Способ выявления генетического действия микрорадиоволн нетепловой интенсивности

,ПЬСТВ АВТОРСИОМУ ио ле оля ети ГОСУДАРСТВЕННЫЙ НОМ ПО ДЕЛАМ ИЗОБРЕТЕНИИ(71) Киевский ордена Трудового Крас .ного Знамени научно-исследовательский институт общей и коммунальнойгигиены им. А.Н.Марзеева(56) 1. Рамайя Л.К., Померанцева М.Д., Вилкина Г.А., Тихончук В.С. Изучение действия микроволн СВЧ на половые и соматическиеклетки млекопитающих. - Цитологияи генетика , т. 14, 1980, Р 6,с 3 8.2. Капустин А.А., Руднев М.И Леонская Г.И Конобеева Г,И. О генетических эффектах действия переменного электромагнитного п СВЧ-диапазона. - Питология и ген ка, вып. 5, 1976, с.400-402 (прототип).( 54 ) ( 57 ) СПОСОБ ВЬЯВЛЕНИЯ ГЕНЕЧЕСКОГО ДЕЙСТВИЯ МИКРОРАДИОВОЛНТЕПЛОВОЙ ИНТЕНСИВНОСТИ, включающийвоздействие на животных микрорадволн непрерывной генерации и посдукщий подсчет количества клетокс аберрациями хромосом, о т л ич а ю щ и й с я тем, что, с цельюобнаружения мутагенного или антимутагенного эффекта, облучению микрорадиоволнами подвергают животныхвозраста 3-5 месяцев в течение 20или 45 дней по 6-7 ч ежедневно, приэтом в качестве тест-системы используют хромосомы клеток паренхимы печени, после частичной гепатэктомии,находящихся в ана-тело-фазе первого митоза.Изобретение относится к экспери-ментальной биологии и медицине иможет быть использовано при оценкегенетического действия микрорадиоволн.Известен способ изучения генетического действия микрорадиоволн тепловой интенсивности на млекопитающих. Лабораторных животных (мыши,крысы) облучали микрорадиоволнамичастотой 2400-2500 МГц непрерывной 10генерации с плотностью потока энергии 5 - 800 мВт/см , О генетическом действии радиоволн судили по изменению целостности хромосом клеток костного мозга 11 . 15Иедостатком способа является то,что никаких изменений целостностихромосом не было обнаружено. Отсутствие эффекта объясняется неудачным выбором тест-системы.20Иаиболее близким к изобретениюпо технической сущности являетсяспособ изучения генетического действия микрорадиоволн нетепловогоуровня на млекопитающих. Исследования проводили на белых крысах-самцах. Животных облучали микрорадиоволнами частотой 2375 МГц непрерывнойгенерации при плотности потокаэнергии 0,05 мВт/см, в течение10 дней по 7 ч ежедневно. О генетическом действии микрорадиоволнсудили по изменению целостности иколичества хромосом в клетках костного мозга облученных животных 23,Иедостатком способа являетсято, что данный способ не позволяетвыявить генетические эффекты микрорадиоволн нетепловой интенсивности,так как в качестве тест-системывыбраны клетки быстрообновляющейся ткани, в которой не может иметьместо эффект накопления существенных повреждений хромосом вследствиеих элиминации. Жизненный цикл клетки костного мозга крыс не превышает 12 ч, а время существованияаберрации в клетке составляет около1,5 клеточных .цикла. Между тем генетические эффекты микрорадиоволннетепловой интенсивности, как слабого фактора, могут обнаруживатьсятолько в длительном экспериментеи в системах, способных к аккумуля,ции генетических повреждений,Целью изобретения является обнаружение мутагенного или антимутагенного эффекта, вызываемого микрорадиоволнами нетепловой интенсивностиаПоставленная цель достигаетсяте 1 л, что согласно способу выявления 60генетического действия микрорадиоволн нетепловой интенсивности, включающему воздействие на животных микрорадиоволн непрерывной генерации,и последующий подсчет количества 65 клеток с аберрациями хромосом, облучению микрорадиоволнами подвергаютживотных возраста 3-5 месяцев втечение 20 или 45 дней по 6-7 чежедневно, при этом в качестве тестсистемы используют хромосомы клетокпаренхимы печени, после частичнойгепатэктомии, находящихся в ана-тело-Фазе первого митоза.Способ осуществляют следующим образом.Белых беспородных крыс-самцов3-5 месячного возраста облучают втечение 20 или 45 дней по 6-7 часовежедневно. О генетическом действииэлектромагнитных волн судят по изменению количества клеток с поврежденными хромосомами (Фрагменты, мосты,фрагменты и мосты) в клетках паренхимы печени после частичной гептатэктомии, находящихся в ана-тело фазе первого митоза.