Способ выделения живых гельминтов из лягушек

(504 А 01 ОСУДАРСТВЕННЫЙ НОМИТЕТ СССРО ДЕЛАМ ИЗОБРЕТЕНИЙ И ОТНРЫТИИ АНИЕ ИЗОБ И ОМУ СВИДЕТЕЛЬСТВУ(54)(57) 1. СПОСОБ ВЫДЕЛЕНИЯ ЖИВЫХ ГЕЛЫ 1 ИНТОВ ИЗ ЛЯГУШЕК, о т л и ющий с я тем, что, с целью хранения жизнеспособности лягуш их помещают на 72-120 ч в 0,005- 0,00 Х-ный раствор мочевины в растворе нитрата.2. Способ по п.1, о т л и ч а ющ и й с я тем, что из нитратов используют нитрат калия или нитрат натрия, или нитрат кальция, или нитрат аммония в концентрациях соответственно 1:8000-10000; 1:10000-12000;1: 12000-14000 1: 13000-15000. ч а- соек,аразитология сельскохозяйст1959. с.34 .(71) Винницкий филиал Украинскойордена Трудового Красного Знаменисельскохозяйственной академии(56) Котельников Г,А. Гельминтологические исследования животных и окружающей среды. - М.: Колос, 1984,с.94-95.Щербина А.К.Болезни рыб.- Киев:Урожай, 1973, с.206-220,Ершов В.С. и др, Пи инвазионные болезнивенных животных, М.:35 В результате проведенных экспериментальных исследований установили, что наиболее эффективными являются 0,005-0,007%-ные растворы мочевины в растворах нитрата калия (1;8000- 10000) или в растворах ритрата нат 12535Изобретение относится к биологии,а именно к зоологии, и может бытьиспользовано в учебно-методическойи научно-исследовательской работев период проведения лабораторных 5занятий студентов и учащихся по курсам биологии, зоологии, физиологии,паразитологии, фармакологии и другимдисциплинам, а также для диагностических целей и в террариумах для 10дегельминтизации лягушек,Цель изобретения - сохранениежизнеспособности лягушек.Сущность изобретения состоит вслецующем. 5В сосуд емкостью 3 л наливают1 л дистиллированной воды, В водупосле взвешивания добавляют один изхимических реагентов: нитрат калияили нитрат натрия, или нитрат кальция, или нитрат аммония (например,О, 1 г нитрата калия, что создаетконцентрацию соли 1:10000), Содержимое сосуда перемешивают до растворения соли. Затем взвешивают 0,05 г 25кристаллической мочевины и ее вносят в только что приготовленныйраствор и после перемешивания получают 0,005%-цый раствор мочевины врастворе нитрата калия, В приготов- З 0ленный двухкомпонентцый раствор помещают лягушек любого вида, Сосудзакрывают крышкой в которой предварительно сделаны отверстия диаметром 1 см для доступа воздуха.В растворе лягушки вьдерживают 72120 ч. После истечения этого временикрышку с сосуда снимают и удаляютлягушки. Содержимое банки сливаютв другой сосуд, например кювету;40раствору дают отстояться 5 мин, приэтом вьделенные лягушками гельминтыоседают на дно. Их учет и сбор проводят общепринятыми методами, послечего используют на лабораторных занятиях студентов или учащихся илис научными целями, Лягушки возвращаютв террариум,Для отработки режимов выполненияспособа бьыи приготовлены растворыразличных концентраций, представленные в таблице,53 2рия (1:10000-12000), или в растворах нитрата кальция (1:12000-14000), или в растворах нитрата аммония (1:13000-15000), причем активное выделение гельминтов наблюдается через 72-120 ч после помещения лягушек в растворы. С концентрациями, выходящими за пределы изложенных выше, применение растворов мочевины в растворах солей нитратов не сопровождалось положительным эффектом.Применение растворов мочевины или растворов солей нитратов в указанных пределах,но не сочетанно, а раздельно, также не сопровождается положительным эффектом.П р и м е р 1. Известными способами готовят в стеклянной банке емкостью 3 л раствор нитрата калия при концентрации 1:8000, В этот же раствор добавляют 0,05 г мочевины. В банку помещают 5 прудовых лягушек, В другую банку (контрольную) с 1 л дистиллированной воды указанных химических реагентов не вносят, но помещают 5 таких же лягушек, Банки закрывают капроновыми крышками (в каждой крышке имеется по 1 отверстию диаметром 1 см) и содержат при 18 С.