Способ диагностики саркоидоза

СОЮЗ СОВЕТСКСОЦИАЛИСТИЧРЕСПУБЛИК14833 9) 51)4 С 01 М 33/5 ГОСУДАРСТВЕННЫЙ КОМИТЕТПО ИЗОБРЕТЕНИЯМ И ОТНРЫТИПРИ П(НТ СССРЕИ 3303 ОПИСАНИЕ ИЗОБРЕТЕНИ АВТОРСКОМУ СВИДЕТЕЛЬСТВУ лоск оль хиальным эт рция является бронбронхоальвеолярным пользовано для диагностик арко иост такж за,данн я оценки акт э еклевания, контрения,бретения являе ти ле ивноЦел тся повысоба.ляют следующим о ью иточисоб ени С(71) 1-й Московский медицинский институт им. И.М.Сеченова(56) Авторское свидетельство СССРМ 1119656, кл. А 61 В 10/00, 1982.(54) СПОСОБ ДИАГНОСТИКИ САРКОИДОЗА(57) Изобретение относится к медицине, в частности к изучению иммунологического статуса у больных саркоиИзобретение относится к медицин именно к терапии, и может быть и разом.Бронхоальвеолярный смыв получают при проведении бронхоальвеолярного лаважа, Через канал бронхоскопа по катетеру медленно вводят стерильный физиологический раствор, подогретый до 37 С, в количестве 150 мл. Объем аспирированной жидкости, получаемой при бронхоальвеолярном лаваже, составляет примерно 403 от количества введенного физиологического раствора, т,е. в данном случае он был равен примерно 60 мл. Первые 50 пирированной жидкости отбрасыв дозом. Цель изобретения - повышениеточности диагностики саркоидоза.Пробу с надосадком бронхоальвеолярного смыва больного, а также контрольную пробу инкубируют с лимфоцитамикрови больного в течение 30+1 мин.После чего в обеих пробах определяют процент розеткообразующих с эритроцитами барана клеток и при увеличении количества розеткообразующихклеток в опыте по сравнению с контролем диагностируют саркоидоз. Посравнению с прототипом точность диагностики увеличивалась в 2,19 раза,смывомПолученный у больного при проведе- Янии бронхоальвеолярного лаважа бронмюахоальвеолярный смыв фильтруют черезкапроновое сито для удаления слизи,затем центрифугируют при 1500 об/мин15 мин, отбирают надосадок. СлРЛимфоциты периферической крови по- Млучают из 3-4 мл гепаринизированной ф 3(25 Ж/мл) венозной крови после цент- фрифугирования ее на градиенте плотности (й=1,077) при 1500 об/мин в течение 35 мин и последующего двухкрат-.ного отмывания клеток от плазмы иантикоагулянта средой 199, взвесьлимфоцитов разводят до концентрации2 х 10 клеток в 1 мл,В опытную и в контрольную пробыдобавляют по 0,1 мл взвеси лимфоцитов, В опытную пробу добавляют 0,1 млнадосадка бронхоальвеолярного смы- .148337 20 30 ва, в контрольную пробу 0,1 мл Физиологического раствора, приготовленного на Фосфатном буфере (рН 7,2).Каждую пробу тщательно перемешивают и инкубируют при 37 С 30 мин.В опытную и в контрольную пробы добавляют по 0,1 мл 0,5%-ной взвеси эритроцитов барана, приготовленной на забуференном физиологическом раст воре. После перемешивания каждой пробы инкубируют их при 37 ОС 10 мин затем центрифугируют при 1000 об/мин 5 мин, После этого инкубируют пробы в холодильнике при 4 С 18 ч.,Образо вавшийся осадок ресуспендируют, помещают в камеру Горяева и проводят подсчет розеткообразующих клеток в световом микроскопе. Если процент розеткообразуюц 1 их лимфоцитов в опытной пробе больше, чем в контрольной, диагностируют саркоидоз.