Среда для проращивания пыльцы линий кукурузы

(51)5 А ГОСУДАРСТВЕННЫЙ НОМИТЕТПО ИЗОБРЕТЕНИЯМ И ОТКРЫТИПРИ ГКНТ СССР ЫКЕЗЧМ:;",гБТг 15-1;-ИБЛг ОПИСАНИЕ ИЗОБВЕТЕНИЯН АВТОРСКОМУ СВИДЕТЕЛЬСТВУ(54) СРЕДА ДЛЯ ПРОРА 1 ПИВАНЛИНИЙ КУКУРУЗЫ(57) Изобретение относитсму хозяйству, а именно ктений, и может быть исполпрактической работе при г Изобретение относится к сельскому хозяйству, а именно к селекции растений, и может быть использовано в практической работе при гибридизации,Цель изобретения - увеличение количества проросшей пыльцы и удлинение пыльцевых трубок.Среда по сравнению с известной редой, содержащей сахарозу, борную кислоту, хлористый кальций, Дифкоагар и бидистиллированную воду, дополнительно содержит природный стероидный глцкоэид - цепозид Е-биозид-0- г(-Ь-рамнопираноэил(1-2)-г-Ь-арабиноиранозид 1-(25 К)-фурост-енЫ 26-триол-0-Р-Э-глюкопиранозид при следующем соотношении компонентов,Цель изобретения - увеличение количества проросшей пыльцы и удлинение пыльцевых трубок. В среду, содержащую сахарозу, борную кислоту, хлористый кальций, Дифко-агар и воду, вводят стероидный гликоэид - цепозид Е-0- Ы-Ь-рамнопиранозил(1-2)Ь-арабинопиранозид-(25 К)-фурост-ен Зр 22 Ы 26 триол-00-гликопираиозид. Компоненты вводят в питательную среду при следующем соотношении компоненто мас.%: сахароза 25,00-30,00; борная кислота 0,01-0,02; хлористый кальций 0,03-0,06; Дифко-агар 1,0-,2; цепозид Е 0,001-0,00001 ц вода бидистиллированная остальное. 1 табл. сО кальцииДифко-агарЦепоэид Е 1 Бидистиллированная вода Остальное Способ получения цепозида Е заключается в том, что семена лука репчатого (А 11 шп сера Ь) экстрагируют насыщенным водой бутанолом, полученный экстракт упаривают и последова,тельно хроматографируют на колонках с окисью алюминия ц сцликагелем, используя в качестве элюента систему хлороформ - метагол - вода (65:30:10 Выделенный целевой процукт контролируют в тонком слое сипикаг еля в этойтеме: КГ=О 62, Полученное вещество - аморфный ис рошок белого цвета, т,пл, 175-177 С 1 г . - 75 (С 10,0 СНОН) мол,вес, 872 1,е брутто 156364, гформула С 4 Н О, , Хорошо растворяется в воде, метиловом и этиловомспирте, пиридине, Нерастворим в ацетоне, хлороформе, серном эфире. Препарат не гигроскопичен, устойчив прихранении. В ИК-спектре присутствуютполосы поглощения: 900 см(широкаяполоса, характерная для фуростаноловыхгликозидов), 3400 см(ОН-группа).П р и м е р, Среду для проращива-ния пыльцы линии кукурузы готовят следующим образом, В 0,5 л бидистиллиро ванной воды растворяют 300 г сахарозы, 200 мгборной кислоты, 600 мгхлористого кальция, 12 г Дифко-.агара,1 мг цепозида Е, затем доводят объемраствора до 1 л бидистиллятом. Полученную питательную среду разогреваютдо полного растворения компонентови наносят на предметное стекло. На застывшую питательную среду наносятпыльцу кукурузы, затем предметное стекло помещают в чашку Петри с увлажненной фильтровальной бумагой и выдерживают в термостате при 27 С в течениео40 мин. Жизнеспособность определяютпо количеству проросших пыльцевыхтрубок. Число проросп 1 их пыльцевых зерен определяют под микроскопом. Длину пыльцевых трубок измеряют при помощи окуляромикрометра.Для выявления оптимального составасреды, обеспечивающей наибольший процент прорастания пыльцы кУкУРУзы, были приготовлены и испытаны 3 варианта среды 1-3, отличающиеся содержанием цепоэида,Результаты опыта представлены втаблице, Контролем служила известнаясреда (см.таблицу).Как видно яз данных таблицы,предлагаемая среда позволяет увели Формула изобретения Среда для проращивания пыльцы линий кукурузы, содержащая сахарозу, борную кислоту, хлористый кальций, Дифко-агар и бидистиллированную воду, отличающаяся тем, что, с целью увеличения количества проросшей пыльцы и удлинения пыльцевых трубок, питательная среда дополнительно содержит стероидный гликозид - цепозид Е3-0-М-Ь-рамнопираноэил(1-2)ф.-араоинопираноэид - (251)-фурост-ен/ 2206,26-триол" 26-0-Р-гликопираноэид при следующем соотношении компонентов, мас.7:25-30 . 0,01"0,02СахарозаБорная кислотаХлористый кальцийДифко-агарУказанныйцепозид ЕБидистиллированная вода 0,03-0,06 1,0-1,20 Остальное чить,процент прорастания пыльцы кукурузы на 25,63, при этом пыльцевые трубки в 2,5 раза длиннее, чем в контроле,Среда дает возможность максимально сохранить менее жизнеспособные пальцевые зерна ирасширить спектр доступной генетической изменчивости при гибридизации.Изобретение просто в применении и может быть использовано в селекционной практике с целью получения форм растений, более продуктивных и устойчивых к неблагоприятным факторам среды.5 1563641 6Сравнительные данные по действию сред на прорастание пыльцы и длину трубок линии кукурузы 0,156 ВХ,Ингредиенты среды,мас,ХКоличестСреда Иэ них проросло Длинапыльце"вых трубок, мм во изученных шт, Х пыльцевыхзерен Сахароза 25,00; борная кислота 0,01 хлористый кальций 0,03; Дифко-агар 1,2; цепозид Е 0,001.; вода остальное. Сахароза 30,00 борная кислота 0,02; хлористый кальций .0,06; Дифко-агар.1,2; цепозид Е 0 0001; вода остальное Сахароза 27,00; борная кислота 0,0; хло-" ристый кальций 0,05; Дифко-агар 1,1; цепозид Е 0,00001; вода остальноеСахароза 30,00; борная кислота 0,02; хлористый кальций 0,06; Дифко-агар 1,2; вода остальное (контроль) 1000 35 3,5+0,58 18,7 1000 276 27,6+1,41 37,5 24 2,4+0,48 16,1 1000 20 2,0+0,44 15,0 100 Составитель Е,ШкрадюкРедактор Н,Киштулинец Техред М.Дидык Корректор О,Ципле Заказ 112 Тираж 437 ПодписноеВНИИПИ Государственного комитета по изобретениям и открытиям при ГКНТ СССР113035, Москва, ЖРаушская наб., д. 4/5 Производственно-издательский комбинат "Патент", г.ужгород, ул. Гагарина,101