Способ прогнозирования течения псориаза

СОЮЗ СОВЕТСКИХСОЦИАЛИСТИЧЕСКИХРЕСПУБЛИК К 39/00, 1 01 Х ЗЗ/49 ГОСУДАРСТ ПО ДЕЛАМ ННЫИ КОМИТЕТ СССРОБРЕТЕНИЙ И ОТКРЫТИЙ САНИ БРЕТЕНИ д р г ЕТЕЛЬСТВУ ВТОРСНОМУ институт Машкиллейсон,диня оторые показавности и имму- . В кн: Актив- и венерологии,(21) 3892500/28-14(56) Рубинс А. Я. и др. Нетели неспецифической реактнитета у больных псориазомные вопросы дерматологииРига, 1984, с. 15 - 18.(54) СПОСОБ ПРОГНОЗИРОВАНИЯТЕЧЕНИЯ ПСОРИАЗА(57) Изобретение относится к иммунологии. Цель изобретения - повышение точности прогнозирования течения псориаза801263250 Раствор эритроцитов барана смешивают с гемолитической сывороткой, инкубируют и отмывают при центрифугировании. Смешивают лимфоциты и сенсибилизированные эритроциты. В следующих 3 лунках для определения спонтанного разрушения эритроцитов смешивают раствор Хенкса с эритроцитами. Для определения максимального лизиса эритроциты смешивают с дистиллированной, водой, инкубируют, центрифугируют и снимают супернатант. К супернатанту добавляют раствор бензидина в ацетатном буфере и перекись водорода. При спектрофотометрии определяют интенсивность окрашивания. Затем определяют процент антителозависимой цитотоксичности. При цитотоксической активности лимфоцитов Я а пределах до 23% прогнозируют затяжное течение псориаза.11Изобретение относится к медицине, касается вопросов прогнозирования течениязаболевания кожи, в частности прогнозирования наступления ремиссии псориаза,Целью изобретения является разработкаповышения точности прогнозирования течения псориаза.Способ осуществляется следующим образом,Для определения антителозависимой цитотоксичности лимфоцитов (АЦЛ) периферической крови используют в качествеклеток-мишеней эритроциты барана, сенсибилизированные кроличьей антисывороткойк ним в субагглютинирующем титре. Дляэтого 1 мл 2,5 о/о-ного раствора эритроцитовбарана смешивают с 1 мл кроличьей гемолитической сыворотки в разведении 1:6401:1280. Инкубируют при 37 С 30 мин и затемотмывают 2 раза раствором Хенкса центрифугированием при 1500 об/мин в течение5 -мин. Сенсибилизированные эритроцитыразводят до концентрации 1 10 -2 10 кл/мл и используют в дальнейшемЛимфоциты периферической крови, выделенные общепринятым способом на градиенте плотности фиколл - верографина(Ы = 1,08 г/см), отмывают 3 раза раствором Хенкса и доводят до концентрации2 10 кл/мл. Затем в 96-луночных круглодонных планшетах для иммунологическихисследований смешивают 0,1 мл лимфоцитов-эффекторов и 0,1 мл сенсибилизированных эритроцитов смешивают в 3 лунках(опыт). 0,1 мл эритроцитов и 0,1 мл раствора Хенкса смешивают в следующих 3 лункахдля определения спонтанного разрушенияэритроцитов (СРЭ).Для определения максимального лизиса(мл) 0,1 мл эритроцитов смешивают с 0,1 млдистиллированной воды. Плату инкубируют3 ч при 37 С в атмосфере с избытком СО ,центрифугируют 10 мин при 1350 об/мини по 0,1 мл супернатанта снимают в микропробирки (Ч = 0,5 мл) . Для определенияцитолитической активности к исследуемымсупернатантам добавляют по 0,2 мл 0,1 о/оного раствора бензидина в ацетатном буфере (рН 4,6) и 0,2 мл Зо/о-ного раствора перекиси водорода.Интенсивность появляющегося голубогоокрашивания определяют на спектрофотометре СФ 26 при длине волны 765 мм в единицах экстинции.Процент антителозависимой цитотоксичности определяют по формуле:АЦЛ (о/о) = Опыт-ОРЗ.10 У/оЛЛ - СРЭгде используют средние показатели 3-х параллельных определений оптической плотности супернатантов.Пример 1. Больной М. М 53 года, болеет псориазом 40 лет. На коже больного множество псориатических высыпаний (псориати 263250 5101520 25 Зо 35 40 45 50 55 ческие папулы, чешуйки) в патологический процесс выявлен 60/о кожного покрова.На 19-й день при определении с помощью способа-прототипа содержание лизоцима в периферической крови было выявлено 2,5 мкг/мл, что указывает на затяжное течение или скорости рецидивов заболевания. При определении К-клеток предложенным способом выявлено 28,8 о/о, на основе чего прогнозировано наступление ремиссии. Дальнейшее наблюдение за больным подтвердило правильность прогноза, поскольку была отмечена регрессия высыпания, и с помощью обшепринятой терапии был достигнут полный регресс патологического кожного процесса.