П р и м е р, Больной 3 49 лет болен с апреля 1985 года, когда появился сухой кашель, одьппка, слабость,25 недомогание. При обследовании в стационаре проведена рентгенография грудной клетки, обнаружены мелкоочаговые тени диаметром 2-3 см, увеличенные прикорневые и паратрахеальные лимфатические узлы усиление легоч)ного рисунка, Было высказано предположение о наличии гранулематозного процесса в легких. С целью уточнения диагноза 30,10,85 года проведена бронхоскопия с бронхоальвеолярным лаважом и пункцией внутригрудных лимфатических узлов. Обследование больного по данному способу дало следую" щие результаты: процент розеткообразующих лимфоцитов в контрольной пробе 39%, в опытной пробе 49%, коэффициент, представляющий собой частное от деления показателя опытной пробы на показатель контрольной пробы составлял 1,29, Таким образом, у больного выявлена экспрессия Фенотипа лимфоцитов периферической крови надосадком бронхоальвеолярного смыва. Подобные результаты позволили сформулировать диагноз следующим образом.Саркоидоз с поражением внутригрудных лимфатических узлов и легких, активная Фаза течения. Изучение гистологической картины пунктата лимфатических узлов подтвердило диагноз саркоидоза (обнаружена эпителиоидноклеточная гранулема). Наличие высокой активности патологического про 7 4цесса было подтверждено последующими исследованиями, выявившими наличие выраженного лимфоцитарного альвеолита (процент лимфоцитов в бронхоальвеолярном смыве 28%, норма до 10%), повышенную экскрецию кальция с мочой (Зб 0 мг в сутки, норма до 120 мг), ускоренную СОЭ - 18 мм/ч, высокий уровень иммунного глобулина С в сыворотке (19 г/л, норма до 14 г/л). Таким образом, обследование больного по данному способу дало возможность поставить правильный диагноз, подтвердившийся при морфологической верификации, а также дать оценку активности течения заболевания, что позволило своевременно начать курс лечения кортикостероидными препаратами.Приведенный клинический пример подтверждает эффективность и диагностическую ценность предлагаемого способа диагностики саркоидоза.Было проведено сравнение точности прототипа и данного способа, Точность прототипа составляла 50-б 0%, однако при морфологической верифика-. ции диагноза и сопоставления с уточненными клиническими данными она снижалась до 42%. Точность предложенного способа составляла 92%, Таким образом, предлагаемый способ в 2,19 раз точнее прототипа, что подтверждает его большую чувствительность и диагностическую информативность по сравнению с прототипом.Предлагаемый способ прост, не требует наличия сложной аппаратуры, все реактивы, необходимые для его . осуществления, производятся в СССР. Он основан на известных теоретических предпосылках и обоснован клиническими исследованиями, что позволяет испольэовать его в пульмонологических отделениях и клиниках для диагностики саркоидоза, определения его активности и прогнозирования течения, выбора надлежащего лечения и контроля его эффективности. формула изобретения Способ диагностики саркоидоза путем исследования биологических жидкостей больных, о т л и ч а,ю щ и й с я тем, чтос целью повьппения точности 1способа, у больных берут бронхоальвеолярный смыв, центрифугируют его, вы 5 14833776деляют надосадок, инкубируют с ауто- зующих клеток и при увеличении ихлогичными лимфоцитами в течение ЗО+ числа по сравнению с контролем, не,41,0 мин, добавляют эритроциты барана содержащим бронхоальвеолярный смыв,и определяют количество розеткообра- диагностируют саркоидоэ.5Составитель В.Литовченко Редактор Н.Горват Техред М,Дидык Корректор А.Обручар Заказ 2822/42 Тираж 789 ПодписноеВНИИПИ Государственного комитета по изобретениям и открытиям при ГКНТ СССР113035, Москва, Ж, Раушская наб., д. 4/5Производственно-издательский .комбинат "Патент", г.ужгород, ул. Гагарина, 101