Камера для внутриклеточных инъекций

СОЮЗ СОВЕТСКИХСОЦИАЛИСТИЧЕСКИРЕСПУБЛИН 9) (11 12 МЗ ИОАН ТЕНИ отехэяйсто нс трук тор ск ое бюриборостроения чески актки жиетения с иы, равные ляр, и эам 4 иэ гидр ющего воэ гическии астворы,ГОСУДАРСТВЕННЫЙ КОМИТЕТПО ИЗОБРЕТЕНИЯМ И ОТКРЫТИЯПРИ ГКНТ СССР ВТОРСКОМУ СВИДЕТЕЛЬСТ(71) Специальное коро биологического пАН СССР(56) Фонбрюк П. Методы микроманипуляции . Микроманипуляционные методы экспериментальной микробиологии,М.: МГУ, 1951, с. 25.(54) КАМЕРА ДЛЯ ВНУТРИКЛЕТОЧНЫХИНЪЕКЦИЙ 2(57) Изобретение относится к бинологии, медицине и сельскому хову и может быть использовано дляведения микроинъекции биологи. тивных водных растворов в клевотных и растений, Цель изобруменьшение травмирования клетки.тройство содержит боковые опорыверхнюю 3 и нижнюю 1 пластипо ширине, образующие каппикнутые по кольцу покрытияфобного материала, раэделядушной прослойкой физиолои иньецируемый 6 водные р2 ил,1595899 40Использование предлагаемой камерыпозволяет ввиду наличия герметичнойвоздушной прослойки между физиологическим и инъецируемым растворами снизитьзагрязнение кончика микроинструмента 4 5 при ми крои нъекцииа т акже тр ав мир ованне клеток. Изобретение относится к биотехнологии, медицине и сельскому хозяйству и может быть использовано для проведения микроинъекции биологическиактивных водных растворов в клеткиживотных и растений.Цель изобретения - уменьшение травмирования клетки,На фиг. 1 показана конструкция ка Омеры; на фиг, 2 - разрез А-А нафиГ, 1 (камера вдоль гидрофобныхдорожек),Камера состоит иэ нижней стеклянной пластины 1, содержащей опоры 2, 15верхней стеклянной пластины 3, образующих прозрачный каппиляр, на которомвыполнены гидрофобное покрытие 4, инанесенных параллельно один другомуна пластине 1, опорах 2 и пластине 3физиологического водного раствора 5и инъецируемого водного раствора б.На фиг. 1 показаны также микропипетка 7 и микроприсос 8.Гидрофобное покрытие 4 нанесено 25так, чтобы образовалось замкнутоекольцо,Работу с камерой осуществляют следуЮщим образом,Устанавливают пластины 1 и 3 набоховые опоры 2 так, чтобы нанесенные на них гидрофобные покрытия 4 (выпопненныенапример, из вазелина, вазелиново-парафиновой смеси и т,п,) были параллельны оДно другому и обраэо 35вывали замкнутое кольцо, Заполняют поочередно камеру с одной стороны физиологическим раствором, а с другой -инъецируемым раствором (например, спомощью капилляров, вводимых в зазормежду пластинами). При этом гидрофобные дорожки разделяют воздушной прослойкой оба раствора, Пластины фиксируются на опорах 2 за счет тонкогослоя вазелина, который наносят наверхнюю и нижнюю поверхности опор.Сборку камеры изаполнение ее растворами лучше осуществлять в очищеннойвоздушной среде.Далее устанавливают камеры на микроскоп, вводят в зазор между пластинами в инъецируемый раствор микропипетку 7, а в физиологический раствор5 - удерживающий микроинструмент, например микроприсос 8, и клетки . Закрепляют одну из клеток на микроприсо-.се 8, управляя давлением н микропипетке 7, заполняют ее инъецируемым раствором на величину дозы и, перемещаякончик микропипетки через воздушнуюпрослойку и наблюдая за ним в микроскопе, вводят его в закрепленную клетку. После выдавливания в клетку дозыотводят кончик микропипетки 7 обратнов инъецируемый раствор для следующего заполнения, а микроприсосом 8 закрепляют вторую клетку. Чередование гидрофобных полос позволяет размещать в камере необходимое количество зон физиологического, инъецируемого или других водных растворов, например, для снижения высыхания и защиты от внешней среды инъецируемого и физиологического водного растворов, а также для использования свободных зон с физраствором для отделения разных типов клеток (проинъецированных от непроинъецированных и т.п.), Кроме того, камера используется для внутриклеточной микроинъекции методом диффузии, что расширяет ее функциональные возможности. Для этого одну зону камеры заменяют вязким инъецируемым раствоРом 1 а клетку располагают у самой границы Физраствор - воздушная прослойка, Кончик микроинструмента (микроиглы или микропипетки) при этом смазывается инъецируемым раствором и далее через воздушную прослойку вводится в клетку, где удерживается в течение времени, достаточного для диффузии. Затем выводят кончик микроинструмента, обратно в инъецируемый раств ор. Формула изобретения Камера для внутриклеточных инъекций, содержащая основание в виде прозрачного капилляра, о т л и ч а ю -щ а я с я тем, что, с целью уменьшения травмирования клетки, в среднейчасти внутренней поверхности капилля-,ра выполнено покрытие иэ гидрофобного материала,1595899 Составитель В.ВагановТехред М дидык Корректор М, Пожо Редактор М.Петрова Заказ 2889 Тираж 484 Подпи с но еВНИИПИ Государственного комитета по изобретениям и открытиям при ГКНТ СЧСР113035, Москва, Ж, Раушская наб., д. 4/5 Производственно-издательский комбинат "Патент", г. Ужгород, ул. Гагарина, 101