е Ведут наблюдения. Через 72 ч от начала опыта лягушки удаляют из банки, раствор сливают в кювету, проводят учет и сбор гельминтов. Затем раствор с кюветы выливают в сосуд и туда же помещают лягушек, Эту процедуру повторяют через 96 и 120 ч, Через 72 ч из кишечника лягушки вьделился 1 гельминт, через 96 ч - 3 и через 120 ч - 2. В контрольном сосуде гельминты не обнаружены.Н р и м е р 2, В стеклянную банку емкостью 3 л наливают 1 л дистиллированной воды, вносят 0,111 г нитрата калия (раствор 1:9000), растворяют, добавляют 0,06 г мочевины, снова перемешивают, получают 0,006%-ный раствор мочевины в растворе нитрата калия. В контрольный сосуд наливают такую же воду, реактивов не вносят, В оба сосуда помещают по 5 прудовых лягушек, банки закрывают капроновыми крышками с отверстием и выдерживают до 144 ч. Через каждые 24 ч ведут учет и сбор гельминтов, как изложено в примере 1. В опытном сосуде через 24 и 48 ч гельминты отсутствовали, через 72 ч их было 2, через 96 ч - 5, через 120 ч - 3 и через 144 ч - О,Сосуд,У Концентрация 1 (контроль) 2 3 4 5 6 Растворов нитрата калия 1:7000 1:8000 1:9000 1: 10000 1:11000 Мочевины в растворах нитратакалия,7. 0 0,004 0,005 0,006 0,007 0,008 Растворов нитратанатрия 0 1:9000 1:10000 1:11000 1:12000 1:13000 Иочевины в растворе нитрата натрия,7.Растворов нитратакальция 0 0,004 0,005 0,006 0,007 0,0080 1: 11000 1: 12000 1: 13000 1; 14000 1: 15000 Иочевины в растворе нитрата кальция,Х О 0,004 0,005 0,006 0,007 0,008 Растворов нитратааммония 0 1: 12000 1: 13000 1: 14000 1: 15000 1: 16000 Мочевины в растворенитрата аммония,7 0 0,004 0,005 0,006 0,007 0,008 3 25 т,е. за период опыта от 5 лягушек было получено 10 гельминтов, а в контроле О.П р и м е р 3. В контрольный и опытный сосуд наливают по 1 л дистил-лированной воды. В опытный сосуд вно-, сят О, 1 г нитрата калия и 007 гмочевины, после растворения реагентов (очередность аналогична примеру 1) получают 0,0077.-ный растВор мочевины 10 в растворе нитрата калия ( 1: 10000). В контрольный сосуд реагенты не вносят. Затем в оба сосуда помещают по 5 прудовых лягушек. Учет и сбор гельминтов такой же, как и в примере 1. 15 В опытном растворе было через 72, 96 и 120 ч соответственно 1,2 и 1 гельминтов, а в контроле гельминты отсутствовали.П р и м е р 4. В две стеклянные 20 банки наливают по 1 л дистиллированной воды. В опытную банку добавляют О, 1 г нитрата натрия и 0,05 г мочевины. В контрольный сосуд химические вещества не вносят, В обе банки по мещают по 5 прудовых лягушек. Банки закрывают капроновыми крышками (в каждой крышке имеется одно отверстиеФ диаметром 1 см) и содержат при 18 С. Через 72 ч от начала опыта лягушки из сосудов удаляют и ведут учет и 3553 4сбор гельминтов. Затем лягушек возвращают в соответствующие сосудыи из кювет наливают раствор и воду.Эту операцию повторяют через 96 и120 ч от начала опыта, Через 72 чбыло собрано 2 гельминта, через96 ч - 2, через 120 ч - 1, через144 ч - О. В контроле гельминты не быпи обнаружены.П р и м е р 5. Постановка опытааналогична примеру 4, однако вместо нитрата натрия используют нитраткальция в концентрации 1: 12000 и0,0057-ный раствор мочевины. Дальнейший ход опыта аналогичен изложенному в примере 4. В контрольном сосудегельминтов не обнаружили, а в опытном растворе получено было 1 через 72 ч, 3 - через 96 ч, 1 через 120 ч и 0 через 144 ч. П р и м е р 6, Постановка опыта аналогична примеру 4, однако вместо нитрата натрия используют нитрат аммония при концентрации 1:1300 и 0,0057.-ный раствор мочевины. Через 24,48,72,96,120 и 144 ч от начала опыта в опытном сосуде обнаружили соответственно 0,0,1,2,2 и 0 гельминтов, в контроле гельминты не обнаружены.