Способ диагностики бактерионосительства брюшно-тифозной инфекции

.(504 А 6 0 НИЯ ЕЛЬСТВ У СВИ АВТОР п овкн реакции иммун жду испытуеьвщ ма ческой иммунной с и ч а ю щ и й с я ю повышения точно ЦИИ путе флюоре сц риалом и ции епец о т кои с це тем, ч сследуеостный и диагностик качеств мого материал используют стве иммунно скую сыворотмозг, а в качки - специфичмам УР ыворотк 1.-фор. рав неГОСУДАРСТВЕННЫЙ НОМИТЕТ СССРПО ДЕЛАМ ИЗОБРЕТЕНИЙ И ОТНРЫТИИ ОПИСАНИЕ ИЗОБР(71) Ордена Трудового Красного Знамени научно-исследовательский институтэпидемиологии и микробиологииим. Н.Ф.Гамалеи и 2-й Московский ордена Ленина государственный медицинский институт им. Н.И.Пирогова(56) Беседнова Н.И., Сомов Г,Н. Снительное изучение эффективностикоторых иммунологических методов диагностики брюшного тифа и бактерионосительства. Журнал гигиены, эпидемиологии,микробиологии и иммунологии, 1972, т. 16, В 2, с. 302-.307. 54) (57) СПОСОБ ДИАГНОСТИКИ БАКТЕРИНОСИТЕЛЬСТВА БРЮШНОТИФОЗНОЙ ИНФЕК -Изобретение относится к медицине и может быть использовано для диагностики бактерионосительства брюшнотифозной инфекции.Цель изобретения - повышение точности диагностики путем выявления Ь-форм Б,СурЬ 1 с помощью специфической иммунной сыворотки в костном мозге носителя.Способ осуществляют следующим об-. разом.Для исследований получают образцы костного мозга путем стернальной пункции. Из пунктата осторожно отделяют пробы ткани самого костного мозга (а на периферической крови) и наносят на предметное стекло, распределяя его легким движением шлифованного стекла (аналогично приготовлению мазков крови), мазок фиксируют в 96 спирте 15 мин и высушивают на воздухе. Препараты обрабатывают по непрямому методу Кунса, используя стандартные специфические иммунные сыворотки к глобулинам кролика, меченные изотиоцианатом флюоресцеина1,фИТЦ ), и бычий альбумин, меченный родамином, а также специфическую гипериммунную кроличью сыворотку к Ь-форме Б.ур 11. При непрямом методе иммунофлюоресценции (РИф ) мазки костного мозга обрабатывают сначала специфическими иммунными сыворотками против Ь-форм Б,1 урЬ 1 в их рабочем разведении, инкубируютопри 37 С в течение 30 мин и промывают забуференным физиологическим раст. вором с рН 7,2-7,4. Затем на препарат наносят меченную фИТЦ ослиную антисыворотку против глобулинав кролика, к которой предварительно добавляют раствор бычьего альбумина,конъюгированного с родамином, используемый для контрастирования фонаи освобождения от возможного неспецифического свечения, Затем мазкиснова инкубируют во влажной камерео30 мин при 37 С, тщательно промывают забуференным физиологическимраствором с рН 7,2-7,г и высушиваютна воздухе. Реакцию учитывают с помощью люминесцентного микроскопа,Специфическое свечение антигенаЬ-форм Б.сур, присутствующего, какправило, на мембранах клеток эритроцитарного и лимфоидного ряда, атакже в цитоплазме макрофагов, является диагностическим признаком и50 55 О 5 го г 5 30 35 10 5 свидетельствует о носительстве боюшнотифсзной инфекции,П р и м е р 1. М-ов, 45 лет.В 1975 году перенос брюшной тиф. Ди.агноз был подтвержден выделениемгомо- и копрокультур. После перене".сенной инфекции сформировалось хрончческое бактерионосительство, при котором копрокультуру выделяли в 1980-1981 годах. В 1982 году проведен повторный курс лечения (бактериофаг, диуцефон,ампициллин), после которого как микробиологические (высев крови, костного мозга, кала мочи), так и серологические (РПГА с О- и Ч 1-антигенами. реакция Видаля, реакция коагглютинации) исследования были отрицательными. Только в препаратах костного мозга в РИф с сывороткой против Ь-Форм был выявлен антиген Ь-форм Б.СурЬ 1, Это позволило диагностировать у данного больного латентную фазу бактерионосительства н оставить его на диспансерном . учете.Приме р 2, А-ва, 26 лет. В 1977 году перенесла брюшной тиф с атипичной клинической картиной, подтвержденный выделением гемокультуры Б.урЬ 1. После заболевания сформировалось хроническое бактерионосительство с периодическим выделением копрокультуры Б,сурп 1. 1 еоднократно получала лечение против хронического носительства (курс антибиотиков), после чего устанавливалась фаза латенции, Была обследована в один из таких периодов все попытки выявить возбудитель с помощью микробиологических (посев крови костного мозга, желчи, кала) и серологических методов (реакция Видаля, РПГЛ, реакция коагглютинации) давали отрицательный результат. Только при использовании метода РИф с антисывороткой против Ь-форм Б.1 ур 11. в препаратах костного мозга был выявлен антиген 1.-Форм, что позволило подтвердить бактерионосительство в латентной фазе.П р и и е р 3. К в 46 лет. В 197 ч году перенес брюшной тиф, подтвержденный выделением гемокультуры Б,ур 111, Бактерионосительство сформировалось сразу после перенесенного заболевания: с 974 по 1981 год в посевах кала периодически обнаруживали возбудитель. В период обследования находи-ся в Фазе латенции,ства. Составитель И.Васильев Техред В,Кадар Редактор Л,Пчелинская Корректор В. Бутяга Заказ 3220/7 Тираж 660ВНИИПИ Государственного комитета СССРпо делам изобретений и открытий113035, Москва, Ж, Раушская наб., д. 4/5 Подписное Производственно-полиграфическое предприятие, г.ужгород, ул.Проектная, 4 3 2 когда факт бактерионосительства не удавалось установить ни бактериологическими (посевы крови, кала, мочи), ни серологическими исследова - ниями (реакция Видаля, РПГА с 0- и И-антигенами, реакция коагглютинации). Только применение метода РИФ с использованием иммунной сыворотки против Ь-форм Б.урЬ позволило выя 72 б 4вить антиген возбудителя в препаратах костного мозга, что свидетельствовало о наличии бактерионоситель 5Таким образом, предлагаемый способ позволяет повысить точность диагностики при обследовании больных влатентной фазе.