Способ дифференциальной диагностики туберкулеза и хронических неспецифических заболеваний легких

-ис еза П.Г О ля больного. тение относити тизиат и о зом, У бо части патологией лепробирку с О,"среды 199" боктевой в10%-ногоо использо ной диаг сн неза0,9 мл герутатем ни-. парина и 3 мл кро добавляю латина и 37 фС на ческих легких ены.раств 1 млпомещ а жери ь рмостат осажден ают в мин д шение то тностики агности роцит ГОСУДАРСТ 8 ЕННЫЙ НОМИТЕТПО ИЗОБРЕТЕНИЯМ И ОТКРЫТИЯМПРИ ГКНТ СССР(71) Московский научно следовательский институт туберкул(54) СПОСОБ ДИФФЕРЕНЦИАЛЬНОЙ ДИАГН СТИКИ ТУБЕРКУЛЕЗА И ХРОНИЧЕСКИХ НЕ-СПЕЦИФИЧЕСКИХ ЗАБОЛЕВАНИЙ ЛЕГКИХ(57) Изобретенче относится к областимедицины, в частности изиатрии. Цельюизобретения является повышение точности способа и достижение возможности диагностики у детей и подростков.Для этого у больного с неясной патологией легких берут кровь из локтевойвены, выделяют из крови лейкоциты, .подсчитывают их количество и проводят реакцию НСТ-теста путем добавления к 2 млн, лейкоцитов 0,2% нитросиний тетразолий, инкубации их при37 фС в течение часа, после чего клетки разрушают НС и образовавшийся тся к медицинеф р и, и может быт ано в целях дифференциальостики туберкулеза и хро специфических заболевая детей и подростков. изобретения является повыности дифференциальной диавозможности применения диу детей и подростков. формазан осаждают центрифугированием. Осадок формазана затем растворяют в диметилсульфоксиде и определяют оптическую плотность пробы придлине волны 492 нм (контрольная проба). Опытная проба отличается от контрольной тем, что перед постановкойреакции НСТ-теста лейкоциты инкубируют с туберкулином (ГПД-Л) при соотношении 2 млн. клеток: 5000 ТЕ в 1 млпри 37 С. Затем рассчитывают отношение оптической плотности опытной пробы к оптической плотности контрольной и при значении его, равном 0,9 именьше, диагностируют туберкулез, апри отношении, равном 1,1 и больше, - Янеспецифические заболевания легких.Использование туберкулина и объективная количественная оценка реакции,НСТ-теста с помощью спектрофотометраповышают точность способа 97% (против 80% в прототипе), появляется возможность более точной дифференциальной диагностики у детей и подрост- рков при сохранении безопасности метособ осуществляют следующим об 314833Плазму отсасывают и центрифугируют10 мин при 1000 об/мин, к осадку добавляют 5 мл "среды 199", ресуспензируют и подсчитывают количество вы 5деленных лейкоцитов в камере Горяева.В центрифужные пробирки разливаютклеточную суспензию таким образом,бчтобы в каждой пробирке было по 2 х 10лейкоцитов.Для проведения спонтанной реакциивосстановления НСТ пробирки с клеточной взвесью центрифугируют 5 минпри 1000 об/мин, надосадочную жидкость сливают, а к осадку добавляют0,2 мл 0,2 Е НСТ. Клетки ннкубируютпри 37 фС 1 ч. После инкубации про-.бирки вновь центрифугируют 1-2 минпри 1000 об/мин, к осадку добавляют 200,2 мл 1 н. НС, после чего их тщательно встряхивают и еще раз центрифугируют, Надосадочную жидкость сливают, а для растворения осадка добавляют 0,2 мл диметилсульфоксида, После 25полного растворения осадка объем жидкости доводят фосфатно-солевым буфером до 3 мл.Для проведения индуцированноготеста вначале осуществляют 1-часовую 30экспозицию лейкоцитов с туберкулином(ППД-Л) при соотношении нейтрофиловс туберкулином 5000 ТЕ в 1 мл при37 С.Оптическую плотность формазана вобразцах определяют на спектрофотометре при длине волны 492 нм против2,8 мл фосфатного буфера с 0,2 млдиметилсульфоксида, После инкубациис туберкулином клетки обрабатываютсякак описано выше.Рассчитывают отношение оптической плотности опытной и контрольнойпроб и при отношении 0,9 и менее диагностируют туберкулез, а при 1,1 иболее - хроническое неспецифическоезаболевание легких,П р и м е р 1. Больной В., 12 лет,поступил для уточнения диагноза, Заболевание выявлено методом флюорографии. Контакт с туберкулезным больнымотрицает, Вакцинация Б 511 в родильномдоме, поствакцинальный рубчик 5 мм.Туберкулиновые пробы с 2 ТЕ положительные в течение последних двух лет.11 ри поступлении жалоб нет, В легких .притупление перкуторного звука с обеих сторон, хрипов нет, На рентгенограмме грудной клетки обнаруживают 654ся инфильтративные изменения в верхних отделах легких с обеих сторон.гОбщий анализ крови: лейкоциты 4600, эозинофилы .1, нейтрофилы 51, лимфоциты 38, моноциты 10, п/я 4, ге моглобин 66, эритроциты 4, ц.п. 0,8, СОЭ 5 мм, НСТ-тест-спонтанная реакция 301 ЕД, индуцированная реакция ыа туберкулин 210 ЕД, отношение опти" ческой плотности опытной и контрольной проб равно 0,7. В результате полученных данных и на основании НСТ- теста заподозрен инфильтративный туберкулез легких. Тест-терапия и динамическое наблюдение за рентгенограммами грудной клетки подтвердили клинический диагноз.