Штамм микромицета моrтiеrеllа sp. для получения кормовой добавки из люцерны

(51 оо// :645) С 12 М 1/14, А 23 (С 12 И 1/14, С 12 ЫЙ НОМИТЕТМ И ОТНРЫТИЯМ ОСУДАРСТВЕНПО ИЭОБРЕ 1 ЕИпРи Гннт сссР САНИ ИЯИзобретени логии, в част мовых добавок ется нового шт получения кор относится к микности к получениюдля животных иамма микромицетамовой добавки.етения являетсяштамма микромицетниноцеллюлозный к ор- садл олу раз Целью изоение нового агающего ли АВТОРСКОМУ СВИДЕТЕЛЬСТВУ 41 75656/31-1304 .12,8607.04.89, Бюл. Р 13Институт ботаники АН ЛитССРР.Н. Варнайте, А.Ю. ЛугакскаМикульскене и В.П. Кучюкас576.8 (088.8)Авторское свидетельс7676, кл . С 12 М 15/ КРОМИЦЕТА МОКТ 1 ЕВЕ 1 НИЯ КОРМОВОЙ ДОБАВ е относится к микротности к получению к для животных, и плекс люцерны., Штамм микромицета выделен из почвы, ид пО определителям, еТа бы рода Могй 1 еге 11 а А.Н. Милько "Определ ных грибов", 1974 и А.В. Милько "Атлас м бов", 1971. Штамм де Всесоюзной коллекции микроорганизмов подКультурально моРФ ,наки. Могеге 11 а зр. ентиФицированХалабуда "ГриСоешаиз", 1973, итель мукораль- Н.М. Пидопличко укоральных грипонирован во пр омьппп енных1 Ф РД.ологические приз касается нового штамма микромицетадля получения кормовой добавки.Целью изобретения является получениенового штамма микромицета, разлагающего лигниноцеллюлозный комплекслюцерны. Штамм микромицета Мог 1 еге 11 а зр, ВКМ РД депонированво Всесоюзной коллекции микроорганизмов. Штамм позволяет получитькормовую добавку из стеблей люцерны,содержащую 14,3457. общего белка,9,253 истинного белка, 24,587 целлюлозы, 7,247 лигнина, 4,737. Редуцирующих веществ, и увеличить перевариваемость люцерны на 21,4-30,27.1 табл. Воздушный мицелий белый. Спорангиеносцы цилиндрически шаровидные,150-350 длины, диаметр у верхушки 2-3 р со слегка выпуклой поперечной перегородкой, с мелким зубовидным выступом, диаметр у основания бИ с 2-3 боковыми веточками вверху. Веточки спорангиеносцев прямые, простые или с 1"3 короткими веточками, иногда стерильные и тогда часто .проФилируют длинной гифой, Спорангии шаровидные,20-35 р в диаметре, много споровые. Спорангиоспоры округло-угловатые, частично зллиптически-шаровидные, в диаметре 4-10 ц,хламидоспоры немногочисленные, различной Формы, около 20 р в диаметре прио культивировании штамма при 28 С в, течение 5-7 сут.На сусло-агаре образует войлочную ,колонию без зон, местами с редкими1470763 р овальную бумагу, на ль ня ном полотне и голодной среде.Штамм поддерживают на сусло-агаре и агаризованной среде Чапека-Докса. Пересевы проводят 2 раза в год. Штамм хранят на сусло-агарепри 8+2 С.Получение кормовой добавки.П р и м е р 1. 0,5 г измельченных сухих стеблей люцерны изменчивой (Мейса 8 о агфа Магйуп) помещают в пробирки, стерилизуют 0,5 часа при 0,5 атм. В каждую пробирку вносят по 1 мл 7-дневного инокулята гриба МогСхеге 11 а зр, ВКИ РД, вырао щенного на пивном сусле при 25-26 С, пробирки помещают во влажную камеру и выдерживают при 28-30 С в течение 20-30 сут.Полученную массу используют как добавку к грубым кормам.В кормовой добавке исследуют содержание белка и потери лигнина и . целлюлозы.Данные изменения содержания белка, целлюлозы и лигнина в люцерне изменчивой приведены в таблице. Увеличение Потребление, % Времякультивисодержаниябелка по сравнению с нативной люцерной целлюлозы рования,сут на 4,43 6,32 20 19, 31 36, 26 30 25, 50 40, 16 Содержание белков, лигнина и целлюлозы в стеблях нативной люцерны изменчивой: 13,68; 12,10, 33% сухого вещества соответственно, После культивирования штамма в течение 20 сут содержание указанных веществ изменилось: 14,287; 7,713; 26,63% соответственно. После культивирования штамма 30 сут. наблюдалось дальнейшее изменение содержания указанных веществ; 14,345; 7,241; 24,585%.