Способ определения устойчивости растений к вирусным заболеваниям

(71) Институт птеза АН СССР исова ловым спиртом, содержащим 0 0,2 моль 1,С 1, а в качестве го-биохимических показателе зуют нолярограмму и оптичес Физиоло- испольую пл вости растеиям судят по тойчивости,ность, причем об устоич ний к вирусным заболева величине коэффициента у определяемого по формул Б.А.Киселе где К А2 рау расих компонентов и енных и контрольны ений соответственн В и В раженного и растений, мм тение относят волны д онтрольног иК (1 ра 1 м к вирусн К 1-к н м и му заболеваустойчивым. усто а УДАРСТВЕННЫЙ КОМИТЕТ СССР ДЕЛАМ ИЗОБРЕТЕНИЙ И ОТНРЫТИ К АВТОРСКОМУ СВИ л. У 38чвоведения и фотосинГУ им. М,В. Ломоно(72) Е.П, Супонева,в и М,Е.Ладыгина(54)(57) СПОСОБ ОПРЕДЕЛЕНИЯ УСТОЙЧИВОСТИ РАСТЕНИЙ К ВИРУСНЫМ ЗАБОЛЕВАНИЯМ, включающий заражение растений вирусам, выделение биоорганических компонентов из листьев растений и определение их Физиолого-биохимических показателей, о т л и ч а ющ и й с я тем, что, с целью сокращения времени, трудозатрат и расхо - да материалов, выделение биоарганических компонентов из листьев растений проводят экстракцией 967-ным этиэффициент устойчивостиотносительных единицах;тические плотности экстгирования биоорганичесотносительных единицах;высоты полярографической128Изобретение относится к биологии,в частности к диагностике устойчивости растений к фитопатогенным поражениям, и может быть использовано вселекционной практике для отбора новых сортов растений на устойчивостьк вирусной инфекции.Целью изобретения является сокращение времени, трудозатрат и расходаматериалов.Способ осуществляется следующимобразом.П р и м е р. Исследуют растениятабака двух видов: М 1 со 1 апа аЬасща,сортов Трапезонди Самсун 4-28,неустойчивых к вирусу табачной моза.ики (ВТИ), сорта Самсун 3073, устойчивого кВТИ, и И 1 сопапа 81 цспоза,устойчивого к ВТМ, а также растениясои сорта Приморский 494, неустойчивого к вирусу мозаики сои (ВМС).Растения выращивают до появлениялистьев четвертого яруса. Затем отрастения отделяют листья 2-4 яруса,обрабатывают их вытяжкой из системно пораженного ВТИ растения и помещают во влажную камеру (на 24-28 ч).Через 24-48 ч (до появления видимых симптомов заболевания) из зараженных листьев готовят вытяжку следующим образом: навеску 0,5 г зараженных листьев растирают в 1 О мл 967-ного этилового спирта, содержащего0,05-0,2 моль Ь 1 С 1 (или другой нейтральной соли) в течение 2-3 жнпри комнатной температуре (18-25 С),Концентрация соли ниже 0,05 мольнедостаточна для обеспечения электропроводности раствора при полярографических измерениях; повышение. концентрации ЬС 1 вьппе 0,2 моль приводит к изменению экстрагируемостилипидных и белковых веществ из листьев,Затем вытяжку фильтруют. Послеэтого 3-5 мл вытяжки помещают в полярографическую ячейку и из раствора удаляют кислород продувкой инертным газом (азот, аргон или гелий) втечение 8-10 мин. Затем снимают по 8949 2лярограмму обескислороженного раствора в диапазоне потенциала от 0,8до 1,5 В относительно насыщенногокаломельного электрода при комнатной 5отемпературе (18-25 С) со скоростью0,5 В/мин на полярографе ОН(ВНР)Скорость 0,5 В/мин подобрана экспериментально. Высоту полярографической 10 волны В (мм) замеряют при потенциале от 1,5 до 1,4 В, Параллельно сэтим оставшуюся часть вытяжки помещают в кювету для оптических измерений и при длине волны 652 нм опре деляют оптическую плотность А в относительных единицах Я,Холл, К.Рао.Фотосинтез.М.: Мир, 1983, с, 44) наспектрофотометре СФ,В качестве контроля используют 20 вытяжки из здоровых растений, для ко торых также определяют высоту полярографической волны В (в мм) и опти-ческую плотность А в относительныхединицах.25Измерив высоты полярографическихволн (В, и В) и оптическую плотность (А, и А) вытяжек, рассчитывают коэффициент устойчивости по урав- нению В таблице приведены средние значения, рассчитанные из трех-пяти изЗ 5 мерений.Как видно из таблицы, значениеК ) 1 для И.аЬасиш сортов Трапезонд.93 и Самсун 4-28, что свидетельствует о том, что эти сорта неустойчивы к ВТИ, в то время как для сорта Самсун 3073 и Ж.АЙ 1 поза К 1, что свидетельствует о том, что данные растения устойчивы к ВТМ, Для сои 45сорта Приморский 494 К ) 1 что ха 9рактеризует этот сорт как устойчивый к ВМС.Зти данные по устойчивости различных сортов табака и сои к вирусной инфекции соответствуют известным данным.1 288949 Определение коэффициента устойчивости растений квирусным заболеваниямАготн,ед. В мм Объект И.йаЬасош, сортТрапезонд1,07 0,83 91 123 Я.81 ой 1 пова 1,01 1,12 129 0,95 Б.саЪасиш, сортСамсун 4-28 85,5 103 71,5 1,12 Н.еаЬасиш, сортСамсун 3073 89,8 78,5 68 0,96 Соя, сортПриморский 494 158 177,5 81 82 Составитель И.МарченкоТехред А.Кравчук Корректор С. Черни Редактор Е.Хорина Тираж 627 ВНИИПИ Государственного комитета СССР по делам изобретений и открытий 113035, Москва, Ж, Раушская наб., д. 4/5