Способ определения содержания морфоциклина

)5 С 01 11 21/ АРСТВЕННЫЙ НОМИТЕТЗОБРЕТЕНИЯМ И ОТКРЫТИЯМ ЮТ СССР П ОПИСАНИЕ ИЗОБРЕТЕНИЯ е ный,гФотморфФариа89.1 гАНИ)г ду коннтенсивот 0,1Оптимальцетатабл.2)рови и0 мкг/мл Линейная эависимост не,ор я опио" и вышепре" деление морК 1 - 24 - 5 мл ди27-ного расмешивают инаблюдают жцию е на препарата. арата прибавляют рмамида, 1 млацетата магния,пер афиолетовом светееленую флуоресценпре тилфсК анализируого иатериала ор рибавл ентриф т льт ируютацетатиаггц лто оя э мами е-е рируютциисиг)глуорес и и р 2. Качцнклина твенно биомат ксииумо енции с деление мор(71) Курский государственныйцинский институт(56) 13 денфренд С. Люминесцентанализ в биологии и медицинеИир, 1965, с.50.Сааведра Ф.Э., Соловей Н.Сколориметрическое определениециклина в олеиорг)гоциклине.ция, 197 а, тджх., 1 1, с88(54) СПОСОБ ОПРЕДЕЛЕНИЯ СОДЕРИОРФОЦИКЛИНА Изобретение относится к медициа именно к способам определения ифоциклина и может быть примененокачественного и количественногоределения этого соединения при бхимических, токсикохимических и бфармацевтических исследованиях.Целью изобретения является поние чувствительности и избирательти анализа биоматериалов.Способ осуществляется следующиобразом,мои пробе биологичес(кровь, моча, слюна) ацетат, встряхивают, и к аликвотной части а прибавляют дггметиля ацетат и г)глуориметуждении флуоресценм 425 цм, излучениимаксимумом 490 нм.(57) Изобретение относится к медицине, а именно к способаи определенияиорфоциклина, и может быть примененодля качественного и количественногоопределения этого соединения при биохимических, токсикохимических и биофармацевтических исследованиях, Цель "повышение чувствительности и избирательности определения. Способ заключается в зкстрагировании анализируемого вещества этилацетатом из биоиатериала, прибавлении дииетилфориаиида и ацетата магния с последуюшим измерением интенсивности флуоресценциис максимумом возбуждения при 425 нии излучения при 490 нм. 2 табл центрациеи морфоциклина и иностью флуоресценции лежитдо 20 мкг/ил (см.табл. 1).ная концентрация раствора амагния составляет 2 Х (см.таЭкстрация морфоциклина иэ кмочи при его концентрации 2достигается полная.П р и м е р 1. Качественно61071ЪК 1 мл плазмы крови или мочи прибавляют 2 мл буферного раствора с РН 5-6, 3 мл этилацетатаи встряхивают 3 мин. Затем центрифугируют при 3000 об/мин 2 мин. К 1 мл этилацетата прибавляют 8 мл диметилформамида,мл 23-ного раствора ацетата магния перемешивают и .флуориметрируют, В ультрафиолетовом свете наблюдают жел тую флуоресценцию.П р и м е р 3. Количественное опРеделение морфоциклина в крови и моче. г Относительная интенсивность флуоресценции,Е Концентрация, мкг/мл 0,1 1 3 0,2 2 6 0,3 3 9 0,4 4 12 0,5 5 15 0,6 6 18 0,7 . 7 210,8 824 09 9 27 1,0 10 30 О 1 О 19 20 28 29 38 39 49 49 58 58 68 68 77 78 85 86 94 95 О 20 30 40 50 60 68 74 80 83 ный способ для определения морфоциклина в биологических жидкостях. Способ обладает также большей избирательностью за счет образования внутрикомплексного соединения морбоцикли"на с катионом И 8 в среде Я".Ф, Подобной реакции не дают, все антибиотики, которые могут одновременно назначаться больным группы пенициллина,группы цефалоспоринов, группы стрептомицина, антибиотики-аминогликозиды,антибиотики макролиды, группы левомицитина, группы рифампицина,разных15 групп лиикомицин ГидрохлоридуристоК 1 мл плазмы крови или мочи прн- мицин сульфат, фуэидин, натрия, полибавляют 2 мл буферного .раствора с миксин сульфат, грамицидин, иистаРН 5 - 6,3 мл этилацетата и встряхи- тии, леворин, амфотерицин В) и суль"вают 2 мин, центрифугируют 2 мин при фаииламиды,5000 об/мин. К 1 мл слоя этилацета Ф о р м у л а и з о б р е т е н и ята прибавляют 8 мл диметилформамида. 1 мп 2 Е-ного раствора ацетата Способ определения содержания мормагния в ДИФА перемешивают и Алуо- фоциклина, включающий обработку анариметрируют относительно стандартно- лизируемой пробы химическим реагеиго раствора морфоциклина, для чего 25 том и измерение оптической характев Ряд пробирок прибавляют 0,1, 0,5, Ристики полученного продукта, по вв 1,00 мл стандартного раствора морфо- личине которой проводят определениециклина в диметилформамиде, с содер- отличающийся тем что сЭ Эжанием 50 мкг/мл, соответственно целью повышения чувствительности и8,9, 8,5, 8 мл диметилформамида,1 мл 30 избирательности анализа биоматериа 27-ного раствора ацетата магния в ди- .лов, пробу предварительно экстраги"метилформамиде, перемешивают и фпуо- руют из бноматериала этилацетатомФриметрируют одновременно с испытуе- экстРакт Растворяют в диметилформамыми растворами, миде, в качестве реагента используТаким образом, способ позволяет ют ацетат магния и измеряют интенповысить чувствительность определе- сивность флуоресценции раствора при35ния в 50 раз по сравнению с прототи" длине волны возбуждения 425 нм и дпнпом, что позволяет использовать дан- не волны регистрации 490 нм.Таблица 1Зависимость интенсивности флуоресценции анутрикомплексного соединения морфоциклина с магнием от концентрации морфоциклина1611071 Та блица 2 Зависимость интенсивности флуоресценцни комплекса морфоциклина с магнием от концентрации вцетата магния в, днметилформамиде кон.центрация мордоцнклина20 мкг/мл).ч Концентрация аце- Относительная тата магния, Х интенсивностьфлуоресценции,й Составитель С,БадтневаТехред Л,Сердюкова Корректор М.Шароши 1 Редактор Н.Коляда Заказ 3469 Тирам ПодписноеВНИИПИ Государственного комитета по изобретениям и открытиям при ГКНТ СССР113035, Москва, Ж, Рауюская наб., д. 4/5 Производственно-издательский комбинат "Патент", г.уагород, ул. Гагарина, 101 0,1 0,5 1,0 2,0 3,0 36 73 82 82 82