Способ постановки реакции пассивной гемагглютинации

(54) СПОСОБ ПО СИВНОЙ ГЕИАГГЛВТИН (57) Изобретен биологии, имму для оценки тит е относится к микроологии, предназначен ов иммунных сыворото госуддРстненный номитет сссРпо делАм изОБРетений и отнРытии(56) Наставление поностикумов сальмонцитарных, жидких иТУ 42.14,119-77. Пель изобретения - повышение чувствительности реакции пассивной гемагглютинации (РПГА), в частности при падении титров иммунных сывороток при превышении срока хранения препаратов. Проводят параллельные постановки РПГА с б сальмонеллезными диагностикумами, ннкубируя эритроцнтарный диагностикум, сенсибилизированный бактериальными антигенами с иммунными сыворотками в изотоническом растворе хлорида натрия. В изотонический раствор добавляют полнэтиленгликоль 6000 до конечной концентрации 1,5 Е. Учет результатов реакции прово" дят через 2-2,5 ч инкубацни. Титром р реакции считают наибольшее разведеЖ ние иммунной сыворотки, при котором наблюдается полная агглютинация эритроцитов.1299585 2 Изобретение относится к микробио- Повышение чувств логии и иммунологии и может быть ис- выразившееся в увел пользовано в оценке титров иммунных следовянных сттворот сывороток. для диягностикума с Целью изобретения является повьште геном К 2138 от 4 ра ние чувствительности реакции пассив- групп С, и А до 16 ной гемагглютинации (РПГА), в част- группы Е); для диаг ности при падении титров иммунных сы- геком К от 2 раз Э вороток вследствие хранения препара- групп Е, С, С)о до тов свыше установленного срока, 10 сыворотки группы А) П р и м е р 1. Проводилась парал- ма с антигеном гру лельная постановка РПГА с шестью саль- ля иагностик ма сТаким образом, при постановке стормула изобретения монеллезными диагностикумами известным и предлагаемым способами, Реакцию проводили микрометодом с использованием микротитратораТакачири37 С,Использовали сальмонеллезные эритроцитарные диагностикумы со следующими антигенами: комплексный К 2138;комплексный К; группы С - 6,8 К 1783;группы А - 1,9,12 К 1892; группы ЕК 1853; группы Д - К 1854, Реакциюставили через год после истечениясрока хранения эритроцитарных диагностикумов, Диагностикумы хранилиопри 4 С, согласно инструкции,В РПГЛ также использовали стандартные иммунные сыворотки групп Д,С С, А (рабочий титр 1:6400), А(рабочий титр 1:3200) и Е.В известном способе сыворотки разводили 085%-ным (0,15 М) растворомхлорида натрия рН 7,2-7;4.В предлагаемом способе сывороткиразводят 0,85%-ным (0,15 М) раствором хлорида натрия, в которои вводятполиэтиленгликоль 6000 мМ до концентрации - 2% (2 г полиэтиленгликоляразводят 0,85%-ным хлоридом натрия идоводят объем до 100 мл). Окончательная концентрация полиэтиленгликоля всистеме после внесения диагностикумасоставила 1,5%.Постановку реакции осуществлялисигласно наставленив по использованию диагностикумов. Учет результатов реакции проводят после 2,0-2,5 ч инкубации в термостаоте (37 С) общепринятым методом.Повышение титров реакции при введении полиэтиленгликоля в конечной концентрации 1,5% наблюдали со всемтл указанными антигенами, Титром реакции считали наибольшее разведение иммунной сыворотки, при котором еще наблюдалась полная агглютинация эритроцитов. ительности РПГА,ичении титров исок, составило:комплексным антиз Здля сывороток(для сывороткиностикума с антидля (дитя сывороток8 раз Эдля (длядля диагностикуппы С - в 5 раз д д у антигеном группы А - в 3-5 раз; для диагностикума с антигеном группы Е - в 2 раза, для диагностикума с антигеном грУппы Д - в 16 раз.П р и м е р 2, Реакции проводят, как описано в .примере 1, но сывороттси разводили 0,85%-ным раствором хлорида натрия с введением полиэтиленгликоля 6000 мМ до концентрации 1% (окончательная тсттцентрация полиэтиленгликоля в системе 0,75%). Введение полиэтиленгликоля в конечной концентрации 0,75% практически не изменяет титра реакции,П р и м е р 3, Реакцию проводят,как описано вьпде, но сыворотки разводили 0,85%-ттьттл раствором хлорида натрия с введением полттэтиленгликоль6000 до концентрации 3% (окончательная концентрация полиэтиленгликоляв системе 2,5%). Увеличение концентрации полиэтиленгликоля в системе кдальнейшему повышению титров реакции не привело, однако при этом наблюдалось спонтанная агглвтипация контрольных образцов.Положительные результаты с сыворотками других групп (янтиген группы Л 1, 2, 12 К 1892) с сывороткой группы Д связаны с наличием общих рецепторов 1,12 в группе А и 1,12 в группе Д,РПГА с иммунными сяльмрнеллезными сыворотками в присутствии 1,5 ПЭГ6000 приводит к првтштенив чувствительности способа в 2-16 раз. Кроме того, этот прием позволяет использовать для анализа котлмерческие сыворотки со сроком хранения свьште установленного времени. Способ постановки реакции пассивной гемягглвтинации путем инкубапии эритроцитярного диягностикума, сенсиСоставитель Л. ПодюковРедактор М. Циткина Техред В,Кравчук Корректор Л. Патай Заказ 957/3 Тираж 596 Подписное ВНИИПИ Государственного комитета СССР по делам изобретений и открытий 113035, Москва, Ж, Раушская наб., д. 4/5,Производственно-полиграфическое предприятие, г. Ужгород, ул. Проектная, 4 3 299585 4билиэированного бактериальными анти- целью повышения чувствительности спогенами с иммунными сыворотками в изо- соба, в изстонический раствор добавтоническм растворе хлорида натрия, ляит полизтиленгликоль 6000 до конечо т л и ч а м щ и й с я тем, что, с ной концентрации 1,5 Е