П р и м е р 2.Больной С 14 лет, поступил в институт для уточнения диагноза, Контакт с туберкулезным больным отрицает. Вакцинация БЦЖ в родильном доме, ревакцинация в первом классе имеет два поствакцинальных рубчика. Туберкулиновые пробы положительные с 2 ТЕ, Заболевание выявлено 25/1-84 года, когда обнаружены изменения в легких и внутригрудных лимфатических узлах с обеих сторон. При поступлении жалобы на кашель с мокротой, одышка при физической нагрузке. В легких при аускультации жесткое дыхание и сухие хрипы с обеих сторон, На рентгенограмме грудной клетки обнаруживаются усиление легочного рисунка и расширение корней легких с обеих сторон. Общий анализ крови: лейкоциты 6300, нейтрофилы 52, лимфоциты 36, моноциты 11, п/я 3, гемоглобин 78, эритроциты 5,0, ц.п.0,8, СОЭ 15 мм. НСТ-тест-спонтанная; реакция 242 ЕД, индуцированная реакция на туберкулин 310 ЕД. Отношениеоптической плотности опытной и контрольной проб равно 1,3. На основании анамнеза, клинико-рентгенологической картины и данных НСТ-теста был заподозрен хронический бронхит, Неспецифическая тест-терапия и клинико-рентгенологические данные в динамике под" твердили диагноз хронического бронхита.П р и м е р 3Больная К., 7 лет, поступила в детско-подростковое отделение РЛИ 1 Т ЕЗ РСФСР для уточнения диагноза. Заболевание выявлено при профосмотре. Контакт с туберкулезным больным не установлен, При поступлении жалобы на слабость, снижение аппеФормула изобретения Способ дифференциальной диагностики туберкулеза и хронических неспецифических заболеваний легких пу тем постановки реакции НСТ-теста, .отличающийся тем, что, с целью повышения точности способа и возможности применения диагностики у детей и подростков, постановку реакции НСТ-теста проводят с туберкули- .ном, затем добавляют в пробу диметилсульфоксид, измеряют оптическую плотность полученного раствора, рассчитывают отношение опытной пробы к конт О рольной и при его показателе 0,9 именее диагностируют туберкулез, а при 1,1 и более - хроническое неспецифическое заболевание легких. Составитель А.Яхъяев Редактор Н.Горват Техред М.Дцдык Корректор А.ОбручарЗаказ 2822/42 , Тираж 789 Подписноег ЬЬВНИИПИ Государственного комитета по изобретениям и открытиям при ГКНТ СССР113035, Москва, Ж, Раушская наб., д. 4/5 Производственно в издательск комбинат "Патент", г.ужгород, ул. Гагарина,101 5 ,14833тита и потливость. В легких хриповнет, На рентгенограмме грудной клетки.корень правого легкого незначительно расширен, наружный контур его5слегка волнистый, Умеренно сужен просвет правого верхнедолевого бронха,Реакция Манту с 2 ТЕ 20 мм, НСТ-тест:спонтанная реакция (контроль)220 ед.опт,пл., индуцированная реакция на туберкулин (опыт) - 198 ед, опт.пл.Отношение оптической плотности опытной и контрольной проб равно 0,9Клинический диагноз: туберкулез внутригрудных лимфатических узлов справа 1 бв фазе инфильтрации, БК(-),После назначения противотуберкулезной терапии: стрептомицин 20 мг/кг,изониаэид 15 мг/кг, ПАСК 200 мг/кг нафоне витамино-десенсибилизирующейтерапии отмечена положительная клиникорентгенологическая динамика.П р и м е р 4. Больной Г., 10 лет,поступил в детско-подростковое отделение МНИИТ МЗ РСФСР для уточнения 25диагноза, Заболевание выявлено по обращаемости в августе 1983 года. Припоступлении жалобы на сухой кашельи одьппку. В легких хрипов нет. Нарентгенограмме легких с обеих сторонперибронхиальные и периваскулярныеуплотнения, преимущественно в прикорневой зоне, расширение корней легких,усиление легочного рисунка эа счетичтерстициальных изменений, уплотнение медиастинальной и междолевойплевры.Функция внешнего дыхания: нарушение легочной вентиляции 111 ст.,рестриктивный тип 111 ст. РеакцияМанту с 2 ТЕ - 5 мм, НСТ-тест; спонтанная реакция (контроль) 60 ед.опт.пл,индуцированная реакция на туберкулин 65 6(опыт) 66 ед.опт,пл, Отношение оптической плотности опытной и контрольной проб равно 1,1. Клинический диагноз: идиопатический фиброэирующий альвеолит,Применение предложенного способа дифференциальной диагностики с помощью НСТ-теста с оценкой спонтанной и индуцированной реакцией на туберкулин позволяет с большей точностью исключить или подтвердить туберкулезную этиологию неясной патологии легких у детей.Точность способа повьппается на 17 и достигает 977 Исключается субъек" тивиэм при оценке результатов анализа благодаря объективной количественной оценке результатов анализа с помощью спектрофотометра, метод становится доступным для выполнения без специалиста-цитолога, что расширяет сферу его применения.