Облучение микроволнами в предлагаемом режиме приводит к физиологическим изменениям в организме крыс,которые, в свою очередь, могут вызывать генетические эффекты,Применение в качестве тест-системы клеток паренхимы печени создает возможность уловить и выявить генетические эффекты нетепловых уровней микрорадиоволн. Это обусловлено тем, что паренхима печени у взрослых животных в обычных условиях является тканью практически не обновляющейся. Жизненный цикл гепатоцита у животных 3-5 месячного возраста составляет, в среднем, 150-200 дней. Указанное свойство обуславливает способность клеток печени накапливать генетические эффекты длительно воздействующих зкзогенных и эндогенных факторов. Это проявляется, в частности, в возрастании содержания. клеток с аберрациями хромосом по мере старения, что, в свою очередь, создает реальную возможность выявления не только мутагенного, но и антимутагенного эффекта изучаемого фактора.Таким образом, предлагаемый режкм облучения, использование в качестве тест-системы клеток паренхимы печени животных 3-5 месячного возраста в совокупности позволяют достичь поставленной цели, т.е.выявить генетическое действие микро- радиоволн как мутагенное, так и антимутагенное.П р и м е р 1, Облучению микрорадиоволнами частотой 237550 МГц непрерывной генерации подвергают белых беспородных крыс-самцов 3-х месячного возраста. Облучение проводят в камере, ограждения которой выполнены из поглощающего материала,-0,001 9 900 19,6+1,8 В.КузьмичевРедактор А.Черных Техред И,Гергель Корректор В,Гирняк Заказ 11352/4 Тираж 688 Подписное ВИИИПИ Государственного комитета СССР по делам изобретений и открытий 113035, москва, Ж, Раушская наб., д. 4/5филиал ППП Патент, г. Ужгород, ул, Проектная, 4 с коэффициентом отражения не более3 от величины падающей энергии.Животные находятся в пластмассовыхклеках, Условия содержания (световой режим, микроклимат, питание)облучающихся и контрольных животных одинаковые. Плотность потокаэнергии в месте расположения клетокс подопытными животными составляла 0,01+0,003 мВт/см . Продолжительность облучения - 45 дней по 6 чежедневно, Через 7 дней после прекращения облучения животным удаляли2/Зчасти печени. Это стимулируетклетки оставшейся части к размнохению. Через 29 ч после операции, когда наступает максимум первых митозов в гепатоцитах, крыс забиваютпутем растяжения. Каудальную долюпечени удаляют и фиксируют в Формалине. Иа гистологических срезах,окрашенных по.фельгену учитываютчисло клеток с поврежденными хромосомами (фрагменты, мосты, Фрагменты и мосты) среди 100.клеток нана-тело-Фазе митоза. Результатыпредставлены в таблице, В результатеоблучения обнаружено снижение количества клеток с аберрациями хромосом, т.е, облучение вызывало антимутагенный эффект. П р и м е р 2 . Облучению микро.1 ад 11 оволнами частотой 2375- 50 14 Гц,непрерывной генерации подвергаютбелых беспородных крыс-самцов 4-хмесячного возраста. Облучение проводят в камерах, описанных в примете1. Плотность потока энергии в месте,расположения к.1:еток с животнымисоставляет 0,050,015 мВт/см , Продолжительность облучения 20 днейдо 7 ч ежед:1 евно, .атем животныхоперируют по укаэанному способу,Через 30 ч крыс забивают, Каудальную долю печени берут для анализа,Приготовление и анатиз пре;аратов 15 проводят так, как н примере 1. Унеоблученньх животных количествоаберрантных клеток составляла 11,8.-0,95 (11 крыс), у части об 1 учее 1 нехкрьс наблюдалось повышение содержа О ния аберрантных клеток -, 8 11.10(6 крыс), а у части оно не тнчалось От кОнтрОля 11 составляло 108-0,8 (7 крыс) . Таким образом, прнда:1 ных услон;Еях эксперимента, когда 25 энергетическая 11 агруэка 1 ы а почтин два раза боьше, чее 1 н примере 1,асти живОтных От 1 е 1 а 1 ся уже мта -генный эффект.Предлагаемый се 1 особ 1 моет следую.1 ие преимущества. Позволяет уловить и выявить генетическое действие (как антнмутагенное, так и мутагенное) микрорадиоволн .нетеплоной интенс 1 вности. Он прОст в н 11 пОле 1 ее 1 ин 11 не требует переподготовки спсниел 11 стон.Предлагаемый способ целесообраэ- нО прееменя ть в медикО - б 1101 огнческ 11 х исследованиях, св яэанных с Оценкой генетической эна 111 мост 11 различных уровнен микрорадионолн с целью их генетической регламентац 1 и, при изучении е 1 ей 1 рого 1 онахьн 1: 1 ак торов регуляции генетического гомеостаза и генетических Основ процесса старения.