Способ получения объемного трехмерного изображения биологических объектов и его внутренних структур

СОЮЗ СОВЕТСНИХСОЦИАЛИСТИЧЕСКИХ 01257444 РЕСПУБЛИ 1 В 100 ц 4 С 01 М 1/2 ГОСУДАРСТВЕННЫЙ НОМИТЕТ СССРПО ДЕЛАМ ИЗОБРЕТЕНИЙ И ОТКРЫТИИ САНИЕ ИЗОБРЕТЕНИ У ТЕЛЬС А ВТОРСКОМУ С,Проняев615475 (088Туркевич И,Гскопическихс. 17-46.торское свидетельс263, кл, А 61 В 10ик, 10.11.82.СПОСОБ ПОЛУЧЕНИЯ ОБ1 ЕРНОГО ИЗОБРАЖЕНИЯКТОВ И ЕГО ВНУТРЕННИИзобретение относитолучения объемногоизображения биологических объектов,Цель изобретения - пространственнаялокализация гистохимических компонентов, Получают два ряда срезов. Наодном из рядов стекол со срезами.производят постановку гистохимической реакции. Срезы другого ряда окрашивают обычным методом. Производятзарисовку контуров исследуемых гистологических структур. Эти зарисовкисовмещают прн зарисовке следов гистохимической реакции, Листы бумаги ссовмещенными зарисовками наклеивают КИХ на восковые пластины, Готовят модели срезов. На основании этих моделейизготавливают реконструкционную моо дель.Предварительно подготавливают дваряда предметных стекол и н каждом ряде производят их сквозную нумерацию,При изготовлении серии срезов последние располагают поочередно (черезодин срез) то на один ряд стекол, тона другой. Таким образом, вместо одного ряда последовательных срезов нанескольких предметных стеклах (какпрактикуется при изготовлении сериигистологических препаратов) получаютдва ряда срезов, расположенных черезодин срез в каждом ряде стекол. Наодном из рядов стекол со срезами25производят постановку гистохимической реакции, а срезы другого ряда обрабатывают обычными гистологическимиметодами окраски. На пронумерованныхлистках бумаги (при нужном увеличении) производят зарисовку контуровисследуемых гистологических структури направляющих ориентиров, затем путем совмещения по направляюшим ориентирам таким же увеличением на соответствующих нумерации лист ках бумаги с зарисованными контурами гистологических структур производят зарисовку следов гистохимической реакции, применяя цветные карандаши илифломастеры, Листы бумаги с совмещенными зарисовками наклеивают на восковые пластины (в связи с тем, чтона каждом листке бумаги произведенызарисовки с двух срезов, толщинавосковых пластин соответственно долж 45на быть больше в два раза, чем приобычном изготовлении моделей) и готовят модели срезов, те, вырезывают контуры исследуемых структур,Для четкой ориентировки расположениецветных пятен - следов гистохимической реакции обозначают на кромке восковых пластин (моделях срезов) специально заранее приготовленным (окрашенным и расплавленным) воском, Наосновании полученных моделей срезовс направляющими ориентирами изготавливают конструкционную модель,ЭО Изобретение относится к биологии и медицине и предназначенодля использования в научных и диагно.стических исследованиях,5Цель изобретения - пространственная локализация гистохимических компонентов,Способ осуществляют следующим образом. П р и м е р. 11 редварительно подготавливают два ряда предметных стекол: ряд А и ряд Б. В каждом ряде производят сквозную нумерацию стекол. С исследуемого объекта, например почки зародыша, с заключенными в блок направляющими ориентирами (двумя капроновыми разноцветными нитями) готовят серию гистологических срезов, располагая их поочередно через один то на ряд А, то на ряд Б (например, четные срезы в порядке их срезывания помещают на ряд А, нечетные - на ряд Б). Таким образом, получают два ряда стекол со срезами, расположенными через один в каждом ряде, Срезы ряда А обрабатывают обычным гистологическим способом окраски, например по Ван-Гизону, а на срезах ряда Б производят постановку гистохимической реакции, например, на сукцинатдегидрогеназу, На пронумерованных листках бумаги при нужном увеличении со срезов ряда А производят зарисовку контуров исследуемого объекта, например канальцев нефрона, на листке бумаги Р 1 зарисовывают первый срез., на листке У 2 - второй срез и т.д. Затем при таком же увеличении, сопоставив по направляющим ориентирам срезы ряда Б, на соответствующих нумерации листках бумаги с зарисовками контуров гистологических структур зарисовывают следы гистохимической реакции, используя цветные карандаши или фломастеры: например, синим зарисовывают места накопления осадков синего цвета (диформазана), красным - моноформазана, Листки бумаги с совмещенными зарисовками наклеивают на восковые пластины и вырезывают из них модели срезов. Толщина восковых пластин должна, быть в два раза больше (согласно увеличению при зарисовках), так как на одной зарисовке совмещены данные, полученные с двух срезов, На торцах полученных моделей срезов предварительно приготовленным (окрашенным и расплавленным) воском обозначают места расположения пятен скопление осадков изучаемого биологически активного вещества (диформазана и моноформазана), Известным способом при помощи направляющих ориентиров изготавливают восковую реконструкционную модель формирующейся канальцевой части нейрона с1257444 ных, научных и диагностических исследований. Формула изобретения Составитель Т,Журавкина Техред И.Попович Корректор А.Обручар Редактор А.Огар Заказ 4907(38 Тираж 778 Подписное ВНИИПИ Государственного комитета СССР по делам изобретений и открытий 113035, Москва, Ж, Раушская наб д. 4(5Производственно-полиграфическое предприятие, г, Ужгород, ул, Проектная, 4 местами локализации скоплений сукцинатдегидрогеназы, а также их форму в объемном иэображении и размеры.Предлагаемый способ дает воэможность получить четкую информацию о 5 пространственном распределении в отдельных органах и тканях организма ферментов, нуклеиновых кислот, микроэлементов и других биологически активных соединений. 1 ОСпособ позволяет проследить за ходом качественных изменений содержания и локализации биологически активных соединений в процессе нормальной жизнедеятельности организма и в 15 различных экстремальных условиях,Изобретение может быть использовано при проведении экспериментальСпособ получения объемного трехмерного иэображения биологических объектов и его внутренних структур путем окраски гистологических препаратов, зарисовки контуров и его внутренних структур на бумаге с использованием направляющих ориентиров реконструкции их на восковые пластины и изготовления реконструкционных моделей, о т л и ч а ю щ и й с я тем, что,.с целью пространственной локализации гистохимических компонентов, один из смежных срезов подвергают гистохимической обработке.