Удаление четвертой части лигнина из растительных субстратов увеличивает их перевариваемость от 15 до 60%.П р и м е р 2, Стебли люцерны желтой (Мейдсао Еа 1 зайа Ь.), подготовленные аналогичным образом, как и в примере 1, засевают грибом МаюйеМаркерных признаков штамм неимеет.55Гриб способен расти на различных средах: сусло-агаре, среде ЧапекаДокса, содержащей в качестве единственного источника углерода фильтлопастями, расположенными непрерывной розеткой, воздушный мицелий белый,На среде Чапека-Докса - воздушный5мицелий обильный, белый, более редкий и низкий, чем при росте на сусло-агаре, почти без лопастей. На7-й день культивирования колониипокрывают поверхности чашки Петри.При росте на среде с кукурузнымэкстрактом - мицелий белый, болеепушистый, с паутинистым краем, вцентре колонии отмечается сгущениемицелия. 15При росте на голодном агаре образует паутинистый налет, отмечает,ся интенсивное плодоношение. Мицелийбелый, часто пронизывающий субстратили стелящийся на поверхности. 20При росте на среде из почвы сагаром образуется редкий белый мицелий, рост менее интенсивный, чемна других агаризованных средах, от"мечается интенсивное плодоношение. 25При посеве на дистиллированнойводе образуются светлые редкие хлопкообразные комочки, на которых отмечается плодоношение гриба,При выращивании на обычных агаровых средах: сусло-агаре и в средеЧапека-Докса при 24-28 С в течение7 сут культивирования мицелий чашевсего спорангиев не образует, В условиях голодания (на стерильной дис,тиллированной воде или слабом физио 35логическом растворе О, 2-0, 3% ЯаС 1в дистиллированной воде) при тех жеусловиях культивирования нлодоношение культуры проявляется незначительно. Более интенсивно спорообразование отмечается"при выращиваниимицелия на вытяжке из почвы с агаромфи на голодном агаре.Физиолого-биохимические признаки.Растет аэроб при 10-37 С, оптимальная 20-28 С.Отношение к рН: оптимум роста при4,6-5,0.Отношение к источникам углерода;ассимилирует глюкозу, мальтозу, крах. мал, целлюлозу и лигнин.1П р и м е р 3. Способ получения стандартного препарата. Количество используемой люцерны изменчивой (стебли) 5 кг, ее влажность 60-65, культивировалось в ферментере емкостью 10 л. При равном распределении посевного материапа полное поформула изобретения Составитель Т. ПолянскаяТехред Л.Сердюкова Корректор С ЧеРни Редактор Н. РогуличЗаказ 1551/29 Тираж 501 ПодписноеВНИИПИ Государственного комитета до изобретениям и открытиям при ГКНТ СССР113035, Москва, Е, Рауаская наб д. 4/5 Производственно-издательский комбинат "Патентфф, г.ужгород, ул. Гагарина, 101 б 14 ге 11 а зр. ВКМ РД и культивируют, как описано в примере 1.После 25-30 сут культивирования обнаруживаются 39,37 Х потери лигнина и 28,763 целлюлозы и увеличение содержания белка (6,737 по сравнению с контролем).Нативная форма стеблей люцерны желтой содержала 10,923 белка, 13,6 Х лигнина и 29,67 целлюлозы.После 25-30 сут культивирования обнаруживается изменение содержания бепков, лигнина и целлюлозы; 11,65;8,246; 21,0853 соответственно. 70763 екрытие стерильного субстрата мицелием при 28 С достигается на 710 сут. Это удалось достигнуть припомощи интенсивной аэрации субстрата (расход воздуха 3 л/мин). Безаэрации такой рост достигается за25-30 сут.Выход сухого вещества в полученном продукте 65,423, содержащего,Х:общий белок 14,345; истинный белок9,25; целлюлоза 24,58; лигнин 7,24;редуцнрующне вещества 4,73.Перевариваемость продукта увеличивается от 21,4-30,23 в зависимостиот срока скармпивания и вида животных,20Штамм микроюцета Могй.етеПа зр.ВКМ ГД для получения кормовойдобавки иэ люцерны.