Способ диагностики хронического панкреатита

(19) И 1) ГОС ПО АНИЕ ИЗОБРЕТЕНИ У 5 ершент Багдасаовян Асга ш329-33еатиты310. М.: СТИКИ ХРОпутем биоДАРСТВЕННЫЙ КОМИТЕТ СССРЕЛАМ ИЗОБРЕТЕНИЙ И ОТКРЫТИЙ Н АВТОРСКОМУ СВИДЕТ(71) Ереванский институствования врачей. БгцгЕ 1 Яер. 1963, 174,Шелагуров А.А. ПанкрМедицина, 1967, с.309(54)(57) .НИЧЕСКОГО ПАНКРЕАТИТА 11 А 61 В 10/00, С 01 Б 3 химического исследования крови,о т л и ч а ю щ и й с я тем, что,с целью повышения точности способа,в плазме крови с помощью диск-электрофореза в полиакриламидном гелепри рН 8,3 определяют изоферментыфруктозодифосфатальдолазы, определяют процентное содержание первойи второй аноднык фракций, а такжеконцентрацию диоксиацетонфосфатаи при содержании первой анодной фракции менее 153 и второй - 40-663 иуменьшении концентрации диоксиаце-.тонфосфата на 25-503 по сравнениюс нормой диагностируют хроническиипанкреатит.5 10 15 20 50 55 11Изобретение относится к медицине, а именно к диагностике заболеваний поджелудочной железы.Цель изобретения - повышение точности способа диагностики хронического панкреатита.Способ осуществляют сдедующим .образом.Для исследования берут 2 мл гепаризированной крови, которую центрифугируют при 1500 с 1 в течение 15 мин. Надосадочную жидкость разбавляют 407-ным раствором сахарозы в соотношении 1:1 и наносят по 0,08 мл на колонки с 5,57.-ным полиакриламидным гелем. Электрофорез проводят в трис -глициновом буфере рН 8,3 при 4 С, напряжении 400 В, силе тока 2,5 мА на каждую трубку. Длительность электрофореза 60- 90 мин.Для идентификации изоферментов готовят инкубационную смесь следующего состава: 0,1 М тис -НС 1 буфер (рН 8,0). 19,8 мл; 0,1 М БаС 1 2 мл; НАД 12 мг; 0,1 М раствор фруктозо--1,6-дифосфат 0,2 мл; фосфорглицеральдегиддегидрогеназа 0,24 мл (кристаллическая суспензия, содержащая 1600 мкг кристаллического белка); нитросиний тетразолий 1 мг/мл - 5 мл; феназинметасульфат 1 мг/мл 0,5 мл, Время инкубации 90 мин приФ37 С. После инкубации гели промывают и помещают в денситометр для регистрации изоэнзимотраммы. Для определения содержания диоксиацетонфосфата берут 1 мл плазмы, осаждают белки добавлением 0,1 мл 907.-ного раствора трихлоруксусной кислоты и центрифугируют при 1500 и в .течение 10 мин. Надосадочную жидкость нейтрализуют. Определение содержания диоксиацетонфосфата проводят в 3 мл инкубационной среды,состоящей из, мл: триэтаноламиновый буфер рН 7,6 (содержащий,1 мМ этилендиаминтетраацетата) 2,4; безбелко- вый нейтрализованный экстракт 0,5;1,35 10.М.НАД Н 0,1 глицерофосфат- дегидрогенаэа (содержащей 1,5 мг белка в 1,0 мл) 0,01. Оптическую плотность измеряют на сПектрофото:метре при 340 нм в течение 1 ч. Расчет проводят с учетом микромоляриой зкстинкции для НАД Н, Определяют изоферментный состав фруктозодифосфатальдолазы и концентрации диокси-,95979 2 ацетонфосфата и при содержании первой .анодной фракции фермента менее О, 157. и второй 40-667, и при уменьшении концентрации диоксиацетонфосфата на 25-507. от нормы диагностируют хронический панкреатит.П р и м е р. Больной М.В.Г,;64 г., поступил в клинику с жалобами на приступообразные боли в верхней части живота с иррадиацией в спину, тошноту, вздутие живота, кашицеобразный зловонный кал на фоне запоров и общую слабость.При поступлении кожные покровы с землистым оттенком, склеры субиктеричны, язык сухой, обложен белесоватым налетам. Живот мягкий, пальпация существенно болезненна на проекции поджелодочной железы, бо-. левые зоны и точки Шоффара - Риве,Губергрица в Скульского, Мейо - Роб. -сона Дежардена положительны, пальпация по Гротту положительна,. особенно справа25 Результаты лабораторно - инструментальных исследований, проведенныхв динамике при поступлении и в процессе лечения: СОЭ 33 - 36 мм/ч;лейкоциты 12,800; сероамилаза 11284 - 22 мг/ч мл, уроамилаза 752240-32 мг/ч мл; щелочная фосфатаза1,7 - 1, 13 мкмоль/чюмл,. АлАТ 4,20,41, АсАТ 2,9 - 0,35 мкмоль/чадил,ГТП 4,9. Билирубин общий .2421.ммоль/л, прямой 6-4, а непрямой 3518 - 17 ммоль/л; комбинированноеинтрадуоденальное определение амилолитической и протеолитической активности - понижение амилолиза и протеолиза; ЭРХПГ - фатеров сосок конусновидной формы, размерами до0,4 см в диаметре с .точечным устьем,Слизистая БДС гиперемирована, бархатистая с ворсинками канюляциялегкая, при введении 767-ного раствора верографина (5 мл) контрастируется главный панкреатический проток, протоки второго и третьего порядкаОтмечается резкая деформацияи расширение главного протока до0,8-0,9 см, в области тела - до0,6. см, в области хвоста до 0,3 см.Отмечается также резкая деформация и расширение протоков второго и .третьего порядка. Эвакуация контрастного вещества протоков железы резко замедлена. Заключение: .картина хронического паниллита, хронического панкреатита.,Заказ 7442/3 Тираж 721 Подписное. ВНИИПИ Государственного комитета СССР по делам изобретений и открытий 113035, Москва, Ж, Раушская наб., д,4/5.обострения 4Определение изоферментного спектРа фруктозодифосфалъдолазы показало, что процентное содержание пер.вой фракции составляет .10,8 (против 20,89+2,03 в контрольной группе), второй фракции - 64,8 (против 29,33+ 1,9 в контрольной группе).