Способ оценки активности воспалительного процесса при гломерулонефрите у детей

(51)4 А 61 К 39/02 ОПИСАНИЕ ИЗОБРЕТЕНИЯй А ВТОРСНОМУ СВИДЕТЕЛЬСТВУ ГОСУДАРСТВЕННЫЙ НОМИТЕТ СССРПО ДЕЛАМ ИЗОБРЕТЕНИЙ И ОТНРЫТИЙ(54) СПОСОБ ОЦЕНКИ АКТИВНОСТИ ВОСПА-ЛИТЕЛЬНОГО ПРОЦЕССА ПРИ ГЛОМЕРУЛОНЕФРИТЕ У ДЕТЕЙ(57) Изобретение относится к нефрологии. Цель изобретения - повышениеточности способа, В две пробиркивносят инкубационную среду, кровь сгепарином и раствор адреналина.Смесь перемешивают и инкубируют. Вопытную пробирку вносят взвесь опсонизированных микробов, а в контрольную - инкубационную среду. После инкубации и центрифугирования супернатант подвергают спектрофотометрии ипроизводят расчет фагоцитарного показателя.1 13173Изобретение относится к медицине,к нефрологии детского возраста, точнее к способам оценки активности воспалительного процесса в почках попоказателю фагоцитарной активности.Цель изобретения - повышение точности способа.Способ осуществляют следующим образомеПредварительно опсонизируютмикробы 10Мстососсцз 1 дводеЖсцз, для чего10 мг микробов суспендирун т в 1,0 млсмешанной сыворотки,представляюшейпулот 10 и более доноров. Инкубацию выполняют 30 мин при 37 С при перемешивании. Субстрат центрифугируют 10 минпри 4000-5000 об/мин и надосадок декантируют. Осадок промывают 2-3 раза в 3,0 мл инкубационной среды и после заключительного центрифугирования ресуспендируют в 1,0 мл инкубационной среды. Полученный препаратпредставляет собой взвесь опсонизированных микрококков,Состав инкубационнои среды - физии25ологический раствор с концентрациями, ммоль/л: глюкоза 5,55; СаС 1 ь 0,9,"КС 1 4,5.Раствор адреналина тартрата:0,37.-ный раствор на инкубационнойсреде,Кровь для исследования забирают упациента из локтевой вены утром натощак и смешивают с гепарином из расчета 5 ед/мл крови. Для анализа достаточно 0,3 мл крови.Определение выполняют в пластиковых или силиконизированных стеклянныхпробирках. В две пробирки (опытную иконтрольную)вносят по 1,0 мл инкубационной среды, по 0,1 мл гепаринизированной крови, подлежащей анализу,и по 0,1 мл О,ЗЕ-ного раствора адреналина тартрата. Смесь перемешиваюти инкубируют 5-10 при 37 С. Далее в 45опытную пробирку вносят 0,15 мл взвеси опсонизированных микробов, а. вконтрольную 0,15 мл инкубационнойсреды. Смесь перемешивают и инкубируют 12015 мин при 37 оС, Пробирки 50центрифугируют 5 мин при 4000 об/мини супернатант подвергают спектрофотометрии при 480 нм,Результат рассчитывают по формуле1,35 х 1000 55= Е х 355 мкмоль О(120 мин)0,1 млкрови 6 2где Е - экстинкция опыта;Е - экстинкция контроля;1,35 - общий объем реакционнойсмеси, мл;1000 - коэффициент пересчета,мкмоль;3,8 - коэффициент молярной экстинкции адренохрома при480 нм,П р и м е р 1, Оценка активности воспалительного процесса у ребенка А.А., 13 лет, от 05.0784 г. Клинический диагноз: гломерулонефрит,нефротическая форма.111 степень активности, Фагопитарныйпоказатель596 мкмоль О.11 р и м е р 2, Оценка активностивоспалительного процесса у ребенкаП.А., 6 лет, от 30,01,85 г. Клинический диагноз: гломерулонефрит, нефротическая форма,111 степеньактивности Фагоцитарныйпоказатель329 мкмоль ОП р и м е р 3. Оценка активности воспалительного процесса у ребенка М,Ф 4 года, от 14,1184 г. Клинический диагноз; гломеруланефрит,нефротическая форма,11 степень активности. Фагоцитарныйпоказатель259 мкмоль ОП р и м е р 4. Оценка активностивоспалительного процесса у ребенкаД.С., 6 лет, от 04.08.81 г, Клинический диагноз: гломерулонефрит, нефротическая форма.0-1 степень активности,Фагоцитарныйпоказатель1 О мкмоль ОИспользование предлагаемого способа обеспечивает по сравнению с известным ряд преимуществ. Опсонизированные частицы микрококка, использованного в предлагаемом способе, существенно влияют на супероксидобразующую функцию фагоцитирующих гранулоцитов в цельной крови по сравнению с другими изученными частицами опсонизированного стафилококка, синегнойной палочки и угля, Статистическая обработка материала выявила достоверность для всех случаев при РсО,О 01. Использование опсонизированного эимоэана в качестве стимулятора супероксидобразующей функции фагоцитоэа не позволяет выявить существенные разСоставитель П, БондарцевРедактор Н, Тупица Техред А.Кравчук Корректор Н. Рогулич Заказ 1914/6 Тираж 596 Подписное ВНИИПИ Государственного комитета СССР по делам изобретений и открытий 113035, Москва, Ж, Раушская наб., д.4/5Производственно-полиграфическое предприятие, г. Ужгород, ул, Проектная, 4 3 131173 личия активности воспалительного процесса при гломерулонефрите и этот недостаток зимозанового способа может быть устранен в предлагаемом микрококковом способе. При выраженной активности воспалительного процесса при нефротической форме гломерулонефрита показатели супероксидобраэующей функции существенно выше, чем при минимальной степени активности 10 вне, зависимости от глюкокортикоидной терапии при Р0,001. При применении предлагаемого способа по сравнению с известным в 5 4,7 раза увеличивается точность определения активности воспалительного процесса. 6Формула иэ обретенияСпособ оценки активности воспали" тельного процесса при гломерулонефрите у детей путем забора крови, внесения в нее фагоцитируемых частиц с последующей регистрацией результатов реакции фагоцитоза, о т л и ч а ю - щ и й с я тем, что, с целью повыше" ния точности способа, в качестве фагоцитируемых частиц используют опсо- ниэированные микроорганизмы Истососсцв 1 войед 1 сйсцв, а регистрацию реакции фагоцитоза осуществляют по выявлению супероксида 0- и прн его концентрации 396+197 мкмоль устанавливают высокую степень, а при 112 + 25 мкмоль - низкую степень актйвности воспалительного процесса.