Способ идентификации микроорганизмов рода brucella

Номер патента: 1386661

Авторы: Драновская, Куликов

ZIP архив

Текст

Клетки ФМЭ ФХ Вгцсе 11 ааЬогцв 99 20,3+0,5 30,5+2)0 Втцсе 11 аочдв 66/6 37,5+0,8 21,90,4 Вгцсе 11 асапдвВМ 6/66 20,4+0,4 34,51,2 Изобретение относится к медицинской микробиологии и касается иден"тификации микроорганизмов рода Втцсе 11 а.5Цель изобретения - повышение точности способа.П ри м е р. Выращенные на питательной среде культуры, находящиесяв стационарной фазе роста, смывают 10и отмывают 4-кратно центрифугирова"нием фосфатным буфером рН 7,0. Косадку клеток добавляют 5-кратныйобъем ацетона и оставляют на 2"3 нед.После проверки на специфическую стерильность клетки отделяют от ацетона центрифугированием. Полученныйосадок промывают ацетоном и диэтиловым эфиром центрифугированием иокончательно высушивают в вакуум" 20эксикаторе, Высушенные убитые микробные клетки экстрагируют 50 млсмеси хлороформа и метанола, взятыхв соотношении 2;1. Полученный экст 1ракт отфильтровывают и анализируюттонкослойной хроматографией на силикагеле в системе хлороформ - метанол - вода. После хроматографиифосфолипиды обнаруживают раствором57.-ной фосфорно-молибденовой кислоты в этаноле.В опытах используют следующие10 культур бруцелл: классическиекультуры В. ще 1 дгепвдв 565, В. аЬогтцв 99, В. аида 40, В. осада 66/6, 35В. сапдв КМ 6/66, В. пеоаовае 5 КЗЗ,культура Р 513 и культуры бруцеллУ 4, 11 и 12. В качестве ,гетерологичных культур используют БМее 11 аЙувепаетда АЗ, ЕвЬегдсЬда со 1 д 07 К Нф 40и детвдпда епегосо 1 дтуса 0:9. Вклетках Вгисе 11 а обнаруживают кардиолипин, фосфатидилглицерин, фосфатидилэтаноламин, фосфатидил-(И-метил)этаноламин, фосфатидил-(Н,Б-диметил)этаноламин, фосфатидилинозит, фосфатидилхолин и фосфатидилсерин,Сходные по серологическим признакамс Вгцсе 11 а микроорганизмы У. епсегосо 1 дгуса 0:9, БЬ. Йувептегда иЕ. со 1 д имеют другой набор фосфолипидов, Все изученные культуры Вгисе 1"1 а имеют одинаковый качественныйсостав фосфолипидов. В клетках 10культур Вгцсе 11 а обнаруживается фосфатидилхолин и фосфатидил-(11-метил)ъэтаноламин, которые отсутствуют умикроорганизмов, сходиых с ВгисеПапо серологическим признакам. В таблице приведено содержание фосфатидилхолина (ФХ) и фосфатидил- "(11"метил) этаноламина (ФМЭ) в составе фосфолипидов клеток некоторых видов Вгцсе 11 а. Содержание, 7. от суммы фосфолипидов клеток Как видно из таблицы, по количественному содержанию ФХ и ФМЭ клетки Вгцсе 11 а близки, что значительно повьппает точность способа идентификации микроорганизмов Втисе 11 а. Использование способа позволит повысить точность идентификации бактерий рода Втцсе 11 а за счет того, что возможно проведение анализа содержания фосфолипидов клеток на одной культуре многократно (повышается стандартность исследования), для анализа используют собственный липидный компонент бактерий, при" чем содержание ФХ и ФМЭ можно определять количественно по содержанию фосфора с фосфолипидах. формула изобретения Способ идентификации микроорганизмов рода Втцсе 11 а путем выращивания исследуемой культуры на питательной среде с последующим проведением тонкослойной хроматографии и определением продуктов метаболизма, о т л ич а ю щ и й с я тем, что, с целью повьппения точности способа, полученную биомассу бактерий обрабатывают ацетоном, экстрагируют смесь хлороформа и метанола, взятых в соотношеСоставитель А. ЗавадскаяТехред М. Ходанич Корректор Г. Решетник Редактор В. Петраш Заказ 1471/31 Тираж 520 Подписное ВНИИПИ Государственного комитета СССР по делам изобретений и открытий113035, Москва, Ж, Раушская наб д, 4/5 Производственно-полиграфическое предприятие, г. Ужгород, ул. Проектная, 4 з 13866614нии 2:1, хроматографию проводят с -(В-метил) этаноламина устанавливают полученным экстрактом и при наличии принадлежность исследуемой культуры в нем фосфатидилхолина и фосфатидил- к роду Вгисе 11 а.

Смотреть

Заявка

4126823, 03.10.1986

НАУЧНО-ИССЛЕДОВАТЕЛЬСКИЙ ИНСТИТУТ ЭПИДЕМИОЛОГИИ И МИКРОБИОЛОГИИ ИМ. ПОЧЕТНОГО АКАД. Н. Ф. ГАМАЛЕИ, НАУЧНО-ИССЛЕДОВАТЕЛЬСКИЙ ИНСТИТУТ БИОМЕДИЦИНСКОЙ ТЕХНОЛОГИИ

КУЛИКОВ ВАСИЛИЙ ИВАНОВИЧ, ДРАНОВСКАЯ ЕЛИЗАВЕТА АЛЕКСАНДРОВНА

МПК / Метки

МПК: C12Q 1/04

Метки: brucella, идентификации, микроорганизмов, рода

Опубликовано: 07.04.1988

Код ссылки

<a href="https://patents.su/3-1386661-sposob-identifikacii-mikroorganizmov-roda-brucella.html" target="_blank" rel="follow" title="База патентов СССР">Способ идентификации микроорганизмов рода brucella</a>

Похожие патенты