Таким образом, учитывая наступление ремиссии (по данным К-клеток), больного можно было выписать для амбулаторного лечения.Пример 2. Больной С. А., 36 лет, мужчи на, болеет псориазом 4 мес. На коже больного множество псориатических поражений (псориатические папулы, чешуйки и т.д.) в патологический процесс вовлечено 70 о/о кожного покрова.На 20 - й день с помощью прототипа выявлено содержание лизоцима 4 мкг/мл, что свидетельствует о затяжном течении псориаза. С помошью нового способа на 22-й день выявлено К-клеток 67,0 о/о (при режиме 1 10 мл лимфоцитов, инкубации 3 ч и 36 С), что свидетельствует о наступлении ремиссии, Дальнейшее наблюдение полностью подтверждает правильность прогноза новым способом, так как у больного с обгцепринятыми средствами был достигнут полный регресс высыпаний, а дальнейшее наблюдение в течение 4 мес подтвердило прогноз, в частности не отмечены рецидивы.Пример 3. Больная Ю. И., 41 год, болеет псориазом 21 год. Лечилась неоднократно стационарно. У больной поражено 90/о кожного покрова, на котором имеются псориатические папулы и чешуйки, и т.д., в процесс вовлечены и суставы (болезненность).При обследовании больной на 24-й день стационарного лечения выявлено содержание лизоцима, что свидетельствует о неблагоприятном прогнозе - 5,0 мкг/мл.В тот же день активность К-клеток крови была равна (при режиме 2 О /мл лимфоцитов, инкубации 3,5 ч и 38 С) 0%, что также свидетельствует о неблагоприятности прогноза.Дальнейшее наблюдение за больной подтвердило новый способ неблагоприятности прогноза заболевания - затяжное течение, так как, несмотря на длительное стационарное и амбулаторное лечение, спустя 4 мес после выписки из стационара развился рецидив (появление новых папул по всему телу, усилились боли в суставах) в связи с1263250 формула изобретения Составитель Г. Крюкова Техред И. Верес Корректор М. Самборская Тираж 660 Подписное ВНИИПИ Государственного комитета СССР по делам изобретений и открытий 113035, Москва, Ж - 35, Раушская наб., д. 4/5 Филиал ППП Патент, г. Ужгород, ул. Проектная, 4Редактор М. КелемешЗаказ 5458/3 чем больная была госпитализирована повторно.Пример 4. Больной П. С. (история болезни Мо 4514 от 19.11.84 г.) 54 г., болеет псориазом 20 лет, электросваршик. У больного 50% кожного покрова было покрыто псориатическими элементами (папулы, чешуйки). Обострение процесса началось 2 мес назад, Лечился амбулаторно, но безуспешно. Был госпитализирован в кожное отделение.При определении лизоцима выявлено 7,5 мкг/мл, что свидетельствует о затяжном течении. При определении К-клеток в периферической крови на 13-й день стационарного лечения их активность была 23,0%, что свидетельствует о затяжном течении псориаза, Дальнейшее лечение показало, что больной плохо поддавался терапии и улучшение наступило только на 34-й день стационарного лечения. С остаточными явлениями псориатических высыйаний был выписан из стационара. Однако через 3,5 мес после выписки из стационара развился следуюший рецидив болезни,Таким образом, с помошью только нового способа был поставлен правильный прогноз болезни об его затяжном течении: АцЛ%) = 0,02 БТ 100 о/о = 23% о - 0,059 Применение изобретения обеспечиваетповышение точности прогнозирования наступления ремиссии или развитие затяжного течения псориаза на 40% (по прототипу только в 40-60% удавалось точно поставить диагноз, а по предложенному способу в 100/о случаев).1 О Способ прогнозирования течения псориаза путем исследования крови больного, отличающийся тем, что, с целью повышения точности способа, из исследуемой крови выделяют лимфоциты, добавляют сенсибилизированные эритроциты барана и специфическую гемолитическую сыворотку кро лика, инкубируют 3 - 3,5 ч при 36 - 38 С,определяют цитотоксическую активность лимфоцитов по лизису бараньих эритроцитов и при активности лимфоцитов в пределах 28,8 - 67,0% прогнозируют ремиссию заболевания, а в пределах до 23% прогнозируют 25затяжное течение псориаза.