в лаборатории и теплице) и выдерживают при комнатной температуре. В том случае, если почва зараженафитофторой, лепестки через 2 - 3 дня, а принаиболее благоприятных условиях и черезсутки, заселяются грибом и буреют, Побуревшие лепестки просматривают под микроскопом для определения гриба.При просмотре образцов обнаруженоследующее. Через 3 дня лепестки земляники в обоих вариантах с зараженной почвойполностью побурели, тогда как на листьях иягодах признаки поражения отсутствуют,Опыт повторен для уточнения времениреакции приманки. Обнаружено, что на следующий день в вариантах с зараженной почвой часть лепестков побурела, а еще черезсутки побурели все лепестки. Под микроскопом на них обнаружены зооспорангии соответствующих видов РЪуторЬЬога (вварианте с садовой почвой на часть лепестков выделилась Рп. састогцп, на часть - Рп. стгсо 1 а, в некоторых случаях на одном и том же лепестке обнаруживались оба вида). Такая быстрая реакция лепестков объясняется, видимо, высокой температурой влаборатории (24-25 С), обусловленной очень жаркой погодой и благоприятной дляразвития обоих исследовавшихся видов фитофторы.На листьях земляники первые побуревшие участки отмечены в варианте с искусственно зараженной почвой только на 4-й, вварианте с садовой почвой - на 5-й день,Побурение ягод отмечено на 3 - 5-й день,однако характерный белый мицелий не развился,В вариантах с незараженной почвой лепестки, листья и ягоды оставались здоровыми в течение 10 дн, пока опыт не былпрекращен. Затем осуществляют идентификацию видов Рйуторпйога, развивающихся на лепестках, Для этого лепесток (или несколько лепестков) помещают в каплю водына предметное стекло, накрывают покровным и просматривают под микроскопом, На побуревших лепестках развиваются органы спороношения и мицелий, характерные для каждого вида, Виды идентифицируются по форме зооспорангиев (лимоновидные, грушевидные, овальные и др.), по наличию и форме сосочка из зооспорангии (присутствует, отсутствует, резко выражен, представлен шиповидным выростом, представлен утолщением оболочки на вершине зооспорангия), по наличию или отсутствию хламидоспор, вздутий на мицелии, особенностямпрорастания спорангиев и т,д. На листьях идентификацию грибов до вида производят таким же образом, но,отделяя пораженный участок или делая с негососкоб. При этом всегда есть опасность оторвать и зооспорангии, К тому же участок листа гораздо труднее просматривать из-зэ его большей толщины и непрозрачности,При использовании в качестве приманки ягод необходимо после образования мицелиального налета с органами спороношения изготовить из него препарат для микроскопирования и идентифицировать гриб по тем же признакам, что и нэ других приманках, При отсутствии налета можно обнаружить в побуревших тканях зооспоры гриба, но по ним невозможно идентифицировать вид.Таким образом, способ проще известных, так как не требует дополнительных операций по приготовлению препаратов для микроскопирования и сокращена продолжительность определения фитофторовых грибов.1663025 57 Формула изобретения Составитель Т,ПолянскаяРедактор М.Недолуженко Техред М,Моргентал Корректор М,Шароши Заказ 2237 Тираж 370 Подписное ВНИИПИ Государственного комитета по изобретениям и открытиям при ГКНТ СССР 113035, Москва, Ж, Раушская наб 4/5 Производственно-издательский комбинат "Патент", г, Ужгород, ул. Гагарина, 101 Способ выделения фитофторовых грибов из почвы, предусматривающий нанесение на поверхность исследуемого почвенного образца воды и помещение на нее растительной ткани земляники, о т л ич а ю щ и й с я тем, что, с целью упрощения способа, из растительной ткани земляни ки используют лепестки цветков.