Штамм а ленинград28983 н3 n2 вируса гриппа, используемый для приготовления гриппозного диагностикума

/145 00 А ОБРЕТЕНИЯ ИСАН Д ВТОРСКОМ доваосударсткий инсоля меепараСССР982оструклировавиппаосы5- 180 Изобретение относится к области вирусологии и может быть использова но для получения гриппозного диагно тикума типа А/НЗ И 2/Целью изобретения является созда ние антигенно актуального штамма вируса гриппа А/НЗ И 2/, обладающего ингибиторорезистентностью и авид ностью по отношению к антителам чел веческих сывороток,Исходный вирус, используемый для получения диагностического штамма, выделен от больного ребенка 4 лет во время эмидемической вспышки ГОСУДАРСТВЕННЫЙ НОМИТЕТПО ИЗОБРЕТЕНИЯМ И ОТНРЫТИПРИ ГКНТ СССР(56) Авторское свидетельствоВ 1 040788, кл. С 12 И 7/00,Слепушкин А.Н. и др, Иммутура населения Москвы и циркшим в 1977 штаммам вирусов гА/НЗИ 2/, 11/111 И 1/ и В, Вопвирусологии, 1979, У 2, с. 1(54) ШТАММ А/ЛЕНИНГРАД/289/83 Н 3И 2 ВИРУСА ГРИППА, ИСПОЛЬЗУЕМЬЙ ДПЯПРИГОТОВЛЕНИЯ ГРИППОЗНОГО ДИАГНОСТИКУМА(57) Штамм А/Ленинград/289/83 НЗ И 2вируса гриппа, ГКВ У 1886 (Государственная коллекция вирусов при Институте вирусологии им. Д,И.Ивановского);используемый для приготовления гриппозного диагностикума. гриппа, Он обладал низкими показателями репродукционной активности в развивающихся куриных эмбрионах титр гемагглютининов 1:64; инфекционная активность 6,7 11 ЭИД Б 0/0,2 мл и был чувствителен к ингибиторам нормальных сывороток лошадей (1)320). Для получения диагностического штамма вирус пассировали 1 раз в присутоствии прогревающейся при 80 С в течение 1 ч сыворотки лошади в разведении 1:50 и 1 раз со смесью сыворотки лошади и морской свинки,разведенных в 10 раэ и прогретых при 80 С277607 Для выделения генетически однороднойсубпопуляции с высокой репродукционной активностью проведено получение высокоурожайного клона вирусапутем разделения популяции по скоростям репродукции в клеточной культуре МДСК и последующее б-кратноеклонирование предельными разведениями на куриных эмбрионах с отбором иконтролем клонов по гемагглютинирующей и инфекционной активности,резистентности к неспецифическим ингибиторам сывороток и авидности к специфическим антителам сывороток людей.Общее число пассажей на куриныхэмбрионах 9, на клетках МДСК 1,Штамм вируса гриппа А/Ленинград/289//83, используемый для приготовлениягриппозного диагностикума,депонирован в Государственной коллекции вирусов при Институте вирусологии им,Д,И,Ивановского АМН СССР за Р ГКВ188 б и характеризуется следующимипризнаками, 25Физические свойства. Коэффициентседиментации 750 Б, плавучая плотность 1,21 Г/см еРепродукционная активность, Титргемагглютининов 1;256 в 0,2 мл с1%-ным эритроцитами кур, инфекционный титр 9 1 я ЭИД 5, /0,2 млвСтабильность биологических свойствштамма А/Ленинград/289/83 доказанапри 12-кратном пассировании.Морфологические признаки, Полиморфная структура, типичная для вирусов гриппа,Ингибиторорезистентный штамм вируса гриппа А/Ленинград/289/83 в перекрестный РТГА реагирует с антисы 40вороткой к вирусу А/Филиппины/2/82до полного титра, с антисывороткойк вирусу А/Бангкок/1/79 - до 1/2 гомологичного титра, с антисывороткой45 Разница Ж Число ис- Сравниваемые вирусы Частота достоверных серо-.конверсий.Х следуемых парных сывороток,шт 14 с 7 А/Ленинград/289/83 5,7 1 Дети с ОРЗ РТГА А/Филиппины/2/82 А/Ленинград/289/83А/Техас 1/77 А/Ленинград/289/83 А/Техас 1/77 1,3 38 б 2 Дети с ОРЗ РТГА 3 Дети с ОРЗ РТГА 16 170 12,3 Опыт Контингент Реакцияобследова- ния к вирусам А/НЗБ 2/, выделенными в 1983 г в Ленинграде, У 156, 279 и 293 до полного титра.Анализ диагностической активности вирусов гриппа А/Ленинград/289/83 и известного вируса А/Филиппины/2/82 выполнены на материале обследования сывороток детей и взрослых, переболевших ОРЗ, в РТГА и реакции радиального гемолиза (РРГ) при использовании диагностикумов, приготовленных из указанных штаммов, Диагностическая активность (% сероконверсий) в РТГА выше у штамма Р 1886 по сравнению с прототипом на 5,7% (14,7 и 9% соответственно), в РРГ - на 4,8% (23,8 и 19% соответственно). По сравнению с другими штаммами вируса гриппа А/НЗ И 2/ в повторных опытах диагностическая активность штамма выше в обеих реакциях на 2,3-10% (в среднем на 5,5 %),Использование штамма А/Ленинград//289/83/ в сравнении с вирусомА/Бангкок/7/79/ при оценке иммуногенности филиппиноподобных вакцинныхштаммов для детей и взрослых показало, что при использовании в РТГАштамма У 1886 определяемые показатели иммуногенности живых гриппозныхвакцин выше, чем со штаммом А/Бангкок/1/79, на 6-10%,Диагностикум представляет собойпрозрачную желтовато-оранжевую жидкость, Титр гемагглютининов составля"ет от 1;128 до 1:256 (в реакцияхгемагглютинации и торможения гемагглютинации).Эффективность серодиагностикигриппа при использовании вируса А/Ленинград/289/83 и других антигенных .вариантов вируса грипппа А/НЗМ 2/ вРТГА и РРГ приведена в таблице,6Продолжение таблицы 1277607 Контингент РеакцияобследоваОпыт Сравниваемые вирусы Разница Х Частота достоверных серо-. конверсий. ння 4 Взрослые .доноры (после ОРЗ) РТГА 5 Взрослые н дети с ОРЗ РРГ 42 Составитель Г,Смирнова Редактор С.Рекова ТехредЛ,Сердюкова Корректор Т.МалецЗаказ 8035 Тираж 501 ПодписноеВНИИПИ Государственного комитета по изобретениям и открытиям при ГКНТ СССР 113035, Москва, Ж, Раушская наб., д. 4/5 Производственно-издательский комбинат "Патент", г.ужгород, ул. Гагарина,)01 125 А/Ленинград/289/83 А/Техас/1 /77 А/Бангкок/1/79 А/Ленинград/167/83 А/Ленинград/289/83 А/Техас/1/77 А/Филиппины/2/82 20,0 16 18,6 15,2 23,8 19 19